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1.
为了研究粪肠球菌Z096对副溶血弧菌生物被膜和群体感应(quorum sensing,QS)系统的抑制作用,采用竞争、清除、排阻三种方式模拟Z096与副溶血弧菌在微菌落环境中的相互作用,并进一步探究了Z096的提取物(Z096-E)对副溶血弧菌生物被膜形成、成熟生物被膜清除、细胞表面疏水性、自聚性、QS信号分子AI-2活性、群集泳动能力以及胞外多糖和蛋白合成的影响。结果表明:Z096可通过竞争、清除、排阻的方式与副溶血弧菌相互作用,降低浮游和生物被膜状态的副溶血弧菌细胞数量,干扰副溶血弧菌在载体表面的粘附,且Z096-E能够显著抑制副溶血弧菌生物被膜形成,有效清除成熟生物被膜,1.6 mg/mL的Z096-E处理12 h,副溶血弧菌生物被膜抑制率为70.43%,代谢活性减少率为84.15%;12.8 mg/mL的Z096-E处理副溶血弧菌成熟生物被膜4 h,生物被膜清除率为58.21%,代谢活性减少率为69.84%。而且1.6 mg/mL的Z096-E对副溶血弧菌群集和泳动能力、细胞表面疏水性和自聚性、胞外多糖和蛋白合成的抑制率分别为47.26%、53.56%、63.37%、89.38%、77.65%和51.91%,抑制效果具有浓度依赖性。此外,Z096-E可使副溶血弧菌QS信号分子AI-2活性减弱,表明Z096-E是一种AI-2类群体感应抑制剂,其可通过干扰QS系统,从而影响副溶血弧菌的生理特性。因此,本研究发现了一株能够抑制副溶血弧菌生物被膜的乳酸菌,其提取物Z096-E能作为一种防控副溶血弧菌生物被膜的新型乳酸菌生物制剂,这对消除致病菌生物被膜污染以及开发新型抗菌剂具有积极的作用。  相似文献   
2.
免疫层析技术(immunochromatography assay, ICA)不仅有效结合了层析法卓越的分离能力以及常规免疫分析方法的高度特异性,而且简单、快速、灵敏,为现场即时筛查提供一种理想的技术手段。近年来,免疫层析技术在食品安全检测中不断更新、完善和发展,包括标记材料、信号增强、高通量和定量分析等的技术革新,显示出巨大的发展潜力和广阔的应用前景。本文总结归纳了ICA在食品安全检测中的最新应用进展,汇总分析了ICA在我国食品安全领域标准化的情况,并讨论了ICA现有的不足以及在未来应用中的发展方向,以期为我国食品安全快速检测的发展提供技术参考。  相似文献   
3.
Spices are a globally traded commodity which has been found to be adulterated with forbidden Sudan dyes. This work proposes a screening method for determining the adulteration of paprika varieties (mild, hot and smoked) with Sudan I dye, based on constant-wavelength synchronous fluorescence spectroscopy with multivariate classification. Different wavelength-intervals (Δλ) were evaluated. Classification models were built with Partial Least Squares-Discriminant Analysis (PLS-DA) at two Sudan I dye concentration levels (1 and 5 mg L−1) and they were tested with samples at a lower level (0.5 mg L−1). Classification results were quite satisfactory when a strategy based on first-derivative spectra was used for improving classification results. Δλ = 60 nm was chosen as the optimum wavelength interval giving a 100% of sensitivity and specificity. These results are promising because the risk of assigning adulterated samples as safe to be consumed is highly minimized. The proposed method is feasible, rapid and simple taking advantage of Sudan I fluorescence phenomena in a direct way.  相似文献   
4.
玉米赤霉烯酮是一种毒性极强的小分子,具有弱雌激素活性,其性质相对稳定,缺乏特效解毒剂。其检测方法主要有生物检测法、理化检测法和免疫学检测法,其中免疫检测法因快速、简便、灵敏而得到较为广泛的应用。本文综述了玉米赤霉烯酮的样品前处理技术、免疫学快速检测技术及相关专利的研究进展情况,并对玉米赤霉烯酮的样品前处理技术及其检测产品的开发进行了展望。  相似文献   
5.
Immunochromatographic assays (ICAs) are considered as a suitable diagnostic tool for the detection of mycotoxins. Mycotoxins and especially, ochratoxin A are analytes with more demanding sensitivity requirements. To enhance the sensitivity of current immunochromatographic assays for ochratoxin A (OTA), a novel sensitive ICA was developed in this study. In the assay, microspheres enclosing fluorescent europium (III) [Eu(III)] nanoparticles (EuNPs) were used as a label for OTA monoclonal antibody (OTA-mAb) conjugation. Accordingly, assay was called time-resolved fluorescent immunochromatographic assay (TRFICA). The test strip was composed of three parts: a sample pad, nitrocellulose membrane and an absorbent pad. As for detection, a proper concentration of conjugated microspheres was pipetted into the microtube and sample extract was added to it. Then the strip was inserted into the tube and the fluid flow along the strip. The TRFICA results were obtained in 8 min and read by a portable TRFICA strip reader. The established method allows quantitative determination of OTA with limit of detection as low as 1.0 μg kg−1 in the samples. For validation, spiked samples including wheat, maize, soybean and rice were respectively assayed by TRFICA and a standard high performance liquid chromatography equipped with a fluorescence detector (HPLC-FLD), and good agreement of results was obtained between two methods.  相似文献   
6.
为了初步了解市售的食用油中黄曲霉毒素B1的污染状况,为食品安全监管提供科学依据。采用统计学方法随机抽取市场上食用油1103份,采用高效液相色谱法进行测定。检出不合格样品24份,不合格率为2.2%,含量范围为17.5~282.7μg/kg;其中花生油共248份,不合格数21份;玉米油共170份,不合格数为2份;调和油共123份,不合格数为1份;其余的样品均为合格样品,所有检出不合格样品中黄曲霉毒素B1的含量均≥10μg/kg。其中散装油不合格率(5.2%)是定型包装油不合格率(1.2%)的4.3倍。调查结果显示,市售的食用油存在一定程度的黄曲霉毒素B1污染,应做好一定的防范工作,有利于国家的监管。  相似文献   
7.
研究建立一种基于羟基氧化钴纳米片(CoOOH)类氧化酶活性的比率荧光传感器,可快速、灵敏、准确地测定抗坏血酸(Ascorbic acid,AA)。在氢氧化钠溶液中,以氯化钴为原料、次氯酸钠为氧化剂,在超声条件下制备具有类氧化酶活性的CoOOH纳米片,并采用透射电子显微镜(TEM)、紫外可见吸收光谱(UV-vis)、X射线衍射(XRD)和傅里叶红外光谱(FT-IR),对所合成的材料表面形貌、光吸收特性、结晶度以及表面基团进行表征,并通过对照试验对所合成的CoOOH纳米片构建比率荧光传感器的可行性进行验证。以检测体系中CoOOH纳米片浓度及孵育时间为单因素,优化检测AA的最佳条件,并建立相应的标准曲线。结果表明,CoOOH纳米片呈典型的纳米级六边形片状,其他表征结果也与以往报道的相符。CoOOH纳米片最佳工作浓度为39.1 μmol/L,最佳孵育时间为25 min。在最优条件下,428 nm处的荧光强度(F428)与568 nm处荧光强度(F568)比值F428/F568与AA浓度在0.5~10.0 μmol/L范围内呈现良好的线性关系,线性方程为y=0.79416x+0.37917(R2=0.9965),检测限303 nmol/L(RSN=3)。将其应用于果汁饮料样品检测,回收率在88.0%~115.9%之间,且检测结果与国家标准方法的检测结果相符。以上结果表明该传感器对检测AA有较好的选择性和准确度,为AA的快速检测提供一种新思路。  相似文献   
8.
研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB1和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标记的抗体浓度、荧光探针使用量、检测线包被原浓度、质控线羊抗鼠IgG浓度、样品前处理条件等因素。结果表明:检测AFB1和OTA的IC50分别为1.58、3.91 μg/kg,线性范围分别为0.26~9.73、1.14~13.29 μg/kg,肉眼检测限分别为3.70、5.55 μg/kg;与黄曲霉毒素类似物交叉率为12%~62%,与赭曲霉毒素B交叉率为58%,与其他真菌毒素无明显交叉反应;选择玉米样品进行添加回收实验,2 种毒素回收率在92%~103%之间,变异系数小于15%;对实际样品的检测与高效液相色谱法和市售胶体金试纸检测结果一致;且该试纸条可在4 ℃稳定保存5 个月以上,稳定性较好。本研究所制备的时间分辨荧光免疫层析试纸条具有灵敏、准确、快速和简便等特点,非常适用于玉米等食品和农产品中AFB1和OTA的现场快速筛查。  相似文献   
9.
针对编码副溶血弧菌的特异性基因和主要毒力基因tlh、tdh、ureR进行引物及探针设计,通过优化反应条件,建立基于Taqman探针快速检测副溶血弧菌毒力基因的三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。利用10 株副溶血弧菌和22 株非副溶血弧菌对设计的引物及探针进行特异性验证,结果表明设计的引物及探针具有很高的特异性;优化后的引物浓度分别为tdh 0.15 μmol/L、tlh 0.15 μmol/L、ureR 0.80 μmol/L,探针浓度分别为HEX 0.50 μmol/L、FAM 0.50 μmol/L;该方法即使在高浓度的背景细菌存在下,DNA浓度与Ct值均呈良好的线性关系,检出限为1.8×102 拷贝/mL;以完整菌细胞的悬液为模板时,预变性时间为30 min,扩增检测效果与以基因组DNA(gDNA)为模板相当(ΔCt<1)。本研究建立的三重real-time PCR方法能实现快速定量检测副溶血弧菌,并能有效区分致病性及非致病性副溶血弧菌,为副溶血弧菌的快速定量检测和风险评估提供快速、灵敏、准确的方法。  相似文献   
10.
A multi-analytes method for monitoring of organophosphorus pesticides (OPs) using a combination of broad-specificity direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay (dcELISA) and high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) was developed. The reaction formats of dcELISA as well as the matrix effects of vegetable samples by different treatments were studied. The dcELSIA based on horseradish peroxidase-labelled monoclonal antibody and solid-phase extraction can analyse 42 samples in duplicate simultaneously for 12 OPs with a limit of detection at 20 μg L−1 within 40 min, with good accuracy and reproducibility. For screening purpose, the dcELISA can distinguish positive samples from hundreds of negative samples at a rapid, high-throughput and low cost manner. The positive samples can be following confirmed by HPLC-MS/MS for the kinds and the relative amounts of OPs. The method is suitable for monitoring of OP contamination in vegetables samples with high-efficiency and low cost.  相似文献   
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