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1.
目的:从牛乳酪蛋白中纯化获得αS1-酪蛋白并对其进行综合鉴定,以及制备特异性识别αS1-酪蛋白的兔多克隆抗体。方法:采用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析色谱对αS1-酪蛋白进行分离纯化,利用酪蛋白的理化性质(等电点和含量)、免疫学技术和质谱技术对纯化的αS1-酪蛋白进行综合鉴定,然后通过透析和冷冻干燥获得高纯度的αS1-酪蛋白,最后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并分析其特异性。结果:在4种酪蛋白中,αS1-酪蛋白在阴离子交换层析色谱中的出峰时间最晚、峰面积最大,在电泳图中的位置最高,最终获得纯度高达94.26%的αS1-酪蛋白,得率为27.19%。免疫5次后,两只兔子的抗血清效价分别为128万和32万,抗血清除了与大豆蛋白存在轻微交叉反应(<0.25%)外,与α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、蛋清蛋白、花生蛋白均无交叉反应,表明特异性高。结论:本研究制备了高纯度的αS1-酪蛋白及其高特异性的多克隆抗体,为过敏原蛋白的纯化与综合鉴定提供了思路,为αS1-酪蛋白免疫学检测方法的建立提供了物质基础。 相似文献
2.
食物过敏是严重的公共卫生问题,它影响全世界5%的成人和8%的儿童,且患病率仍在上升。食物过敏目前尚无根治疗法,避免摄入或接触含过敏原的食物仍是患者的最佳选择。食物过敏原的检测与食物生产、标识及风险管理等息息相关,是保障食品安全的关键环节之一,故开发出快速、灵敏、准确、可重现和标准化的方法对保护过敏患者至关重要。相较于传统的检测方法,生物传感器作为一类多学科交叉融合的新兴技术,具有灵敏度高、高度自动化、易操作、响应快速和样品用量微等优点,已广泛应用于食物过敏原的检测。本文从原理、优缺点和应用等方面对光学生物传感器、电化学生物传感器、压电免疫生物传感器在检测食物过敏原上进行了阐述和总结,对生物传感器在食物过敏原检测中未来发展的趋势进行了展望,以期为快速现场定量检测食物过敏原提供参考。 相似文献
3.
超声波加工对蛋清蛋白质结构和凝胶特性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为研究超声波加工对蛋清蛋白质结构和凝胶特性的影响,以蛋清为原料进行超声处理,通过对超声前后蛋清蛋白质的空间结构、分子分布和流变学性能进行分析,同时对超声后蛋清凝胶的保水性、质构特性等进行测定。结果表明,在200 W和400 W的超声处理下,蛋清蛋白发生了折叠和聚集,也有小部分发生了降解。在600 W的超声处理下,蛋清蛋白发生了部分降解,同时还有小部分蛋白发生了聚集。因此,超声使部分蛋白质分子粒径变大,部分蛋白质分子粒径变小,整体分子粒径分布变窄。200 W、10 min和600 W、30 min的超声处理下,蛋清溶液偏向于液体的流变性。在200、400 W和600 W 3种功率的超声处理下,蛋清凝胶的保水性增强。200 W和400 W的超声处理有利于增强蛋清的凝胶强度,使凝胶更加坚固和致密。600 W、30 min的超声处理会使蛋清的凝胶强度显著降低,从而使凝胶的稳定性降低。研究结果可为改善蛋清的凝胶性能提供一定的参考。 相似文献
4.
紫苏子油是一种天然的营养保健品,可作为食品补充剂使用。紫苏子油不溶于水,将其掺入水性介质中相当困难,致使生物利用度较低。本研究以表面活性剂的亲水、亲油值(HLB)为指导,制备复合表面活性剂,并结合伪三元相图,利用转相乳化法制备纳米微乳。通过优化工艺参数以形成稳定的紫苏子油纳米微乳,并评估其稳定性。紫苏子油纳米微乳的最优配方为:在Tween80/Span20复配的HLB值为13时,复配表面活性剂和总油相(IPM∶紫苏子油=3∶2)的质量比为8∶2;Tween80/Span20复配的HLB值为14时,复配表面活性剂和总油相(IPM∶紫苏子油=1∶1)的质量比为8∶2;EL-40/PEG-400复配的HLB值为13.5时,复配表面活性剂和总油相(IPM∶紫苏子油=2∶1)的质量比为7.5∶1。通过分析制得的紫苏子油微乳的粒径、电位和类型,稳定的紫苏油纳米微乳液粒径主要分布在53.10~69.16 nm,电位分布在-32~-34.6 mV,进一步佐证了紫苏子油微乳的稳定性较好,且制备的所有微乳均为水包油型(O/W型)。将制备的紫苏子油纳米微乳于37℃烘箱放置15 d,与紫苏子油相比,紫苏子油纳米微乳具有较好的氧化稳定性。 相似文献
5.
小清蛋白是鱼类的主要过敏原,对小清蛋白的抗原性研究将有助于进一步深入理解淡水鱼过敏原在致敏过程中的免疫学意义。以鲤鱼为原材料,首先纯化出鲤鱼小清蛋白,再制备兔抗鲤鱼小清蛋白多克隆抗体,采用间接ELISA法测定抗体效价和抑制性ELISA法测定其特异性,然后采用免疫印迹法及抑制性ELISA法研究鲤鱼与青鱼、草鱼、鲢鱼之间的免疫交叉反应。结果表明,实验兔对鲤鱼类小清蛋白发生了高强度的免疫应答,应答多克隆抗体效价可高达720000,并且4种鱼类小清蛋白在12 ku处发生了强烈的免疫交叉反应。 相似文献
6.
分子印迹聚合物在真菌毒素检测中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
真菌毒素是一类由丝状真菌产生的强毒性次级代谢产物,可广泛污染各种农作物及食品。由于痕量真菌毒素即可严重危害人体健康,且食品样品基质复杂,致使食品中真菌毒素的净化富集及检测流程繁琐、耗时费力且成本较高。因此,建立灵敏、简便、稳定的食品基质中真菌毒素的检测方法尤为重要。分子印迹聚合物具有构效可设计性、专一识别性和高稳定性等特点,将其应用于食品样品前处理及食品中痕量有害物质的检测可有效简化操作流程、降低成本并提高检测灵敏度。该文综述了近年来分子印迹聚合物在含真菌毒素食品样品前处理、真菌毒素色谱分析、真菌毒素仿生传感器等领域的应用及制备方法进展,并对其发展前景进行了展望。 相似文献
7.
8.
本研究以葛根总黄酮(PTF)和枳椇子总黄酮(HTF)为原料,制备复方葛枳黄酮固体饮料并对其配方进行优化。采用瓦勒-霍赫法(Valle-Hoch)法检测PTF和HTF对乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH2)的激活率的影响,确定PTF和HTF复合物配比,并以成型率、休止角、溶化性、吸湿性为考察指标,采用单因素试验法和星点设计-效应面法对复方葛枳解酒固体饮料的配方进行优化。蔗糖/麦芽糊精配比、辅料/原料配比和乙醇浓度对颗粒质量影响较大,固体饮料最优配方为:葛根总黄酮7.65%,枳椇子总黄酮15.31%,蔗糖45.92%,麦芽糊精30.61%,阿斯巴甜0.50%,65%乙醇适量,采用湿法制粒工艺制备复方葛枳黄酮固体饮料。星点设计实验方法模型可靠,优化所得配方产品具有良好的成型率、流动性、溶化性及生产和储存可接受的吸湿性,工艺过程简单,适用于大生产。 相似文献
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