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1.
2.
热带假丝酵母是重要的工业生产菌株,但表达系统还不完善导致代谢工程育种手段受到限制。探索新的表达元件对热带假丝酵母的基因工程育种十分重要。本文通过多重序列比对从热带假丝酵母ATCC 20336基因组中扩增得到一个具有较高活性的磷酸甘油酸激酶基因(PGK1)启动子,以酵母增强型绿色荧光蛋白(yeGFP3)作为报告基因,整合到热带假丝酵母基因组上并对其表达活性进行研究。通过分离300、550、750 bp和846 bp4个长度的启动子片段分别表达yeGFP3,转化XZX宿主菌获得P-1、P-2、P-3和P-4共4个转化子。荧光显微镜结果表明,随着启动子长度的截短,荧光逐渐减弱,前3个转化子的相对荧光强度分别为P-4的4.98%、9.84%和48.4%。同时分析了4个转化子的yeGFP3转录水平,转录水平分别为P-4的5.6%、13.8%和60%。初步判断PGK1启动子至少存在2个上游激活序列(UAS)。  相似文献   
3.
针对局部特征描述子的高维特性以及视频中的复杂场景,提出一种利用频繁出现的特定局部特征空间布局对视频中运动目标进行挖掘的方法.在运动分割辅助下实现局部特征筛选,仅保留特定的运动相关特征,采用一种非参数维度约减方法建立精简描述子,并通过新的事务构建方式完成挖掘过程.标准数据集上的对比实验结果表明,该精简描述子在95%灵敏度情况下只有不到7%的假阳性率,整个挖掘方法相比同类方法具有更好的挖掘性能和可扩展性.  相似文献   
4.
用PCR方法扩增扣囊复膜孢酵母CICIM Y1037菌株真菌α-淀粉酶基因成熟肽编码区(SfA),插入表达载体pPIC9K。重组质粒pPIC9K-SfA转化巴斯德毕赤酵母GS115,筛选获得淀粉酶活力相对最高的重组菌Pichia pastoris GS115/pPIC9K-SfAmy LZ08。SDS-PAGE电泳分析纯化获得的重组酶SfA,结果显示重组酶分子质量为61 kDa左右。SfA最适反应温度为45℃、最适pH为4.5,是一种酸性α-淀粉酶。Ca2+对SfA的热稳定性有促进作用,重组酶在含5 mmol/L Ca2+,pH 4.5的溶液中,55℃保温4 h酶活仍保留80%以上。SfA水解玉米淀粉获得麦芽寡糖和少量葡萄糖,其中麦芽糖和麦芽三糖为主要产物,分别占水解物的37%和39%。重组酶SfA在麦芽三糖和麦芽寡糖糖浆生产中有一定的应用潜力。  相似文献   
5.
根据Genbank公布的来源于Bacillus deramificans的普鲁兰酶基因突变体序列(AX203843)合成普鲁兰酶成熟肽基因。将该基因插入芽孢杆菌分泌型表达载体pHY-WZX,重组质粒转化地衣芽孢杆菌B60608,重组地衣芽孢杆菌实现普鲁兰酶分泌表达。对重组菌产普鲁兰酶的条件进行优化,以含2%药媒和8%甘油的培养基最适合普鲁兰酶表达。  相似文献   
6.
<正> 近年来,世界各国对乳酸菌和益生菌的研究越来越普遍和深入,这些有益菌对人体胃肠道的各种功效也已被科学界证实和认可。冰激淋作为一种深受人们喜爱的传统食品,添加益生菌既给冰激淋产品带来新的健康概念,又为新品研发拓展广阔空间。  相似文献   
7.
普鲁兰酶产生菌的分离与鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
以淀粉工业用普鲁兰酶的开发为目的,采集全国不同地区的土壤样本,分离其中的嗜中温细菌,经过形态学鉴定后,通过16SrDNA最终确定其属种并建立细菌库。对该细菌库中短短芽胞杆菌所产普鲁兰酶进行了初步的酶学研究,研究表明野生短短芽胞杆菌的初始酶活都很低,有几株其初始产酶水平大于1U/mL。酶学性质研究表明,短短芽胞杆菌普鲁兰酶有较好的应用价值,其最适作用pH在4~6之间,最适作用温度在50℃~60℃之间,其中来源于CICIM B1490的普鲁兰酶,其酶学性质与目前使用黑曲霉糖化酶的酶学性质相似,能够作为以后研究的初发菌株。  相似文献   
8.
中温α-淀粉酶的酶学性质研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
通过盐析、DEAE.FF和Superdex.75,对BacillusamyloliquefaciensM23产生的α-淀粉酶进行了纯化,得到电泳纯的α-淀粉酶,纯化倍数为29.61,活力回收率为20.06%。用SDS.PAGE测得该酶的分子量为58kD。该酶的最适反应温度为55℃,最适反应pH值为6.0。纯酶液在pH7.O~10.0缓冲液中室温放置24h,可保持80%以上活力。55℃保温15rain,基本丧失活力,添加10mmol/L的Ca2+能显著提高酶的热稳定性。Ca2+、Mg2+和CO2+具有激活该酶活性的作用,EDTA抑制酶的活性。60℃,以可溶性淀粉为底物的Km,Vmax,分别为4.33g/L、1.19g/L&#183;min。薄层层析结果表明该酶水解淀粉生成糊精和寡聚糖。  相似文献   
9.
果胶裂解酶(E.C.4.2.2.2)可水解聚半乳糖醛酸α-1,4糖苷键释放出可溶性的不饱和寡聚乳糖醛酸,用于水果加工、棉纺织预处理、饲料工业、咖啡和茶发酵、油提取等方面.本研究从地衣芽孢杆菌CICIM B1699染色体DNA中扩增出一种新的果胶裂解酶编码基因pelB,再将其克隆入启动子PQ下游,分别获得重组质粒pla-PQ-pelB和pHY-PQ-pelB.在重组质粒pLa-PQ-pelB的介导下,基因pelB在大肠杆菌JM109中得到表达,所表达的重组果胶裂解酶的酶学性质显示其最适反应温度为45℃,最适pH为10.5.在重组质粒pHY-PQ-pelB的介导下,基因pelB在地衣芽孢杆菌CICIM B1699中表达4.2U/mL的重组果胶裂解酶酶活,较对照菌株高出60%.  相似文献   
10.
研究了粗糙脉孢菌合成漆酶的一些重要影响因素,包括诱导剂种类、碳源、氮源。获得了粗糙脉孢菌合成漆酶的较适宜每件:以20g/L葡萄糖为碳源,2g/L硝酸铵为氮源,粗糙脉孢菌静止培养2-3d后,再加入放线菌酮(终浓度2.8μmol/L)诱导培养6—7d后产生的漆酶的最高酶活可达4-5u/mL。  相似文献   
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