固态枯草芽孢杆菌菌剂的制备工艺研究

本研究利用实验室筛选的高活性益生菌株Bacillus subtilis OKF-004进行液态发酵培养,通过单因素实验和正交试验探究了最适形成芽孢的液态发酵培养基组分与培养条件,并将所得菌液通过鼓风干燥制备成菌剂,优化确定了制备菌剂的工艺。以包含2.5%玉米淀粉、3%豆粕、2%葡萄糖的培养基在初始pH为6.5、装液量30 mL(250 mL锥形瓶中)、温度32℃、接种量7%的条件下培养时,枯草芽孢杆菌最适合形成芽孢,芽孢数最高可达到1.1×1010 CFU/mL;离心后将菌泥与浓度5%的保护剂甘油以1:7 g/mL的比例复溶制成菌悬液,以虾头粉末作为烘干载体,将载体与菌悬液以2:3 g/mL的比例混合后,于50℃鼓风烘干6 h,所得菌剂存活率最高,可达140.91%。本文研究的液态发酵培养、鼓风干燥的固态微生物菌剂制备方法具有过程简便、成本低廉、节省能源的特点,适合工业化生产。     

加工食品中虾蟹类过敏原ELISA检测前处理方法的研究

目的建立了一种可应用于加工食品中虾蟹类过敏原检测的前处理方法。方法针对提取液和提取步骤2个部分选取条件先后进行优化,通过对相应样品提取后的蛋白溶出量等进行评估,选取最适合本ELISA检测的条件。结果采用含有0.5%SDS和0.5%DTT的磷酸盐缓冲液(pH 8.5),按照食物样品与提取液的1:9 (m/V)进行混合,在室温下均质30 min,3020×g离心15 min,取上清液进行检测效果最佳,此方法与PBS(pH7.4)溶液提取方法相比,蛋白质溶出量增加了约5倍。结论在已建立的检测虾蟹类过敏原夹心ELISA的基础上,建立优化前处理方法进一步提高了加工食品中过敏原的提取率。     

固相萃取-气相色谱-串联质谱法测定紫菜中扑草净的残留量

目的建立固相萃取-气相色谱-串联质谱法测定紫菜中扑草净的残留量。方法样品用乙腈提取,经活性炭/氨基复合柱(Envi-Carb/NH_2)净化,经Rxi-5MS石英毛细管色谱柱分离,采用电子轰击源质谱检测,选择离子监测(selective ion monitoring,SIM)模式检测,外标法定量。结果扑草净在2~1000μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数r~2=0.9998。扑草净在5、10、20、50μg/kg 4种条件下,样品加标回收率在95.1%~107.9%,RSD在5.36%~7.77%(n=6),方法检出限为1μg/kg,定量限为4μg/kg。结论该方法操作简单,准确度与精密度较好,能快速简便地检测紫菜中扑草净的残留量。     

冷藏真空包装金鲳鱼片复合生物保鲜剂配方优化

为明确保鲜剂复配对冷藏水产品的保鲜效果,通过L9(33)正交试验研究茶多酚、壳聚糖、ε-聚赖氨酸盐酸盐复配对真空包装4℃冷藏金鲳鱼片的感官品质、菌落总数、挥发性盐基氮等指标的影响,确定3种保鲜剂复配的最优配方,并将最优配方与空白对照组进行验证比较,以感官评价、菌落总数、挥发性盐基氮、pH值、质构分析及低磁场核磁特性为评价指标,进行14 d的应用试验。结果表明:最佳复合保鲜剂配方为茶多酚用量0.25 g/kg,壳聚糖用量4 g/kg,ε-聚赖氨酸盐酸盐用量0.25 g/kg复配,经最佳复合保鲜剂处理后,能有效地延缓金鲳鱼片的感官劣变,抑制微生物的生长,延缓挥发性盐基氮值(total volatile basic nitrogen,TVB-N)和pH值的增长;TVB-N指标显示复合保鲜剂组将一级鲜度和货架期均延长4 d左右;硬度、弹性、咀嚼力明显优于对照组;低磁场核磁显示复合保鲜剂组T2弛豫时间所表现出的保水性能显著优于对照组。     

明胶-壳聚糖-迷迭香提取物复合膜对南美白对虾品质的影响

以鱼皮明胶、壳聚糖为复合膜基质材料,通过添加迷迭香提取物制备明胶-壳聚糖-迷迭香提取物复合膜(G-C-RE),并研究G-C-RE复合膜对冷藏南美白对虾的保鲜效果。结果表明,经G-C-RE复合膜涂膜处理的南美白对虾菌落总数、挥发性盐基氮(TVB-N)、硫代巴比妥酸值(TBARS)均显著低于对照(P<0.05)。相对于明胶-壳聚糖复合膜(G-C),添加迷迭香提取物能够减缓蛋白氧化,显著降低蛋白质羰基含量(P<0.05)。G-C-RE复合膜可改善南美白对虾的黑变程度,维持较高的感官评分,保持虾的良好品质。明胶-壳聚糖-迷迭香提取物复合膜可作为新型保鲜包装材料用于水产品的品质。     

多糖中金属离子对其抗氧化活性及抗肿瘤活性的影响

采用水提醇沉法制备香菇、海带、枸杞多糖粗品,Sevage法除蛋白制得初级纯化多糖。利用EDTA-2Na去除多糖粗品和纯品中的金属离子,比较去除前、后多糖抗氧化活性及抗肿瘤活性的变化。结果表明:3种多糖均含有Al、Ca、Mn等多种金属元素,只是含量各不相同。去除金属离子后,多糖对ABTS自由基、DPPH自由基的清除能力均下降,对羟自由基的清除能力变化不一。其中枸杞多糖质量浓度为600μg/mL时抗氧化活性变化最为显著,ABTS自由基清除率由26.31%降至17.25%,DPPH自由基清除率由59.80%降至38.40%。枸杞多糖纯品在去除金属后对人乳腺癌细胞MCF-7的体外抑制活性呈下降趋势。结论:多糖中的金属元素是多糖活性中心构成的一部分,对其活性具有重要影响。     

不同培养介质中N-二甲基亚硝胺对干酪乳杆菌生长影响

目前研究已证实乳酸菌可降低食品中N-二甲基亚硝胺（NDMA）的含量，减小其对人体消化道的毒性作用。但乳酸菌抑制NDMA毒性作用的同时，NDMA对其生长影响鲜见相关报道。该研究选用具有潜在益生功能的干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）SB27，分析其胃肠液耐受性及黏附性能，并检测不同培养介质中NDMA对干酪乳杆菌SB27生长的影响。结果表明，干酪乳杆菌SB27可耐受胃肠液的消化，具有良好的黏附性能，且在MRS培养基、低氮源MRS培养基和磷酸盐缓冲液中，NDMA对菌株SB27生长均无显著影响。该研究为进一步研究干酪乳杆菌SB27降解NDMA作用奠定了理论基础。     

白鲢肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶单域抗体文本库构建及淘选

鱼肉中的肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(myofibril-bound serine proteinase,MBSP)在加工过程中可降解肌原纤维,引起鱼糜制品的凝胶劣化。一种新型特异性高的鲨源抗体——单域抗体(single-domain antib odies,sdAbs),能直接与抗原结合并抑制酶的活性。研究主要完成了针对MBSP单域抗体制备的前期工作:文本库建立及淘选过程,以克隆表达的MBSP为抗原免疫铰口鲨鱼(nurse shark,Ginglymostoma cirratum),构建鲨鱼单域抗体文本库,并从中淘选针对MBSP的特异性单域抗体噬菌粒,最终得到31个能与MBSP特异性结合的噬菌粒,为获得抗MBSP单域抗体鉴定了基础,以期抑制或消除MBSP的活性,解决现有鱼糜制品凝胶劣化的问题。     

类蛋白反应修饰的牡蛎肽锌结合物的生物利用性

通过类蛋白反应(Plastein)修饰制备具有较高锌离子结合能力的牡蛎源肽(EVPPEEH),其锌结合能力为161 mg/g。以缺锌型SD大鼠为试验模型,以牡蛎酶解肽-锌结合物OPZ、类蛋白反应修饰的牡蛎酶解肽-锌结合物LPZ和ZnSO4(ZS)为对照,研究牡蛎源肽(EVPPEEH)与锌的结合物(MZ)在体内的生物利用率和生物利用途径。结果表明:MZ组大鼠血清锌水平,股骨锌储备量及肝脏锌含量和肾脏锌含量均显著高于各对照组。脾脏锌含量MZ组和LPZ组恢复程度相似,均显著高于OPZ组和ZS组。MZ组和各对照组大鼠体重和摄食量均显著增加,效果相似。大鼠小肠转锌蛋白(ZnT1)的表达量MZ组与无机锌组差异不是很明显,而小肽转运蛋白(PepT1)的表达量MZ组最高,相对于ZS组上调了20%,显著高于各对照组,说明大鼠小肠对MZ的吸收利用一部分是通过传统锌离子途径,另一部分是通过小肽途径。MZ有望成为一种新型高效的补锌制剂。     

市售咸干鲅鱼的安全性分析

为了初步探究咸干鲅鱼的安全问题,该研究以青岛市售的8种咸干鲅鱼为研究对象,对其理化和安全指标进行检测,包括样品的水分含量、盐含量、亚硝酸盐含量、挥发性盐基氮(TVB-N)、生物胺含量、硫代巴比妥酸值(TBA)以及过氧化值(POV)含量。结果表明,市售的8种不同水分、盐分的咸干鱼安全评价指标各不相同,其中粗盐腌制的咸干鱼亚硝酸盐含量和TBA含量较高;低盐高水分的咸干鱼亚硝酸盐含量和生物胺总量较高,TVB-N含量也相对较高,但是感官评价值最高;高盐咸干鱼亚硝酸盐含量低,感官评价低,8种样品这些指标的含量都在安全范围内,但脂肪氧化指标POV均超过限量标准。