磷酸化对鲢小清蛋白抗原性降低的作用

通过建立鱼类主要过敏原小清蛋白(parvalbumin,PV)磷酸化反应的条件,研究磷酸化对PV的抗原性及结构影响。将PV和葡萄糖-6-磷酸二钠盐(D-glucose-6-phosphate disodium salt hydrate,G6P-Na2)混合,在不同质量比、反应时间以及反应温度条件下进行干法磷酸化反应。采用Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Dot-blotting检验其聚合类型以及抗原性变化。通过扫描电镜对聚合物的微观结构进行分析,利用圆二色谱仪和ANS探针法分析磷酸化产物的二级结构和疏水性变化。结果显示,在PV与G6P-Na2质量比为1∶4、反应温度80℃、反应时间80 min条件下生成的磷酸化产物的抗原性最低。磷酸化反应后,产物呈现聚集状态,其二级结构变化较为明显,疏水性明显提高。磷酸化反应对蛋白结构的改变可能是影响PV抗原性降低的主要原因。     

五氧化二磷改性水性环氧树脂的合成及其性能

环氧树脂的磷酸化是生产水溶性环氧树脂的一种有效方法,主要分析了五氧化二磷磷酸化环氧树脂的制备条件,主要从温度、时间以及投料比等方面对于环氧树脂磷酸化过程和结果的影响进行分析,并借助红外光谱对于合成的产物进行性能测试,为五氧化二磷改性水性环氧树脂的制备合成提供有效的参考。     

人葡萄糖调节蛋白78基因磷酸化位点的真核突变载体的构建及表达

目的构建人葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)基因编码区磷酸化位点的真核突变载体,并在肝癌SMMC-7721细胞中进行表达。方法利用定点诱变技术将GRP78基因的两个磷酸化位点进行突变,即203位苏氨酸(T)用丙氨酸(A)替换,466位酪氨酸(Y)用苯丙氨酸(F)替换,以质粒pEGFP-N1-GRP78为模板,进行PCR扩增后,构建突变质粒pEGFP-N1-GRP78(T203A)、pEGFP-N1-GRP78(Y466F)和pEGFP-N1-GRP78(T203A/Y466F),并进行DNA测序分析。将测序正确的突变质粒转染肝癌SMMC-7721细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,Western blot法检测融合蛋白在细胞中的表达。结果突变质粒pEGFP-N1-GRP78(T203A)、pEGFP-N1-GRP78(Y466F)和pEGFP-N1-GRP78(T203A/Y466F)经双酶切及测序鉴定,证明构建正确;突变质粒组荧光蛋白表达分布于细胞质内,细胞核内无表达产物分布;3个突变质粒转染组在相对分子质量约105 000处均可见目的蛋白条带,大小与预期相符。结论成功构建了人GRP78单突变T203A、Y466F和双突变T203A/Y466F真核表达载体,并可在肝癌SMMC-7721细胞中表达,为进一步研究GRP78基因磷酸化位点T203、Y466在肝肿瘤侵袭和转移中的作用奠定了基础。     

木质素基二氧化硅复合纳米颗粒的制备及在高密度聚乙烯中的应用

针对目前木质素基Si O2复合纳米颗粒聚集严重及木质素负载量低,难以应用的现状,以碱木质素为主要原料,先通过磷酸化改性制备磷酸化碱木质素,再利用酸析共沉法将1.2份磷酸化碱木质素与1份纳米Si O2(均为质量份)复合制备了木质素-Si O2复合纳米颗粒,并探究复合颗粒对高密度聚乙烯(HDPE)力学性能的影响。FT-IR、XPS、TEM、TG和静态接触角测试结果表明,木质素主要以氢键作用与Si O2结合;与原料二氧化硅相比,复合颗粒的粒径从25 nm增加到40 nm,聚集程度明显减弱;复合纳米颗粒中木质素占47%(质量分数);表面的疏水性增强,有利于复合颗粒在高密度聚乙烯中均匀分散,显著提高了HDPE的拉伸强度。与碱木质素/HDPE复合材料相比,木质素-Si O2复合纳米颗粒/HDPE复合材料的拉伸强度和断裂拉伸率分别提高了48.68%和73.57%。     

染料木黄酮抑制3T3-L1细胞成脂分化机制

目的:研究染料木黄酮是否通过雌激素受体介导影响3T3-L1前脂肪细胞成脂分化,并探讨其可能的机制。方法:以不同浓度染料木黄酮处理3T3-L1细胞,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞存活率;在3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中分别加入不同浓度染料木黄酮、染料木黄酮和ICI182780(一种雌激素受体抑制剂)混合物及不同浓度雌二醇,油红染色观察分化结果,测定细胞甘油三酯(triglyceride,TG)含量;染料木黄酮、染料木黄酮和ICI182780混合物及不同浓度雌二醇处理诱导成熟后的脂肪细胞,测定培养液甘油含量;分别用染料木黄酮(30μmol/L)、染料木黄酮(30μmol/L)和ICI182780混合物干预细胞成脂分化,Western blotting法检测细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、p-ERK、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)、p-AMPK、激素敏感性脂肪酶(hormone sensitive lipase,HSL)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS)蛋白表达量。结果:3T3-L1细胞存活率随染料木黄酮浓度的升高而降低,50~200μmol/L染料木黄酮能抑制细胞生长(P0.01);染料木黄酮能负向调节成脂分化后细胞胞浆内TG含量,在0~50μmol/L浓度范围内呈剂量依赖关系,高剂量雌二醇(100 nmol/L)能下调TG含量;染料木黄酮能促进成熟脂肪细胞脂解,提高细胞培养液甘油浓度;染料木黄酮(30μmol/L)能上调p-AMPK、HSL蛋白表达,下调FAS蛋白表达(P0.01),对ERK、p-ERK、AMPK表达量无明显影响(P0.05)。ICI182780(1μmol/L)能部分阻断染料木黄酮(30μmol/L)对p-AMPK的调节作用(P0.05)。结论:染料木黄酮能抑制3T3-L1细胞成脂分化,其机制可能是染料木黄酮一方面下调FAS蛋白表达,抑制脂肪合成,另一方面激活AMPK-HSL途径促进脂肪分解;染料木黄酮还可能通过非雌激素受体途径抑制3T3-L1细胞成脂分化。     

抗泥型低坍损聚羧酸减水剂的制备与性能研究

通过磷酸化异戊烯醇聚氧乙烯醚为大单体和引入乙烯基磺酸钠、丙烯酰胺、丙烯酸、丙烯酸羟丙酯等功能型小单体,在氧化-还原体系下合成了一种具有高含泥量下减水率高、混凝土经时损失小、硬化混凝土强度高、耐久性好的抗泥型低坍损聚羧酸减水剂。     

复合软磁材料密度与电绝缘特性的研究

本文主要探讨了磷酸化处理、退火温度、成型压力对铁粉基复合软磁(SMC)材料电阻率、密度的影响.发现提高磷酸化过程中磷酸与铁粉的质量比可有效提高材料电阻率,但同时也降低了材料密度.提高退火温度,可以提高材料的密度,但是也会降低磷酸化材料的绝缘性.对于使用磷酸化粉末的复合软磁材料,退火温度不宜超过600℃.成型压力的增加有...     

RelA/p65的磷酸化调节及其与肿瘤的关系

NF-κB是广泛存在于真核细胞中的一种具有多向调节功能的转录因子。它通过对靶基因的调节,参与细胞的增殖与转化、凋亡、炎症以及免疫应答等重要的生命活动,并在炎症、肿瘤等疾病中的扮演着重要角色。早期研究发现,NF-κB具有抗凋亡和促肿瘤的作用。但是,临床试验证实NF-κB抑制剂在肿瘤治疗中的临床疗效并不理想。随着研究深入,发现NF-κB翻译后修饰对其功能有着重要影响,特别是不同位点的磷酸化状态对其功能影响极大。本综述重点讲述NF-κB最重要的功能亚基RelA/p65的磷酸化调节及其与肿瘤的关系。     

碳酸钙磷酸化工艺制备多孔球形羟基磷灰石

研究了通过磷酸化工艺制备多孔球形羟基磷灰石的可行性. 利用(NH4)2HPO4, Na2HPO4溶液或其混合溶液，在微波加热条件下对粒度约15 mm的球形碳酸钙进行磷酸化处理，通过ESEM, XRD和EDS等手段进行表征. 结果表明，在微波加热条件下，球形碳酸钙通过与HPO42-发生阴离子交换反应，可在15 min的较短时间内转化成羟基磷灰石主相. 不同组成的HPO42-处理液对微波加热转化反应的历程有显著影响，进而影响颗粒形貌、结构和物相组成. 在不同条件下可制备出从绒毛状到细小颗粒堆积体等不同形状的多孔球形羟基磷灰石.     

携带socs3基因的溶瘤腺病毒的构建及体外抗肿瘤活性的研究

SOCS3(suppressor of cytokine signaling 3)是JAK/STAT信号通路的负调控因子,SOCS3间接调控的STAT3磷酸化与肿瘤的发生密切相关.本试验构建携带socs3的溶瘤腺病毒AdCN305-SOCS3,在细胞水平研究socs3对肿瘤的抑制作用,并评估AdCN305-SOCS3的抗肿瘤效果.该病毒感染多种肿瘤细胞,均能特异性扩增,同时表达功能正常的SOCS3蛋白,从而抑制STAT3磷酸化,引起肿瘤细胞的明显凋亡.对AdCN305-SOCS3的研究,证实SOCS3蛋白和AdCN305-SOCS3病毒都具有抗肿瘤的功能,在肿瘤的靶向基因治疗研究中具有广阔的应用前景.