小黑药亲电成分干预混合游离脂肪酸诱导的人肝癌细胞株HepG2脂肪变性研究

采用GSH功能化磁珠靶向敲出小黑药亲电成分并用LC-MS表征,基于游离脂肪酸(FFA)诱导的HepG2细胞脂肪变性模型,评价小黑药亲电成分降低肝细胞脂质累积和氧化应激的作用和机制。结果表明:小黑药亲电成分主要集中在乙酸乙酯部位;在0.5~2.0mg/mL浓度下,小黑药石油醚部位、乙酸乙酯部位、水部位均具有降低脂肪变性细胞脂质累积和ROS生成的活性,其中乙酸乙酯部位在各浓度下效果最好;乙酸乙酯部位在各浓度下具有降低细胞内TG、TC水平和提高细胞内抗氧化酶活性的作用;经过GSH功能化磁珠靶向敲出亲电化合物后,乙酸乙酯部位在2.0μg/mL浓度下对细胞内TG水平的降低和细胞内抗氧化酶水平的提高效果显著减弱。乙酸乙酯部位萃取物上调Nrf2及下游NQO1、HO-1、GCLC基因,下调脂质合成基因SREBP1c、ACC1、FAS的表达,促进脂质分解基因PPARα、CPT1A的表达;而靶向敲出亲电成分后,乙酸乙酯部位萃取物调控脂代谢和抗氧化相关基因的作用明显下降。LC-MS表征亲电成分敲出前后乙酸乙酯部位样品,发现了7个变化的主要质谱峰,推测其为主要的亲电化合物。小黑药中亲电化合物可以改善脂肪酸诱导的脂肪变性,其机制主要与抗氧化和脂代谢相关基因的调节有关。     

微波辅助合成甘露糖基三氯乙酰亚胺酯及其传统方法优化

甘露聚糖及甘露糖蛋白在很多生理过程中扮演重要的角色,它们的合成研究也是目前糖化学热点之一,甘露糖基三氯乙酰亚胺酯是它们合成中十分有效的糖给体。研究了甘露糖基三氯乙酰亚胺酯新型微波辅助合成方法,并对传统合成方法进行优化改进。以D-甘露糖为原料,通过全苯甲酰基化、端位选择性水解,再与三氯乙腈反应合成了2,3,4,6-四-O-苯甲酰基-β-D-甘露糖三氯乙酰亚胺酯,对传统合成方法进行了优化,使得总产率达到85%以上。同时首次通过微波辅助的方法合成了该种产物,结果表明,微波辅助合成方法产物产率是传统方法的1.12倍,合成时间缩短了15倍。     

A Study of the Specific Heats of the Compounds in the Sm_2O_3-BaO-CuO System

By means of X-ray diffraction and adiabatic scanning calorimeter,the specific heatsof five compounds in the Sm_2O_3-BaO--CuO system,such as Sm_2BaO_4,Sm_2CuO_4,BaCuO_4,Sm_2BaCuO_5,SmBa_2Cu_3O_(7-x),from -150℃ to 800℃ have been measured.It is found that the specific heats ofthese compounds increase smoothly with the increase of temperature.     

微波辅助、磷酸催化合成半乳聚糖的结构分析

以磷酸催化、微波辅助合成半乳聚糖为研究对象,探讨半乳聚糖的化学结构及聚合反应的区域选择性和立体选择性。综合采用高效凝胶渗透色谱、红外光谱、甲基化分析及一维、二维核磁共振波谱(1H NMR,13C NMR,1H-1H COSY,TOCSY,HSQC,HMBC),对半乳聚糖的相对分子质量、糖苷键的立体构型和连接位点进行表征。结果表明,反应合成的半乳聚糖为多分支结构,重均相对分子质量为2 657,重均聚合度为16,糖残基以α-型半乳吡喃糖为主,主要为→4)-α-D-Galp(1→和→2,4)-α-D-Galp(1→片段。结构分析结果进一步表明,微波辅助、磷酸催化半乳糖缩合过程中,不同位点的羟基具有不同的反应活性,4位羟基的反应活性最强。     

具有铁螯合能力的驴骨胶原肽酶解条件优化及微观形态

为充分开发利用驴骨资源,开发一种酶解驴骨蛋白从而得到驴骨胶原蛋白肽的方法,考察该酶解肽与亚铁离子的螯合能力,并将其产物进行表征。以亚铁离子螯合率为考察指标,筛选最优酶种类,通过单因素实验和考虑交互作用的正交实验优化确定驴骨的最佳酶解条件。结果表明,驴骨的最佳预处理条件为121 ℃蒸煮30 min,木瓜蛋白酶为最佳酶,优化过后的酶水解工艺参数为温度50 ℃、pH 7.0、酶底比1 000 U/mL、时间3 h,此时驴骨胶原肽和亚铁离子的螯合率为38.40%,可得到微观结构为片状的螯合产物。木瓜蛋白酶酶解驴骨蛋白可以制备有螯合亚铁离子能力的驴骨胶原肽,具有促铁吸收的潜力,对开发驴骨胶原肽相关产品具有科学参考作用。     

甘露寡糖中间体的微波辅助合成

对3,4,6-三-O-乙酰基-1,2-O-亚乙基-β-D-甘露糖、1,2-O-亚乙基-β-D-甘露糖、4,6-O-苯亚甲基-1,2-O-亚乙基-β-D-甘露糖这3种重要的甘露寡糖中间体合成方法进行改进。同时首次通过微波辅助的方法合成了这3种产物,并在单因素实验的基础上,采用正交实验优化最佳合成工艺。结果表明微波辅助条件下,这3种物质的最佳合成工艺分别为:微波功率600W、反应时间3.5h、反应温度35℃、硼氢化钠质量2.5g;微波功率600W、反应时间30min、反应温度30℃、甲醇钠质量0.4g;微波功率800W、反应时间1.5h、反应温度35℃、对甲基苯磺酸质量0.2g。优化后的产率分别为80.3%、98.3%、91.9%。     

一测多评法测定6种大豆异黄酮的质量分数

基于高效液相色谱紫外双波长检测方法,建立只用一个对照品同时测定6种大豆异黄酮含量的一测多评方法,以降低食品中大豆异黄酮含量测定的分析成本并提高分析效率。样品经甲醇超声波辅助提取后,采用C_(18)反相色谱柱;柱温25℃;进样量10μL;检测波长262 nm和248 nm;流量1.0 mL/min;以体积分数0.2%甲酸水溶液和甲醇运行洗脱。通过一测多评分析确定6种大豆异黄酮的定量标准曲线、线性范围、相对校正因子、相对保留时间及相对峰面积,并对检测结果的精密度、稳定性、重复性、加样回收率以及系统的耐用性和适应性进行验证,且与外标法实验结果相比对,6种大豆异黄酮在检测范围内均呈现出良好的线性关系(R~2 0.999 9)。     

驴腿肉与其他畜腿肉挥发性风味物质差异研究

利用气相电子鼻和气相色谱—质谱联用分析仪等对4种畜腿肉挥发性风味物质进行定性和定量检测,并通过气相色谱分析仪进行脂肪酸组成测定。气相电子鼻结果表明驴腿肉与猪腿肉风味差异最小,与牛腿肉差异最大。GC-MS共检出76种挥发性物质,以醛类为主,驴、猪、牛、羊腿肉中醛类占比分别为70.71%,75.36%,48.76%,55.94%,其中具有清香和青草气味的正己醛含量最高,贡献风味比例依次为29.89%,20.46%,12.74%,10.78%。驴、猪、牛、羊腿肉中的主要饱和脂肪酸总含量依次为30.01%,39.05%,36.34%,48.42%;不饱和脂肪酸总量依次为63.19%,57.10%,49.03%,43.71%。综上,影响驴腿肉风味特征的主要化合物为正己醛,其来源于亚油酸的氧化分解。     

甲状腺素T3对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠胰腺的保护作用

目的:研究甲状腺素T3对四氧嘧啶(alloxan,ALX)诱导糖尿病小鼠胰腺损伤的预防和保护作用。方法:24只雄性昆明小鼠随机分成4组,分别给予一次性腹腔注射生理盐水、ALX、ALX和甲状腺素T3、甲状腺素T3,在注射后1、4、6、12、24 h各时间点测定小鼠血液活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,并在注射后28 d内定期测定小鼠血糖水平变化。28 d后,处死小鼠,取出胰腺进行形态学和生物化学指标分析:检测甲状腺素T3对小鼠胰腺超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力以及还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)含量的影响,分析甲状腺素T3对胰腺细胞抗氧化酶相关基因Nrf2、SOD、GSH-Px、CAT,细胞凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2表达的影响。结果:经ALX诱导的小鼠血糖和血液ROS水平极显著升高(P0.01),血液胰岛素水平极显著下降(P0.01),血液和胰腺抗氧化酶的活力均极显著下降(P0.01)。此外,抗氧化酶相关基因以及细胞凋亡相关基因表达水平均出现了极显著变化(P0.01)。注射甲状腺素T3能够改善由ALX引起的小鼠血糖水平上升和胰岛素分泌不足,显著或极显著地缓解抗氧化酶活力下降及抗氧化相关基因表达下调(P0.05或P0.01),极显著抑制Caspase-3、Caspase-9、Bax等促凋亡基因表达的升高(P0.01),促进抗凋亡基因Bcl-2的表达。结论:甲状腺素T3能够改善ALX诱导的糖尿病小鼠机体氧化还原状态,调节胰腺细胞凋亡相关基因的表达水平,保护胰腺组织,避免胰腺出现β细胞凋亡的情况,从而维持和保护胰腺调节血糖水平的功能。     

白藜芦醇对不同时间高糖诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用

研究白藜芦醇对不同时间高糖诱导HepG2氧化损伤的保护作用。33 mmol/L高糖作为诱导剂,与不同浓度白藜芦醇(0.1、1、10μmol/L)共同孵育24、48、72 h,采用MTT法检测其对损伤细胞存活率的影响,DCFH-DA荧光探针法检测细胞自由基水平,测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)水平,Real-time PCR测定Nrf2、HO-1 mRNA表达水平,探讨白藜芦醇对高糖损伤细胞的保护作用及可能机制。结果表明,白藜芦醇与高糖共同作用48 h以上时,各浓度组均能显著提高损伤细胞存活率,显著降低细胞自由基水平(p0.05);各浓度组均能改善模型氧化还原状态,其中10μmol/L白藜芦醇作用48 h时效果极显著(p0.01);10μmol/L白藜芦醇作用48 h时,极显著上调Nrf2、HO-1mRNA表达水平(p0.01)。因此,白藜芦醇能通过清除细胞自由基、改善细胞氧化还原状态、上调抗氧化通路相关基因表达,抑制高糖诱导HepG2细胞的损伤。