植物乳杆菌乳酸脱氢酶的抽提与初步纯化

研究了从植物乳杆菌RS2 2中提取胞内乳酸脱氢酶的工艺过程,探讨了超声破碎时菌体质量浓度、处理量及处理时间对破碎效果的影响;对酶的提取工艺研究表明,0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)添加0.10～0.30mol/LNaCl可达到较好的抽提效果;对硫酸铵盐析去杂蛋白质及DEAE离子交换层析工艺进行了初步优化.在优化的工艺条件下,酶的总回收率为40.2%,比酶活提高到原来的18.9倍.     

植物乳杆菌乳酸脱氢酶的抽提与初步纯化

研究了从植物乳杆菌RS2—2中提取胞内乳酸脱氢酶的工艺过程，探讨了超声破碎时茵体质量浓度、处理量及处理时间对破碎效果的影响；对酶的提取工艺研究表明，0．05mol／L磷酸缓冲液(pH7．0)添加0．10～0．30mol／L NaCl可达到较好的抽提效果；对硫酸铵盐析去杂蛋白质及DEAE离子交换层析工艺进行了初步优化．在优化的工艺条件下，酶的总回收率为40．2％，比酶活提高到原来的18．9倍。     

响应面分析应用于短杆菌产酶工艺的优化

本文研究了用响应面分析法(RSM)优化短杆菌产胆固醇氧化酶的工艺，发现胆固醇添加量及超声处理时间是影响短杆菌产酶最重要的因素。在模拟优化的条件下：胆固醇为4．076g／L，吐温-80为0．2932％(v／v)，照射时间为22．361min，COD最大产量1．483U／mL。     

高纯度诊断用乳酸脱氢酶的制备和酶促反应

设计并优化了植物乳杆茵发酵制备高纯度诊断用乳酸脱氢酶的技术路线．从培育的厌氧型植物乳杆茵中粗提乳酸脱氢酶制备液，经过DEAE Sepharose F．F．离子交换层析、Phenyl Sepharose6 F．F．疏水层析及Sephadex G-25 Fine凝胶过滤等方法进行分离纯化，比酶活达1096．8U／mg，纯度达88％，纯化倍数达到21．4倍，酶活力回收率为53．9％；高效液相色谱和SDS-PAGE电泳结果显示制得乳酸脱氢酶相对分子质量约为80000，含有两个亚基，每个亚基分子量约为39000．     

植物乳杆菌乳酸脱氢酶的分离纯化工艺研究

为进一步研究植物乳杆菌乳酸脱氢酶的酶学性质,探讨了乳酸脱氢酶的分离纯化工艺.采用了硫酸铵沉淀、DEAE Sepharose F.F.离子交换层析、Phenyl Sepharose 6 F.F.疏水层析及Sephadex G-25 Fine凝胶过滤等纯化方法,确定了较为合理的纯化工艺.酶蛋白纯化倍数达到21.4倍,酶活回收率为53.9%,为以后乳酸脱氢酶的进一步纯化提供了一定基础.高效液相色谱和SDS-PAGE电泳初步表明:乳酸脱氢酶相对分子质量为80000,含有2个亚基,且每个亚基相对分子质量大致为39000.