鲤鱼小清蛋白多克隆抗体的制备及免疫交叉反应的研究

小清蛋白是鱼类的主要过敏原,对小清蛋白的抗原性研究将有助于进一步深入理解淡水鱼过敏原在致敏过程中的免疫学意义。以鲤鱼为原材料,首先纯化出鲤鱼小清蛋白,再制备兔抗鲤鱼小清蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA法测定抗体效价和抑制性ELISA法测定其特异性,然后采用免疫印迹法及抑制性ELISA法研究鲤鱼与青鱼、草鱼、鲢鱼之间的免疫交叉反应。结果表明,实验兔对鲤鱼类小清蛋白发生了高强度的免疫应答,应答多克隆抗体效价可高达720000,并且4种鱼类小清蛋白在12 ku处发生了强烈的免疫交叉反应。     

日本沼虾原肌球蛋白线性表位预测研究

本文旨在预测日本沼虾原肌球蛋白的线性表位,为相关食物过敏的识别与检测提供依据,同时为基于抗原表位的致敏性消减提供靶标。采用DNAStar软件、SOPMA、BepiPred 1.0 Server及ABCpred在线网站预测日本沼虾原肌球蛋白的B细胞线性表位,应用SYFPEITHI、NetMHCII 2.3 Server与NetMHCIIpan 3.2 Server预测T细胞表位。综合分析以上预测结果,表明日本沼虾原肌球蛋白可能的B细胞线性表位有21RADTLEQQNKEANN34、37EKTEEEIRTTQKKMQQ52、71LEEKEKA77、99LERSEERLN107、119AADESER125、134SLSDEER140、158ADRKYDE164、177ERAEERAETG186、210SEEKANQREEAYKE223、262NEKEKYK268,可能的T细胞表位有82EGEVAALNRRIQLL95、105RLNTATTKLAEAS117、165VARKLAMVEADLE177、195EELRVVGNNLKSLE208、222KEQIKTLTNKLKAA235。该结果可为继续深入开展日本沼虾过敏原基础性研究提供更精准的靶标。     

水生动物原肌球蛋白致敏原研究进展

原肌球蛋白(tropomyosin,TM)是甲壳类动物中的一种常见的泛致敏原,同时部分鱼中TM致敏性已得到证实。其蛋白质结构保守、同源性高、致敏性强,且具有广泛的免疫交叉反应。原肌球蛋白致敏性及其消减方法、免疫交叉反应都与抗原表位有关。因此,表位研究是原肌球蛋白研究中的重点。本文中介绍了国内外水生动物原肌球蛋白的性质、表位、免疫交叉反应、致敏性及其消减的研究进展。