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目的利用定量PCR(quantitativePCR,qPCR)技术检测杀菌型产品中乳酸菌,并与标签标示相比较,查探产品中各类菌种的异同性及数量。方法以市售的发酵乳及含乳饮料作为研究对象,设计可区分产品中常见的6种乳酸菌特异性引物及探针,利用qPCR技术对方法的特异性、灵敏度进行验证,并建立标准扩增曲线;利用模拟样品对方法进行检验,最后对市场上购买的实际样品进行检测。结果除去干酪乳杆菌,其他5种引物都能特异性扩增出其目标菌,并且对其他的乳酸菌均无扩增现象;DNA检测的灵敏度可达到2～4pg;单一标准菌种扩增曲线线性较好,相关系数r2值在0.954～0.992之间;对模拟样品的检测,与平板法差异性比较,P值均大于0.05,无显著性差异。对市售样品进行检测,产品中标记的干酪乳杆菌、双歧杆菌和嗜热链球菌与检测结果存在不匹配现象。结论本研究建立的qPCR方法可快速、准确地对产品中德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜热链球菌、乳酸乳球菌、嗜酸乳杆菌、双歧杆菌的鉴定和定量的分析。 相似文献
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目的建立微生物法测定婴幼儿乳粉中烟酸含量的分析方法。方法通过比较不同浓度标准曲线对同一标准物质样品的测定结果,确定准确最优的线性浓度范围,并在该标准范围内进行重复性及加标回收实验。结果当烟酸标曲线性浓度范围为5.0～50.0ng时,线性关系良好(r~2=0.996)。该方法的相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为1.71%(n=6),平均回收率为94.4%。结论该方法稳定准确,适合用于测定婴幼儿乳粉中烟酸的含量。 相似文献
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目的利用荧光定量PCR方法快速检测杀菌型乳酸菌产品中的耐药基因,并快速筛选此类产品中多种益生菌菌株耐药性。方法以杀菌型乳酸菌产品及9种耐药基因为研究对象,将样品中DNA进行提取及纯化后,利用荧光定量PCR方法,进行耐药基因检测。结果共测试14种样品,其中12种产品检测出6种不同耐药基因,检出率达85.7%,四环素耐药基因tet(K)及万古霉素耐药基因van(X)的检出率较高;有9种产品携带2种或2种以上耐药基因。结论基于荧光定量PCR方法可以实现快速的对杀菌型乳酸菌产品中多种菌株耐药性的筛选。 相似文献
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目的利用API-ZYM系统分析动物双歧杆菌胞外酶活性。方法采用培养法分离菌株,经提取DNA后采用16 S rRNA测序,采用高分辨率熔解曲线分析技术(high resolution melting,HRM)方法以及SNP(single nucleotide polymorphism)位点组合鉴定菌株;利用API-ZYM系统分析分离菌株的胞外酶活性共性和差异性,研究产业化前后菌株酶活性的变化。结果分离出动物双歧杆菌Bb-12、乳双歧杆菌Bi-07和HN019。能检测到14种胞外酶,有4种胞外酶未检出。酶谱的分泌共性及稳定性基本保持一致,其中糖苷酶类活性最高;HN019和Bb-12的酶谱具有高相似性,Bi07更显现出胞外酶特异性;工业化前后糖苷酶类仍然保持高活性,而水解酶类失活程度高。结论糖苷酶的高表达量普遍存在于动物双歧杆菌中;酶谱差异性可作为划分菌株特征的重要鉴定技术手段;工业化前后酶谱的变化为商业化益生菌体外预筛选评价提供理论参考。 相似文献
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