牡蛎生物活性肽的研究进展

生物活性肽是来源于蛋白质的多功能化合物,是可以调节生物机体的生命活动或具有生理活性作用的一类肽的总称。牡蛎肽又是生物活性肽的重要组成部分,含有丰富的蛋白质、人体必需的8种氨基酸、牛磺酸、维生素以及锌、硒、铁、铜、碘等微量元素;随着现代生物技术和医学技术的发展,制备牡蛎活性肽的方法多种,且牡蛎肽在抗氧化、降血糖、抗肿瘤、抑制血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)活性等方面具备特殊的生理活性。本文就牡蛎肽的制备以及牡蛎肽的生物活性等研究进行概述,为今后牡蛎肽的应用提供参考。     

玉米低聚肽中ACE抑制肽的分离纯化及结构鉴定

为了考察玉米低聚肽中血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的活性和结构,以玉米黄粉为原料,采用两步酶解法制备出玉米低聚肽,在对其基础理化成分进行分析的基础上,测定其总抗氧化活性。结果表明,玉米低聚肽中总蛋白质含量为92.15%±5.26%,酸溶蛋白质含量为87.57%±5.98%,脂肪含量为0.06%±0.01%,灰分含量为3.12%±0.38%,水分含量为3.54%±0.29%。玉米低聚肽的ACI抑制活性为0.55±0.03 mg/mL。利用反相高效液相色谱对玉米低聚肽进行分离纯化,选择ACE抑制活性最高的组分峰,利用质谱仪测定肽段序列,鉴定出4个ACE抑制肽段:AY、SAP、NAP、VNAP, IC50值分别为0.036±0.005, 0.039±0.004, 0.112±0.010和0.205±0.018 mg/mL,大约是玉米低聚肽的15.3, 14.1, 4.9和2.7倍,是具有较高ACE抑制活性的肽段。     

牡蛎肽和三文鱼皮胶原肽低致敏性和抗过敏活性研究

在对牡蛎肽和三文鱼皮胶原肽的氨基酸组成和分子质量分布分析的基础上,对其抗过敏活性和致敏作用也进行了研究。分析显示,牡蛎肽和三文鱼皮胶原肽氨基酸组成丰富,富含人体必需氨基酸;分子质量小于1 000 u的肽段含量高达88. 5%以上,主要分布在140~500 u,以二肽和三肽为主,易于人体的吸收;抗过敏活性试验显示:牡蛎肽、三文鱼皮胶原肽与小麦肽、玉米肽相比较,4种低聚肽均能抑制透明质酸酶的活性,IC50值分别为51. 47、79. 37、89. 57和107. 01 mg/m L,其中牡蛎肽的抗过敏作用最强,胶原肽次之,玉米肽的抗过敏作用最弱;进一步分析牡蛎寡肽和三文鱼皮胶原寡肽的抗过敏活性,结果显示抗过敏活性与寡肽的分子质量呈负相关性,且与疏水性氨基酸有一定的相关性;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试验结果显示:与相应蛋白质相比,牡蛎肽和三文鱼皮胶原肽的致敏作用均显著降低,且疏水性氨基酸较多的寡肽致敏作用要低于亲水性氨基酸较多的寡肽;本研究明确了牡蛎肽和三文鱼皮胶原肽的抗过敏活性和低致敏作用,为其应用于相应食品、药品的开发提供了一定的理论支持。     

模拟胃肠消化对牡蛎低聚肽抗氧化活性的影响

以去壳牡蛎肉为原料通过酶解法制备牡蛎低聚肽,并通过体外模拟消化试验,对比消化前后牡蛎低聚肽分子量分布、DPPH自由基清除能力、羟自由基(·OH)清除能力、ABTS自由基清除能力、氧自由基吸收能力(ORAC)变化,探究牡蛎低聚肽经模拟胃、肠道消化后抗氧化活性的变化。试验结果显示,牡蛎低聚肽的相对分子量主要在1 000 Da以下,胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后重均分子量下降不超过8.2%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,DPPH自由基清除率降低分别不超过7.9%,8.7%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,·OH清除率降低分别不超过9.3%,3.8%;胃蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率降低9.2%,胰蛋白酶消化后,ABTS自由基清除率提高3.6%;胃蛋白酶和胰蛋白酶消化后,ORAC值分别提高11.5%,1.3%。胃肠消化对牡蛎低聚肽的抗氧化活性评价各指标均无显著性影响(P＞0.05)。说明牡蛎低聚肽具有较好的综合抗氧化活性和稳定性。     

豌豆低聚肽硒螯合物的稳定性研究

以豌豆低聚肽和亚硒酸钠为原料制备豌豆低聚肽硒螯合物,对其水分、酸溶蛋白、总氮、分子质量分布的基础理化性质进行研究,然后以分子质量分布和硒含量为指标对螯合物的热稳定性、酸碱稳定性、消化稳定性进行考察。结果表明,豌豆低聚肽硒螯合物水分含量为(14. 17±1. 12)%(质量分数),酸溶蛋白含量为(23. 22±0. 12)%(质量分数),总氮含量为(23. 87±0. 30)%,分子质量分布在1 000 Da以下的占比超过76%。在温度25～100℃时,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于2%,硒含量变化不显著。在pH=3～11,分子质量分布在1 000 Da以下的部分比例变化均小于3%,硒含量虽有一定变化,但含量仍在78%以上。经过胃蛋白酶、胰蛋白酶和2种酶共同消化后,分子质量在1 000 Da以下的部分比例均都在90%以上,而硒含量变化不显著。这说明豌豆低聚肽硒螯合物具有一定的热稳定性、酸碱稳定性和消化稳定性。     

大米过敏的研究进展

食物过敏是机体针对摄入的食物产生的一种有害的、具有复发性的特定免疫反应,能够引起食物过敏反应的物质称为食物过敏原,食物中含有的致敏蛋白是引发食物过敏反应的一大来源。大米是世界上公认的最重要的粮食作物之一,全球约有一半以上的人口以大米为主食。大米蛋白占大米总量的8%~10%,含有丰富的必需氨基酸,易于被人体消化吸收,是公认的谷类蛋白中的上佳者。传统上认为,大米是低致敏性谷物,已被广泛应用于婴幼儿及配方食品中,但近年来的研究表明,大米也可引发食物过敏反应,可诱发过敏性皮肤炎、过敏性荨麻疹等症状,严重者还可引起过敏性休克。本文从大米过敏的流行性分布、主要的大米过敏蛋白以及过敏蛋白的检测方法等方面阐述了大米过敏的研究进展。     

紫苏籽肽对环磷酰胺致性功能损伤大鼠的改善作用

目的：研究紫苏籽肽对环磷酰胺造模大鼠性功能损伤的改善作用。方法：80 只SPF级6 周龄雄性SD大鼠随机分为8 组,每组10 只。除空白组外,其余各组大鼠通过注射20 mg/（kg mb·d）环磷酰胺造模,随后各干预组大鼠经不同剂量的紫苏籽肽和紫苏籽蛋白灌胃处理。用酶联免疫吸附测定、实时荧光定量聚合酶链式反应、苏木精-伊红染色分别检测大鼠血清中相关细胞因子、蛋白和激素水平,睾丸中相关基因表达量以及睾丸和肾脏组织的病理形态变化,同时检测睾丸和肾脏中超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量,测定睾丸和肾脏以及免疫器官的脏器指数。结果：模型组与空白组相比,大鼠血清睾酮、游离睾酮、促黄体生成素、卵泡刺激素、白细胞介素2、干扰素γ、免疫球蛋白G水平均显著下降,相关基因表达量显著降低,超氧化物歧化酶活力显著降低,丙二醛含量显著升高,脏器指数显著下降（P＜0.05）;不同剂量紫苏籽肽和蛋白处理组大鼠的上述指标均有不同程度改善,其中紫苏籽肽对于睾丸和肾脏氧化应激状态以及血清激素水平的影响显著（P＜0.05）。结论：紫苏籽肽可以有效改善环磷酰胺造成的大鼠生殖损伤状况从而达到改善性功能的作用,并提高大鼠血清白细胞介素2、干扰素γ、免疫球蛋白G水平和免疫器官脏器指数。     

柑橘皮发酵液抗氧化活性及对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的影响

目的:评价柑橘皮发酵液的抗氧化能力,并通过建立体外肝细胞脂肪堆积模型评价橘皮发酵液清除肝细胞脂肪堆积能力。方法:通过乳酸菌发酵获得柑橘皮发酵液,并测定发酵液对DPPH与羟自由基的清除能力;依次采用70%乙醇、正丁醇、乙酸乙酯对柑橘皮发酵液进行提取获得相应提取物,利用油酸诱导Hep G2细胞并建立细胞脂肪堆积模型,从噻唑蓝染色吸光度(MTT值)、甘油三酯(TG值)、细胞内脂滴形态3方面评价柑橘皮发酵液提取物的作用。结果:发酵后的柑橘皮对DPPH及羟自由基具有一定的清除能力,发酵液提取物可减轻细胞内脂质堆积现象,显著降低细胞内TG的积累量,其中200μg/mL正丁醇与乙酸乙酯提取物对细胞内TG清除率分别达40.35%和41.64%。结论:柑橘皮发酵液具有良好的体外抗氧化与降脂活性,对非酒精性脂肪肝具有良好的预防效果。     

牡蛎肽和紫苏籽肽及其复配物对环磷酰胺致雄性大鼠性功能损伤的改善作用

目的：通过血清激素水平、肾脏和睾丸脏器指数、肾脏和睾丸氧化应激状态以及组织结构变化评价牡蛎肽和紫苏籽肽以及二者复配对大鼠性功能损伤的改善作用。方法：制备牡蛎肽和紫苏籽肽,检测二者的氨基酸组成及相对分子质量;大鼠腹腔注射环磷酰胺建立性功能损伤模型,通过灌胃不同剂量的肽及复配组评价大鼠肾脏和睾丸指数,检测大鼠血清相关指标,肾脏和睾丸氧化应激状态和组织结构变化,分析肽对模型大鼠上述指标的影响。结果：牡蛎肽和紫苏籽肽及复配组都可不同程度地提高大鼠血清相关指标和脏器指数,改善肾脏和睾丸氧化应激状态,调节病理形态。结论：牡蛎肽和紫苏籽肽以及复配组都对大鼠性功能有一定的改善和调节作用,复配组的综合作用效果优于单一肽干预组。     

大豆低聚肽分子质量分布的测定及体外消化实验

为验证国产化大豆低聚肽产品分子质量分布和产品在体内经消化道后的稳定性,对该产品进行了分子质量分布测定及体外消化实验,目的是为以大豆低聚肽为原料开发功能性保健系列产品提供产品稳定性的理论依据。研究结果显示,国产大豆低聚肽分子质量均低于1 000 Da;经胃蛋白酶处理后,该大豆低聚肽95%以上未被消化,经胰蛋白酶处理后,约90%未被消化,说明该产品具有良好的稳定性,在体内大部分将以多肽的形式被直接吸收。同时应用该大豆低聚肽产品开发功能性食品时,其本身所具有的各项生理功能将不会发生改变。