白藜芦醇对玉米赤霉烯酮毒素致人胚肾HEK293细胞毒性的干扰作用

玉米赤霉烯酮毒素(ZEA)是一种非甾体霉菌毒素,存在于霉变的谷物中,具有类其雌激素样作用,能引起生殖机能异常。但是关于ZEA的肾脏毒性研究的比较少。白藜芦醇(RSV)是在红酒、葡萄中存在的一种多酚化合物,具有抗氧化作用。通过不同浓度梯度的ZEA(3、15、75、150、300μM)、RSV(0、0.01、0.1、1、10、100μM)和DL-α-lipoic acid(LA)(0、1、10、100、1000μM)作用于人胚肾HEK293细胞24 h,细胞活性的测定显示ZEA对HEK293细胞的IC50为80μM,而RSV(10μM)和LA对细胞无明显损伤。利用RSV和LA对细胞进行预处理24 h之后,再将ZEA作用于细胞24 h,通过细胞增殖力、ROS、MDA、SOD、Mn SOD指标的检测,表明RSV/LA能提高细胞的抗氧化性,减轻ZEA产生的细胞毒性和氧化损伤。同时,ZEA可引起促凋亡基因Bax的显著表达,但对于SIRT1和抗凋亡基因Bcl-2的表达没有影响,而RSV预处理能显著提升SIRT1和Bcl-2的表达,降低Bax的表达,发挥抗凋亡作用。     

真菌毒素（DON、AFB1）对HepG2/C3A细胞联合毒性及机理研究

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和黄曲霉毒素B_1(AFB_1)是一类常见的毒素类污染物,常共存于小麦、玉米等食品及制品中。实验采用不同浓度的DON(0.56、1.125、2.25、4.5、6.75μmol/L)和AFB_1(2.5、5、10、20、30μmol/L)单独及联合作用于HepG2/C3A细胞24 h后,分别测定细胞增殖抑制率(SRB)、双链DNA含量变化以及低浓度条件下细胞凋亡率和细胞周期分布,采用RTqPCR测定凋亡相关基因caspase-3、Bax以及Bcl-2 mRNA的相对含量。最后通过RNA-Seq测序分析2种毒素作用的毒性机理。结果显示,2种毒素单独及混合作用于HepG2/C3A细胞后使得细胞增殖抑制率增加,双链DNA含量下降,经分析后发现两者联合作用类型为加和作用。低浓度作用下均能引起细胞发生凋亡,使得细胞阻滞在S期或者S期和G2/M期,并且引起caspase-3和Bax表达量增加,Bcl-2则下降,从而引发细胞凋亡。RNA-Seq测序结果显示,经过差异基因的富集分析,AFB_1与DON的毒性作用机理并不相同,其中AFB_1以及两者的混合作用主要是通过P53信号通路影响细胞凋亡,而DON并不是。AFB_1与DON可能是通过2种不同的途径一起共同导致细胞凋亡的发生。