克雷伯杆菌O852产反式二氢香芹酮关键酶转化条件及超声提取工艺优化

本研究以Klebsiella sp. O852为研究对象,使用超声提取的方法对其进行细胞破碎,对其转化柠檬烯生成反式二氢香芹酮的关键酶所在位置及转化条件进行了研究。通过单因素实验研究了超声时间、料液比、振幅对细胞破碎的效果的影响。最终设计Box-Behnken中心组合试验确定了最优提取条件。结果表明,该酶是一种胞内酶。最佳培养时间为8 h,此时为细胞生长的对数中期。转化时间为4 h时,在磷酸盐缓冲液中获得的酶活最高。通过单因素及响应面试验,获得提取该酶的最优条件为,超声时间21 min,料液比1:13,振幅36%,在此条件下,得到的酶活为(40.97±2.02) U/g。本研究为进一步研究该酶的纯化及酶学性质的探究提供了参考。     

人参豆豉的发酵工艺及人参皂苷生物转化研究

以人参和黄豆为发酵基质制备人参豆豉（简称参豉），以纤溶酶活性为评价指标，通过考察发酵菌株、黄豆与人参比例、人参加入方式、发酵温度和发酵时间等因素确定其最佳发酵工艺，并利用薄层色谱（TLC）和高效液相色谱（HPLC）分析参豉发酵前后人参皂苷的变化。结果表明，参豉的最佳发酵工艺为黄豆与人参比例10∶1（g∶g），人参以水提液方式加入，优势发酵菌DC-1，发酵温度28 ℃，发酵时间96 h。在此最佳条件下，纤溶酶活力为（498.90±28.33） IU/g，参豉发酵后原有人参皂苷成分发生了明显变化，人参皂苷转化率＞60%。     

通过RRLC-Q-TOF MS和UPLC-QQQ MS分析原人参三醇型皂苷在人肠道菌群中的代谢产物

通过高分离度快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)和超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-QQQ MS)法对原人参三醇型皂苷Re、Rg 1、Rg 2、Rh 1、Rf、F 1、R 1在人肠道菌群中的转化产物进行定性、定量分析,确定原人参三醇型皂苷的代谢产物、转化途径和60 h时的转化率。结果表明,人参皂苷Re的转化产物为人参皂苷Rg 1、Rg 2、Rh 1、F 1和PPT,转化率为91%;人参皂苷Rg 1的转化产物为人参皂苷Rh 1、F 1和PPT,转化率为80%;人参皂苷Rg 2的转化产物为人参皂苷Rh 1和PPT,转化率为73%;人参皂苷Rh 1和F 1主要通过PPT代谢,转化率分别为82%和81%;人参皂苷Rf的转化产物为人参皂苷Rh 1和PPT,转化率为89%;三七皂苷R 1的转化产物为人参皂苷Rg 1、R 2、Rh 1和PPT,转化率为79%。原人参三醇型皂苷类成分可被人肠道菌群代谢,主要通过丢失糖残基形成转化产物,而次级皂苷和苷元是人参在体内发挥药理作用的物质基础。     

高效液相色谱法测定肉桂醛生物转化体系中10种苯基香料

建立一种同时测定微生物转化肉桂醛体系中10种天然苯基香精香料(苯甲醇、苯甲醛、苯甲酸、苯乙醇、苯乙酮、肉桂醇、肉桂醛、肉桂酸、3-苯丙醇和3-苯丙醛)的高效液相色谱分析方法。试样经无水乙醇提取,离心,过滤后进样。色谱分析采用SunFireTMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇∶乙腈∶水∶冰醋酸=28.4∶18∶53.6∶0.04(体积比)为流动相,流速1.0 mL/min,紫外检测器检测。10种待测物在2.00 mg/L^318.60 mg/L范围内线性关系良好(0.9987≤R2≤0.9996),方法检出限(method detection limit,LOD,S/N=3)为0.36 mg/L^1.16 mg/L,在低、中、高3个加标水平下的平均回收率为92.13%~102.90%,RSD为0.62%~4.01%。该方法可用于微生物转化肉桂醛合成天然苯基香料的生物反应体系的成分分析,也可用于生物转化肉桂醛合成天然香料的菌种选育工作中。     

何首乌活性成分二苯乙烯苷的黑曲霉转化的研究

目的:探索二苯乙烯苷黑曲霉转化最佳条件,为二苯乙烯苷类药物的生产和使用提供指导。方法:二苯乙烯苷用黑曲霉在不同条件下发酵,发酵产物经过萃取处理后,用高效液相测定各发酵条件产物中二苯乙烯苷的含量,并进行曲线拟合,探讨最佳转化条件。结果:二苯乙烯苷黑曲霉最佳转化条件为:转速138 rpm、温度29℃、接种量20%。结论:该转化方法条件温和、操作简便、成本低且转化效率高。     

1,3二羟基丙酮微生物法生产研究进展

1,3二羟基丙酮(DHA)是一种重要的化工医药中间体,广泛应用于医药、化工、化妆品和食品等领域。相比较化学合成法,利用微生物发酵生产DHA具有很大优势。综述近年来微生物法生产1,3二羟基丙酮在菌株改良、生产工艺优化等方面的研究进展。     

微生物所创建出利用二氧化碳生物合成丙酮的新途径

二氧化碳(CO2)既是主要温室气体,又是宝贵的碳资源。创建新的生物合成途径,实现利用太阳能将CO2高效生物转化为石油基化学品,将为解决全球资源和能源问题开辟一条新路,对工业可持续发展具有重大意义。     

肉桂叶生物转化制备肉桂醇

从土壤中筛选到的微生物菌株MX18具有降解肉桂叶的能力,其转化产物通过气相色谱-质谱联用仪鉴定为肉桂醇。该菌株被鉴定为鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.),命名为Sphingomonas sp.MX18,并用于生物转化肉桂叶合成天然肉桂醇的反应,考察发酵培养基碳源、氮源、反应体系初始p H值、温度、底物加入量、转化时间对转化反应的影响。结果表明,反应优化工艺条件为:糊精为碳源,质量浓度30 g/L,蛋白胨为氮源,质量浓度20 g/L,初始p H值5,肉桂叶粉的加入量10 g/L,30℃下反应72 h。在此条件下,肉桂醇的得率达0.77%。     

发酵法制备天然香兰素的研究

香兰素是应用最为广泛的香料之一。以阿魏酸为底物,通过微生物发酵法制备天然香兰素,研究中分别考察了不同氮源、补料量和补料方式等因素对阿魏酸转化率的影响,通过发酵条件优化,香兰素最终浓度达到15g/L,发酵单位达到国际先进水平。通过相应的萃取、结晶过程获得的天然香兰素产品,质量达到了国际标准。     

应用球面对称设计优化两相体系生物转化合成5-氟尿苷

应用球面对称设计研究了水/有机溶剂两相体系对嘧啶核苷磷酸化酶基因工程菌生物转化合成5-氟尿苷的影响。结果表明,以30％(体积分数)DMSO为有机溶剂,当其体积比(以反应物总体积计)为30％、反应温度为55℃、反应时间为1 h、装液量为4 mL/50 mL时,5-氟尿嘧啶的转化率达75.7％,5-氟尿苷产量较单水相时提高...