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LAMP实时浊度法是采用环介导等温扩增(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术通过实时浊度仪实时检测反应过程中所产生的白色沉淀,从而实现对扩增全过程的监控,弥补了显色法只能观看反应终点的缺陷,使引物筛选和反应体系的优化有数据可依。本研究以转基因玉米MON810为研究对象,针对外源基因苏云金芽孢杆菌杀虫毒蛋白CryIA(b)与内源基因边界序列设计6条特异性引物,通过实时浊度法在63 ℃的恒温条件下完成检测,对检测的灵敏度、特异性、稳定性进行了评价。建立了转基因玉米MON810的LAMP实时浊度检测方法,该方法最低检出限为0.5%,与LAMP显色法和实时荧光PCR法进行结果比对,符合率为100%,经评价具有特异性高、稳定性强、准确简便等优点,非常适合转基因玉米MON810的快速检测,有较好的应用价值。 相似文献
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研究了百里香酚和肉桂醛联用对沙门氏菌的抑菌效果,并将两者作为复配抗菌剂应用于盐焗鸡中以探究其保鲜效果。采用微量稀释法确定了百里香酚和肉桂醛对沙门氏菌的最小抑菌浓度及联合抑菌效果,结果显示百里香酚和肉桂醛的最小抑菌浓度均为0.25 mg/mL、最小杀菌浓度均为0.5 mg/mL;此外,两者联用时的分级抑菌浓度指数为0.75,表明百里香酚和肉桂醛具有较好的协同抑菌效应;该结论同样被时间-杀菌曲线、扫描电子显微镜、PI染色实验的结果所证实,百里香酚和肉桂醛联用可以显著地破坏沙门氏菌细胞膜的完整性,改变细菌形态,从而导致胞内物质泄漏、最终菌体裂解死亡,表明其具有一定的防腐保鲜应用潜力。因此,该研究以盐焗鸡作为食品模型从微生物和脂质氧化两方面探究了百里香酚和肉桂醛的防腐保鲜效果,结果显示百里香酚和肉桂醛联用可以显著地抑制盐焗鸡中细菌的增殖和脂质的氧化,表明百里香酚和肉桂醛联用可以作为一种天然复配抗菌剂应用于盐焗鸡等熟肉制品的保鲜中。 相似文献
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本文研究不同浓度的Fe~(2+)和Fe~(3+)对菠萝蛋白酶活性和60℃下酶稳定性的影响,以及通过圆二色谱检测Fe~(2+)和Fe~(3+)对酶构象的变化,并初步探究EDTA-2Na结合超滤膜法在菠萝蛋白酶制备工艺中清除铁离子的应用效果。结果表明:Fe~(2+)浓度在0~0.75 mmol/L范围内,对菠萝蛋白酶活性有促进作用,以0.5 mmol/L促进效果最佳,但浓度大于0.75 mmol/L时,抑制酶活,且随浓度增加,抑制程度增强。Fe~(3+)对菠萝蛋白酶只有抑制作用,抑制程度与Fe~(3+)浓度成正比,且Fe~(3+)对酶的抑制作用强于Fe~(2+)。60℃下,Fe~(2+)在浓度为0.5 mmol/L对菠萝蛋白酶的稳定性表现出促进作用,延长了酶的半衰期。Fe~(3+)对酶的稳定性呈现抑制作用。Fe~(2+)和Fe~(3+)浓度大于0.5mmol/L时,随离子浓度的升高,对酶稳定性的抑制作用增强。采用圆二色谱检测酶的二级结构表明:Fe~(2+)和Fe~(3+)对酶抑制作用表现为α-螺旋含量下降,β-折叠和β-转角含量稍下降,无规卷曲含量明显提高。EDTA-2Na结合超滤膜法除铁的效果很明显,铁含量(干重)从291.63 mg/kg降低到142.99 mg/kg,铁离子去除率达50.97%,其酶活也由597.27 U/mg上升到808.52 U/mg,酶活提高了26.13%。 相似文献
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不同金属离子对灵芝多糖液态发酵的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
研究不同金属离子对灵芝多糖含量的影响,发现K+、Mg2+和Fe2+可以促进灵芝多糖液态发酵,其中含Fe2+发酵培养基所产生物量和多糖最多,分别为7.299 g/L和0.720 g/L。在种子液培养基基础上加入0.2%Fe2+更有利于灵芝多糖产量的提高;在整个发酵罐扩大培养过程中,胞外粗多糖含量均是先上升后下降,在1 d~3 d时,胞外粗多糖含量呈轻微上升趋势,变化幅度较小。4 d~6 d时,胞外粗多糖含量有明显的上升趋势,而pH变化幅度较小,利于灵芝菌体产生多糖。在6 d时达到最大值。在同等条件下进行的发酵罐扩大培养摇比摇瓶发酵培养所得含量略高。说明发酵罐培养比摇瓶培养更利于生产灵芝多糖。 相似文献
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研究以蝇蛆为原料,通过营养成分及氨基酸组成分析,综合评价其营养价值。同时采用稀碱法提取蝇蛆蛋白,以提取率为指标,利用单因素试验与响应面优化法考察NaOH质量分数、料液比以及提取温度对蛋白提取率的影响。结果表明:蝇蛆蛋白质质量分数为51.73%,必需氨基酸与氨基酸总量比值(E/T)为41.012%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值(E/N)为69%,均优于FAO/WHO提出的参考蛋白及氨基酸模式。稀碱法提取蛋白最佳工艺为:NaOH质量分数2%、料液比1∶15g/ml、提取温度60℃。在此最佳工艺条件下蝇蛆蛋白的实际提取率可达58.21%;其中各因素影响程度大小依次为:温度、氢氧化钠质量分数、料液比。 相似文献
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对超声波辅助提取芸豆种皮水溶性多糖的优化工艺进行研究。在将芸豆种皮进行乙醇回流处理后,根据中心组合设计原理,在单因素基础上,选定pH、液料比、超声波功率和超声提取时间为实验因素,以芸豆皮水溶性多糖得率为目标建立回归数学模型,通过实验结果进行方差分析及对数学模型进行优化得到芸豆皮水溶性多糖的优化提取条件。实验结果表明,当pH为4.63、液料比为20∶1(mL∶g)、超声波功率为238W、超声提取时间为59min时,芸豆种皮水溶性多糖的理论得率为10.38%,验证值为10.43%。 相似文献