贵长猕猴桃皮HPLC指纹图谱及抗氧化谱效关系研究

目的:研究贵长猕猴桃皮HPLC指纹图谱与抗氧化活性的关系。方法:采用高效液相色谱法建立10批不同来源地贵长猕猴桃皮的指纹图谱,采用SPSS 13.0进行样品聚类分析和主成分分析;并通过DPPH和ABTS法测定其抗氧化活性,以EC50与共有峰峰面积数据为基础,应用皮尔逊相关分析法和逐步回归分析法研究谱效关系。结果:建立了10批贵长猕猴桃皮HPLC指纹图谱,确定了14个共有峰,相似度均>0.90。采用对照品比对方法指认了其中6个峰:2号峰没食子酸,5号峰原儿茶酸,9号峰表儿茶素,10号峰二氢槲皮素,11号峰4-香豆酸,12号峰落新妇苷,样本可聚为3类。皮尔逊相关分析与逐步回归分析结果显示:5号峰(原儿茶酸)和9号峰(表儿茶素)峰面积变化与贵长猕猴桃皮抗氧化活性呈显著正相关,对其抗氧化活性贡献度较大。结论:贵长猕猴桃皮具有较高的体外抗氧化活性,抗氧化活性的物质基础初步确定为贵长猕猴桃皮开发利用、质量评价提供依据。     

贵长猕猴桃果皮中多酚的提取工艺及抗氧化研究

研究了贵长猕猴桃果皮中多酚的提取工艺及抗氧化能力。通过正交试验优化贵长猕猴桃果皮多酚提取工艺参数,以福林酚法测定多酚的含量;以对DPPH自由基和超氧自由基的清除率为指标,评价贵长猕猴桃果皮多酚的自由基清除能力。研究表明:贵长猕猴桃果皮多酚的提取选用乙醇提取为佳,其提取工艺参数为:提取温度50℃、提取时间60 min、料液比1:20、乙醇体积分数60%,多酚的提取含量为13.04 mg/g。贵长猕猴桃果皮多酚对DPPH自由基及超氧阴离子自由基都具有一定的清除能力。     

野地瓜茎正丁醇萃取物中主要抗氧化活性成分的筛选

探清野地瓜茎不同极性萃取物的抗氧化活性,筛选并鉴定抗氧化活性较高萃取物的主要化学成分。通过系统溶剂法对野地瓜茎提取物进行萃取,获得石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇相提取物及剩余上层被萃取水相提取物;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力、2,2’-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除能力和总还原力(TRPA)试验综合评价其不同极性萃取物的抗氧化活性;结合在线高效液相色谱—质谱—二苯基三硝基苯肼(HPLC-DAD-ESI/MSn-DPPH)快速筛选并鉴定活性较高萃取物中的抗氧化活性成分。结果表明:正丁醇萃取物具有较强的抗氧化活性(P0.05),随着质量浓度的增大呈明显的剂量依赖效应,正丁醇萃取物对DPPH自由基、ABTS自由基清除能力的半数抑制浓度(IC_(50))分别为(23.28±0.21),(76.30±1.13)μg/mL。经液相色谱、质谱、文献报道和对照品的综合分析,从野地瓜茎正丁醇萃取物中筛选的3种抗氧化活性化合物为5-O-咖啡酰奎宁酸、3-O-咖啡酰奎宁酸和4-O-咖啡酰奎宁酸。     

因子综合法评价贵州不同产地蓝莓果实品质

以贵州省麻江县4个品种6个不同产地的蓝莓果实为研究对象,对感官、理化、营养等指标进行差异性分析。结果显示,不同品种和产地蓝莓果实的各项指标均存在不同程度的差异。通过主成分分析把14个指标降维为6个,反映了原变量87.3%的信息。根据6个主成分的权重计算的综合评分可知,蓝江和大升林的园蓝、粉蓝的综合评分均高于其他产地的,龙奔和碧波的巴尔德温、灿烂的综合评分均高于其他产地,蓝江和大升林的巴尔德温、灿烂的综合评分较低。聚类分析可知,16个样品被聚为4类,除龙奔巴尔德温与各产地灿烂聚为一类外,其他均按品种果实聚为一类。产地对不同品种蓝莓品质的影响存在差异,即不同品种的适应性存在差异,但与品种相比产地的影响较小。     

贵长猕猴桃多酚抗氧化及抑制亚硝化作用研究

对贵长猕猴桃多酚的抗氧化活性及抑制亚硝化作用进行研究。采用超声辅助乙醇浸提的方法提取猕猴桃多酚,以没食子酸为标准物质来测定提取物的多酚含量。通过对DPPH、羟基自由基清除率及总还原力的测定,评价了贵长猕猴桃多酚的抗氧化性。采用紫外分光光度法,测定了贵长猕猴桃多酚的亚硝酸盐清除率和亚硝胺合成阻断率,以评价其对亚硝化反应的抑制能力。结果表明,贵长猕猴桃中多酚含量为(302.87±7.01)mg GAE/100 g FW。贵长猕猴桃多酚具有较强的抗氧化活性。随质量浓度的增大,其对DPPH自由基、羟基自由基的清除能力和还原能力均显著增加,呈现出明显的剂量依赖效应。其对DPPH自由基、羟基自由基清除活性的半数抑制浓度(IC_(50))分别为0.22、0.45 mg/mL。在模拟人体胃酸条件下(pH3.0、温度37℃),贵长猕猴桃多酚能有效清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成。随着质量浓度增加,清除率和阻断率先增大最后趋于平稳。其IC_(50)分别为0.077、0.082 mg/mL,优于阳性对照Vc,展现出一定的癌症预防功效。贵长猕猴桃多酚具有良好的抗氧化活性及抑制亚硝化反应的作用。     

贵州水晶葡萄病原真菌分离鉴定及室内抑菌活性测试

[目的]确定引起贵州水晶葡萄采后贮藏病害的病原真菌种类及室内筛选用于该病害的主要防治杀菌剂。[方法]对病原菌进行分离纯化鉴定,通过科赫法则确定致病菌种类;筛选12种商品杀菌剂对炭疽病菌进行抑菌活性测定,筛选出有效药剂,为防治该病害提供一定的理论依据。[结果]从贵州省凯里市水晶葡萄采后贮藏病害分离鉴定出3株病原菌,为青霉菌(Penicillium sp.)、炭疽病菌(Clletotrichum gloeosporioides)和链格孢菌(Alternaria sp.),采用科赫法则,对3株病原真菌进行刺伤回接,发现3株均为水晶葡萄在贮藏过程中的主要致病菌。12种杀菌剂对水晶葡萄炭疽病菌进行室内抑菌活性测试结果表明:均具有较好的抑制活性,其中50%咯菌腈WP、50%苯菌灵WP、42%噻菌灵SC和43%戊唑醇SC对水晶葡萄炭疽病菌抑制活性最好,其EC50值分别为0.1024、0.1386、0.1624、0.1974 mg/L。[结论]凯里水晶葡萄采后病害病菌为青霉菌、炭疽病菌和链格孢菌;筛选出12种药剂针对水晶葡萄采后病害炭疽病菌的药剂,其中50%咯菌腈WP对炭疽病菌具有较好抑制效果,为水晶葡萄采后贮藏病害防治提供理论基础。     

Florisil分散固相萃取-HPLC法测定猕猴桃中氯吡脲的残留

采用高效液相色谱法快速测定猕猴桃果实中氯吡脲的残留。果实经乙腈超声提取,无水硫酸钠和Florisil净化、0.22μm微孔滤膜过滤,用乙腈-水(体积比为40:60)流动相洗脱,Inert Sustain Swift C18分离,采用液相色谱仪配二极管阵列检测器进行检测,外标法定量。结果表明:添加量为5、10、15μg/kg时,平均回收率为83%~92%,相对标准偏差为1.2%~1.5%(n=6),检出限为0.008 mg/kg,质量浓度在(0.05~100)μg/m L范围内呈良好线性关系(r=0.9996)。该方法快速、简便、成本低,适用于猕猴桃及其他果蔬中氯吡脲残留的测定。     

乙烯吸附剂耦合1-MCP对“贵长”猕猴桃保鲜效果的影响

为探究乙烯吸附剂耦合1-MCP对"贵长"猕猴桃贮藏品质和后熟口感的影响,首先通过货架期间自然成熟得到最佳口感样品,同时将采后的果实经不同的方法处理(0.25μL/L 1-MCP,0.5μL/L1-MCP,2%乙烯吸附剂+0.25μL/L 1-MCP,不经过任何处理为对照(CK)),贮藏120 d后进行货架,并定期测定各项指标。将各样品与最佳口感样品(M0)进行主成分分析,从而得到最佳的处理方法。结果表明,2%乙烯吸附剂耦合0.25μL/L 1-MCP处理能够有效抑制果实腐烂率的上升,延缓营养品质的下降,并且明显降低果实微环境乙烯浓度,而0.5μL/L 1-MCP的处理能够更好的延缓果实呼吸强度和乙烯生成速率的升高。主成分分析结果表明,接近自然成熟最佳口感M0依次为M11(乙烯吸附剂结合0.25μl/L 1-MCP-货架期6 d)、M8(0.5μL/L 1-MCP-货架期6 d)和M12(乙烯吸附剂结合0.25μL/L 1-MCP-货架期9 d),说明乙烯吸附剂耦合0.25μL/L 1-MCP的能够更好的保持果实后熟口感。因此,采后用2%乙烯吸附剂耦合0.25μL/L 1-MCP对"贵长"猕猴桃保鲜效果最好。     

1-MCP对猕猴桃后熟品质的影响

为探究1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)对猕猴桃后熟品质作用效果的差异,寻找适宜的1-MCP临界浓度,采后对猕猴桃后熟品质及乙烯生物合成关键基因表达进行测定,比较不同质量浓度1-MCP(0(CK)、0. 25、0. 5、0. 75、1. 0、1. 25、1. 5μL/L)在(0±0. 5)℃下对猕猴桃后熟品质的影响。结果表明,不同质量浓度的1-MCP均能不同程度地延缓果实呼吸强度和乙烯生成速率的上升,同时抑制了1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase,ACS)和1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate oxidase,ACO)的酶活性及1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(ACS1)和1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO1)的基因表达量,降低了1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)和丙二酰基-1-氨基环丙烷-1-羧酸(malonyl-1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,MACC)含量,但1. 25μL/L和1. 5μL/L的处理货架后期硬度大,VC含量和固酸比低,而0. 75μL/L的处理能够更好地保持果实的后熟品质,并且能够使果实正常软化。货架末期(12 d)不同处理猕猴桃感官评价从高到低的排列顺序为0. 75μL/L> 0. 5μL/L> 0. 25μL/L> 1μL/L> CK> 1. 25μL/L> 1. 5μL/L。因此,采后用0. 5～0. 75μL/L 1-MCP来处理猕猴桃对保持果实后熟品质的效果最好。