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脂多糖(LPS)是革兰氏阴性细菌外膜的主要组成部分,由疏水的Kdo2-lipid A和亲水的多糖长链组成,能激活先天性免疫系统。Kdo2-lipid A是LPS的生物活性中心,能被开发为新型疫苗佐剂。本研究在前期菌株基础上敲除与LPS庚糖合成相关waaC-waaF基因,构建了直接合成特殊结构Kdo2-lipid A、不含多糖长链的突变株BW003。通过薄层层析和电喷雾电离质谱技术鉴定了BW003合成的Kdo2-lipid A结构;HEK-Blue h TLR4细胞和THP-1细胞刺激实验证实突变株及其合成的Kdo2-lipid A的细胞毒性均明显减弱;生化表型分析结果表明BW003较野生型呈现出更高的外膜渗透性、抗生素敏感性、疏水性及自凝集能力。本研究为后续新型疫苗佐剂开发和产业化利用奠定了理论基础。 相似文献
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