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1.
酶联免疫吸附分析及其在食品安全检测中的应用   总被引:12,自引:0,他引:12  
主要介绍了酶联免疫分析(ELISA)测定的基本原理和分类,讨论了它在食品安全检测中的应用,如检测食品中毒素、病原微生物、农药残留、兽药残留、转基因食品成分等。  相似文献
2.
PCR方法检测食品中的转基因成分35S和NOS的研究   总被引:12,自引:2,他引:10  
根据转基因农作物中最常用的花椰菜叶病毒启动子(CaMV358)和根癌农杆菌终止子(NOS)的序列,设计并合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针(FDCP),分别建立了常规PCR、应用FDCP的新型实时荧光PCR检测转基因成分35S启动子和NOS终止子的方法。利用该套方法对冷冻马铃薯条、大豆、冷冻玉米棒、甜椒、番茄等实物样品进行了检测,发现11份样品中有5份检出35S启动子、NOS终止子,6份样品结果为阴性。结果表明我们建立的两种PCR方法均能有效检测出35S和NOS片段,其中常规PCR方法具有灵敏度高、特性异好的特点;应用FDCP的新型实时荧光PCR方法则更为简便、快速、准确,有很好的应用前景和研究价值。  相似文献
3.
马铃薯及其制品中转基因成分的多重PCR检测   总被引:7,自引:0,他引:7  
邵碧英  陈文炳  杨婕 《食品科学》2006,27(1):178-181
采用CTAB法提取15个马铃薯及其制品样品中的总DNA,内源PATA基因的PCR扩增结果均为阳性,表明已提取到DNA。应用根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止予和大肠杆菌K12菌株新霉素磷酸转移酶Ⅱ(nptⅡ)基因的二重PCR对样品进行转基因成分检测,结果均为阴性。将马铃薯DNA和阳性质粒pBI121混合作为PCR的反应模板,建立了内源PATA基因、花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S启动子、nos终止子和nptⅡ基因之间的多重PCR检测方法。多重PCR方法具有节约试剂、节省时间等特点,在转基因产品检测上的应用值得推广。  相似文献
4.
玉米及其制品中转基因成分的单一 PCR及多重PCR检测   总被引:7,自引:2,他引:5  
邵碧英  陈文炳 《食品科学》2005,26(9):380-384
采用CTAB法提取玉米及其制品的总DNA,用PCR方法检测其中的转基因成分如花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S启动子、根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)胭脂碱合成酶甚因(nos)终止子、根癌农杆菌CP4菌株的EPSPS基因、吸水链霉菌(Treptomyces hygroscopicus)bar基因及苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki)crylA(b)基因,筛选到阳性样品,并建立了几组玉米内源zein基因和转基因成分之间的多重PCR检测方法。结果表明,建立的多重PCR方法用于同时检测玉米内源基因和转基因成分是可行的,值得推广;虽然我国还未有己获准商品化生产的转基因玉米,但国外转基因玉米已流入福建省。  相似文献
5.
采用SDS法提取番茄未成熟及成熟果实和甜椒成熟果实中的总DNA,内源rbcL基因扩增结果均为阳性,表明已提取到DNA及DNA中不存在抑制PCR的物质。应用花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaicvirus,CaMV)35S启动子、根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子和大肠杆菌K12菌株新霉素磷酸转移酶Ⅱ(nptⅡ)基因的三重PCR检测样品DNA中的转基因成分,结果均为阴性。将番茄、甜椒的DNA和阳性质粒pBI121进行混和,作为PCR反应的DNA模板,成功建立了可同时检测内源rbcL基因、nptⅡ基因、CaMV35S启动子和nos终止子的多重PCR方法。多重PCR方法具有快速、简便、准确等特点,在转基因产品检测上具有重要的应用价值。  相似文献
6.
PCR法检测大豆加工食品中的转基因成分   总被引:6,自引:1,他引:5  
通过分子生物学手段,以聚合酶链式反应(PCR)技术为基础,建立了检测大豆加工食品中转基因成分的方法。实验分别采用CTAB法和试剂盒(Kit)法对大豆锅巴、豆浆、豆奶粉、豆腐、豆腐丝等五种大豆加工食品中的DNA进行了提取,用内标基因Lectin对此两种方法的提取效果进行了比较,并以提取的DNA为模板,利用不同的引物分别对目标基因35S和NOS进行了PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明:Kit法的DNA提取效果优于改良CTAB法,上述五种大豆加工食品中均检测出35S启动子和NOS终止子,且均含有转基因成分。  相似文献
7.
玉米加工食品中转基因成分的PCR检测   总被引:5,自引:0,他引:5  
通过分子生物学手段,以聚合酶链式反应(PCR)技术为基础,建立了从玉米加工食品中检测转基因成分的方法,实验分别采用CTAB法(十六烷基三乙基溴化铵)和试剂盒(Kit)方法对市场上选购的玉米片,玉米面,香脆玉米角,窝窝头,爆玉米等5种玉米食品中的DNA进行了提取,并用聚合酶链式反应(PCR)方法对玉米内标基因Inverase进行扩增,采用凝胶电泳对结果分析,比较两种DNA提取方法的优越性,再对通常转入的基因构建元件35S启动子,NOS终止子进行扩增对玉米转基因成分进行检验,结果表明:试剂盒法对玉米加工食品中的总DNA有更好的提取效果,并得到一个适宜的扩增条件参数;5种玉米食品的转基因检测结果均为阳性,即都含有转基因成分。  相似文献
8.
豆粕中转基因成分检测技术研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
针对豆粕中核酸含量低且被严重破坏,DNA难以提出的问题对CTAB法进行优化,有效地从豆粕中提取到可以用于扩增反应的DNA。同时定性检测出外源调控序列CaMV35S启动子和NOS终止子及目的基因Cp4-EPSPS序列,成功建立了豆粕中转基因成分的检测方法。  相似文献
9.
9种大豆制品中转基因成分定性PCR检测   总被引:3,自引:0,他引:3  
本研究从豆粕、豆粉、豆腐等9种大豆产品中提取到高质量的DNA,在对内标准基因Lectin进行扩增的基础上,设计相应的特异性引物,建立了稳定的定性PCR反应体系,对35S启动子基因、外源目的基因Cp4-epsps基因进行了扩增,发现豆粕、豆奶粉、豆腐、豆皮、豆豉中含有转基因成分,而其它产品中未发现转基因成分存在.  相似文献
10.
常见食用菌中转基因成分定性PCR检测方法的建立   总被引:3,自引:0,他引:3  
将食用菌转基因研究用的质粒载体(p301-bG1)DNA,添加到19种常见食用菌样品中,作为模拟阳性样品,从中提取出DNA用于PCR分析,建立了常见食用菌中3个大小分别为165、398、599bp的外源基因(NOS、BAR、GUS)的特异性DNA片段的定性PCR检测方法,还进行了二重与三重PCR分析,并通过不同的模板DNA浓度对PCR扩增结果的影响,分析了PCR检测的灵敏度。  相似文献
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