具有保护肠上皮细胞HT-29免受大肠杆菌和H2O2损伤潜力的植物乳杆菌的筛选

益生菌可在肠道定植从而发挥抗炎或抗氧化活性，有利于宿主肠道健康。本实验研究了从新疆传统发酵乳制品中分离得到的8?株植物乳杆菌对大肠杆菌侵袭和过氧化氢刺激肠上皮细胞HT-29的保护作用。结果表明：在8?株植物乳杆菌中，植物乳杆菌35具有最高的黏附能力。植物乳杆菌35可通过取代、竞争、排阻的方式抑制大肠杆菌对HT-29细胞的黏附，抑制率分别为42.60%、59.17%、60.19%。植物乳杆菌35及其多糖可抑制大肠杆菌刺激HT-29细胞产生白细胞介素-8；同时保护HT-29细胞免受过氧化氢的损伤，增加超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力水平并降低丙二醛含量。结论：植物乳杆菌35及其粗胞外多糖具有抑制大肠杆菌O157诱导的炎症性肠病的潜力。     

南美白对虾肝胰腺蛋白提取方法优化及无水保活环境胁迫对细胞凋亡蛋白的影响

为提高Western Blotting结果的可靠性，以蛋白溶出率和凝胶电泳蛋白条带完整性为指标，比较提取液种类、研磨方式、酶抑制剂种类及其体积分数和提取时间对南美白对虾肝胰腺蛋白提取效果的影响。采用优化后的提取方法获得高质量蛋白样品，并采用Western Blotting法分析无水环境胁迫后南美白对虾肝胰腺组织中细胞凋亡信号通路相关蛋白的表达水平。结果表明：RIPA裂解液作为提取溶剂所得的蛋白溶出率高于水提和磷酸盐缓冲液，电动匀浆和液氮研磨所得蛋白条带更完整，4%蛋白酶磷酸酶混合抑制剂能有效抑制肝胰腺内源酶引起的蛋白降解；采用Western Blotting法分析无水保活期间南美白对虾肝胰腺蛋白，发现低温诱导休眠的同时会引起细胞轻微凋亡，且凋亡水平呈应激时间依赖性增加，环境胁迫解除后有所回调。     

化脓隐秘杆菌对奶牛脾脏组织细胞凋亡的影响

目的观察化脓隐秘杆菌自然感染奶牛脾脏组织的病理学变化,并检测组织细胞中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bax和Bcl-2的表达,以确定化脓隐秘杆菌感染对奶牛脾脏组织细胞凋亡的影响。方法筛检2头化脓隐秘杆菌阴性健康奶牛(对照)和5头自然感染化脓隐秘杆菌的奶牛,收集脾脏组织样本,采用本课题组国家发明专利方法,进行石蜡制片和HE染色,观察脾脏组织病理学变化;采用免疫组织化学方法与本课题组国家发明专利方法相结合,检测奶牛脾脏组织中与细胞正负凋亡相关的调节基因Bax和Bcl-2及凋亡通路蛋白Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表达情况。结果肉眼观察可见化脓隐秘杆菌自然感染奶牛脾脏肿大、柔软,有出血;病理组织学观察可见脾脏组织出血,水肿,淋巴细胞数量减少,有坏死;脾脏淋巴细胞Caspase-3、Caspase-9和Bax表达阳性,与对照组相比,差异有统计学意义(P <0.05),少量淋巴细胞Caspase-8和Bcl-2表达阳性,与对照组相比,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论化脓隐秘杆菌能够引起奶牛脾脏淋巴细胞发生坏死和凋亡;可通过调节脾脏中淋巴细胞Bcl-2家族的活性,引起其Bax和Bcl-2比率改变,增加淋巴细胞线粒体内外膜通透性,导致与凋亡相关因子的释放,激活Caspase-9,进一步激活Caspase-3,从而引起脾脏中淋巴细胞发生凋亡。     

鲍鱼肽的制备及其抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖作用

将鲍鱼内脏进行蛋白酶解、超滤和纳滤制备鲍鱼肽,研究不同质量浓度鲍鱼肽对体外培养人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。结果表明:鲍鱼肽中除含有71.62%(质量分数,下同)蛋白以外,还含有3.38%碳水化合物和11.48%灰分;鲍鱼肽的分子质量主要分布在350～1 000 Da,丰度较高的蛋白肽分子质量分布在350 Da附近,表明鲍鱼肽中由2～3个氨基酸组成的寡肽占比较高。根据四甲基偶氮唑蓝法检测的结果,发现不同质量浓度(1、2、4、8 mg/mL)鲍鱼肽均能抑制MDA-MB-231细胞的生长增殖,并呈现出明显的剂量依赖性。伴随鲍鱼肽质量浓度的增加,贴壁细胞数量逐渐减少,细胞变圆,且部分细胞核出现浓缩。流式细胞术分析结果表明,鲍鱼肽主要将MDA-MB-231细胞阻滞在S期和G2期,诱导MDA-MB-231细胞凋亡和坏死,进而抑制肿瘤细胞增殖。因此,利用鲍鱼内脏制备的蛋白肽是一种具有发展潜力的辅助抗肿瘤功能性食品。     

细胞模型在临床营养研究中应用现状

传统临床营养研究多停留在人群和动物试验阶段,随着临床营养研究的深入发展,细胞模型试验也逐渐成为临床营养研究中的重要方式。本文主要综述了临床营养中的细胞模型试验常用的细胞系,详细阐述了细胞模型在临床营养中的应用现状,涉及动脉粥样硬化性心脑血管疾病、肌肉衰减综合征、肾脏疾病、肿瘤、胃肠疾病、肝损伤、过敏性炎症、烧伤等领域,就我国居民死因排名靠前的4种疾病做了重点阐述,分别指出各种疾病临床营养研究中常用细胞模型、细胞模型试验的应用优势及其科学意义,以及细胞模型发展应用趋势(三维细胞、细胞组、微流控、高通量高内涵),总结了临床营养中传统细胞模型试验的局限性,并对细胞模型试验中新技术新方法的应用前景进行展望。     

植物细胞分裂素ortho-Topolin Riboside对人白血病细胞株THP-1的抗癌活性及机制初探

本研究以人急性髓性白血病细胞株THP-1为研究对象,初步探讨其抗癌活性及作用机制。通过光学显微镜观察N6-2-苄胺羟基腺苷(oTR)作用后THP-1细胞形态学和数目变化;CCK-8法检测oTR对THP-1细胞的增殖抑制作用,并用核苷转运体拮抗剂和腺苷受体拮抗剂预处理细胞检测oTR进入细胞的方式;用流式细胞仪分析oTR作用对THP-1细胞凋亡和分化的影响。结果表明,oTR可显著(P<0.05)抑制THP-1细胞的增殖能力,且呈浓度依赖性;核苷转运体拮抗剂Dipyridamole预处理THP-1细胞后,可明显逆转oTR的增殖抑制作用,而4种腺苷受体拮抗剂(DPCPX、SCH58261、MRS1754和MRA1191)则无显著影响;oTR可诱导处理组细胞亚倍体峰比例显著(P<0.05)高于对照组,且细胞髓系分化标志蛋白CD11b表达明显升高。以上结果表明细胞分裂素oTR通过核苷转运体途径进入THP-1细胞,显著(P<0.05)抑制细胞的增殖,并可诱导THP-1细胞发生凋亡和髓系分化。     

纳米颗粒疫苗在肿瘤免疫治疗中的研究进展

免疫疗法和肿瘤疫苗为癌症治疗提供了新策略。纳米材料因其组成、粒径、形貌、疏水性、表面电荷、抗原负载能力以及可控修饰合成等性质,在免疫细胞的募集、成熟以及免疫系统的激活中发挥着重要功能。因此,基于纳米材料的肿瘤疫苗被广泛应用于癌症的免疫治疗。综述了纳米颗粒疫苗在肿瘤免疫治疗中的研究进展,包括聚合物纳米颗粒疫苗、脂质体纳米颗粒疫苗、病毒样颗粒疫苗以及无机纳米颗粒疫苗等。     

MSCT多期增强扫描在肾脏透明细胞癌中的诊断价值

目的探讨多排螺旋CT(MSCT)多期增强扫描在肾脏透明细胞癌诊断中的规律性,提高对该肿瘤诊断水平。方法回顾性分析2016年1月~2018年6月14例均经手术切除病理证实为肾脏透明细胞癌患者的CT影像资料,所有病例均行MSCT平扫及多期动态增强扫描。结果14例肾脏透明细胞癌形态大多数呈圆形或者类圆形,瘤体最大径范围1.7cm^11.3cm,平均(4.8±1.4)cm,13例CT平扫时肿瘤密度不均匀,呈等低密度,1例呈等密度;12例出现坏死囊变,钙化1例,伴肾盂、肾盏侵犯2例;动态增强扫描可见12例包膜完整,1例均匀性强化,13例不均匀性强化;引入对比剂后皮质期,出现10例病灶强化幅度大于肾皮质,而仅4例低于肾皮质,三期平均CT值分别为110±30Hu,90±15Hu及75±14Hu,其中在实质期出现13例肿瘤强化幅度小于肾实质,仅1例大于肾实质。结论引入对比剂动态增强扫描后,肾脏透明细胞癌在皮质期明显不均匀强化,实质期强化幅度下降显著,呈现出典型的“快进快出”血流动力学强化方式,且肿瘤容易出现坏死、囊变为其特点。