红松松仁多糖对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用

目的:探讨红松松仁多糖PNP40c-1对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用及可能机制。方法:以LPS刺激RAW264.7细胞诱导炎症模型,分别采用MTT法、比色法、酶联免疫法、RT-PCR和Western Blot等方法,比较LPS诱导前后巨噬细胞的细胞活力、吞噬能力、一氧化氮(nitric oxide,NO)/一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,iNOS)和细胞因子表达的变化;同时对Nrf2/HO-1信号通路中关键蛋白核因子E2相关因子2(nuclear factor(erythroid-derived 2)-like 2 protein,Nrf2)和血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的mRNA和蛋白表达水平进行研究,以探讨PNP40c-1的具体作用机制。结果:在LPS诱导RAW264.7细胞的炎症反应中,PNP40c-1以剂量依赖性显著提高巨噬细胞的吞噬能力(P<0.05),抑制LPS诱导的NO和iNOS过量表达;PNP40c-1还可通过Nrf2/HO-1信号通路调节炎症因子如肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(IL-6)的分泌,缓解炎症反应。结论:红松松仁多糖PNP40c-1对LPS诱导的炎症反应具有一定的抑制作用,其作用机制与调节Nrf2/HO-1信号通路有关。     

LPS诱导小鼠骨质疏松症模型及其细胞分子机制研究进展

炎症介导的免疫系统功能失常在原发性骨质疏松症的发生过程中具有重要作用。从构建方法、细胞机制、分子机制等三方面对近年来国内外脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠骨质疏松症模型的研究进展进行了综述。LPS不仅对破骨细胞增殖分化具有明显的促进作用,还会对成骨细胞骨架蛋白F-actin造成损伤;LPS通过激活RANKL/RANK/OPG信号通路、TLR4/NF-κB信号通路、Connexin43蛋白和TNF-α因子来诱导破骨细胞增殖分化,从而促进骨吸收;研究LPS诱导的炎症性骨质疏松症的发病机制对发掘骨质疏松症抗炎药物具有重要作用。     

玉米须缓解脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的:探讨玉米须缓解脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法:将60只小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0. 005g/kg. d)、玉米须低、中、高剂量组(2. 5、5、10 g/kg. d),每组10只。灌胃给药,每天1次,连续给药10 d,末次给药2 h后除正常组小鼠气管滴注等量生理盐水外,其他各组小鼠气管滴注脂多糖(10 mg/kg),12 h后眼球采血,处死小鼠,取新鲜肺组织,ELISA检测血清中TNF-α和IL-1β水平以及肺组织中MPO活性,计算肺组织湿/干重比值,HE检查肺组织的病理变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠肺组织湿/干比值、血清中TNF-α和IL-1β水平、肺组织中MPO活性均显著性升高(P 0. 05,P 0. 01)。与模型组比较,地塞米松组、玉米须中剂量和高剂量组小鼠肺组织湿/干比值、血清中TNF-α和IL-1β水平、肺组织中MPO活性均显著性降低(P 0. 05,P 0. 01),并改善了肺组织损伤。结论:玉米须能够对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制体内炎性介质释放有关。     

胰岛素通过PI3K/AKT及PI3K/ERK通路减轻脂多糖对钠泵α1亚基的抑制

目的:研究胰岛素减轻脂多糖对肺泡II型上皮细胞Na+-K+-ATPase α1亚基表达抑制的分子机制。方法:以A549细胞为研究对象,脂多糖（1 μg/mL）诱导8 h后,再加用胰岛素（100 nmol/L）处理4 h,采用Western blot法检测Na+-K+-ATPase α1亚基表达及AKT、ERK1/2、p70s6k、NEDD4-2总蛋白表达及其磷酸化水平变化。结果:A549细胞在1 μg/mL脂多糖作用下,Na+-K+-ATPase α1亚基蛋白表达显著降低。胰岛素处理可部分解除脂多糖对A549细胞Na+-K+-ATPase α1亚基表达的抑制。胰岛素上调Na+-K+-ATPase α1亚基表达是通过改变PI3K/AKT及PI3K/ERK通路中关键蛋白AKT、NEDD4-2、ERK1/2、p70s6k的磷酸化水平来实现的。结论:胰岛素通过调控PI3K/AKT及PI3K/ERK通路部分解除脂多糖对肺泡II型上皮细胞Na+-K+-ATPase α1亚基表达的抑制,这为临床上采用胰岛素干预急性呼吸窘迫综合征提供了初步实验依据。     

西洛他唑对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞分泌TNF-α的影响及机制探讨

目的研究西洛他唑对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞分泌TNF-α的影响,探讨西洛他唑对单核细胞的炎症调控作用。方法体外培养人THP-1单核细胞,分为对照组(A组)、LPS组(B组)、西洛他唑组(C组)、西洛他唑+SQ22536组(D组),C组和D组加入LPS刺激24 h。应用ELISA法检测各组细胞培养上清TNF-α水平,并测定各组细胞内c AMP浓度。结果西洛他唑能抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞分泌TNF-α,同时升高细胞内c AMP浓度。结论西洛他唑可抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞分泌TNF-α,这种作用可能与升高细胞内c AMP浓度有关。     

SR-B1在抑制炎症反应中的作用

B类Ⅰ型清道夫受体(SR-B1)是高密度脂蛋白(HDL)的配体,它不仅介导胆固醇逆转运,而且在炎症反应中起到"多功能参与者"的作用。SR-B1不仅可以明显降低血浆胆固醇,抑制外周组织脂质异常蓄积,而且可以抑制血管炎症,延缓动脉狭窄,降低器官血液供应障碍的发生率。近年来,对SR-B1在动脉粥样硬化(AS)性疾病的炎症反应中的作用及影响进行了深入的研究,提示它是对心脏血管有益的一个潜在的治疗靶点。本文就近年来对SR-B1与炎症反应的关系的研究作一综述。     

脂多糖预刺激对大脑皮质星形胶质细胞和小胶质细胞NO分泌水平的影响

目的:探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)预刺激对大脑皮质星形胶质细胞和小胶质细胞NO分泌水平的影响.方法:体外分离、纯化、培养星形胶质细胞和小胶质细胞.培养细胞分设LPS预刺激组(先用10 ng/ml LPS预刺激18 h后,改用1μg/ml的LPS再刺激),LPS 10 ng/ml单次刺激组,LPS 1μg/ml单刺激组与对照组(不用LPS刺激).分别于LPS刺激后6、24、48 h收集细胞培养上清,用硝酸还原酶法检测NO水平.结果:星形胶质细胞和小胶质细胞,LPS预刺激组在24 h后,NO水平增加,明显高于相应时间点LPS 1 μg/ml单次刺激组(P均<0.05);其中,星形胶质细胞分泌NO的时间较长,可持续到48 h,与相应单次刺激组比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论:LPS体外预刺激神经胶质细胞,可促使细胞分泌NO的水平升高.     

羟基酪醇对LPS引起的小鼠急性肺损伤的保护作用

探索了羟基酪醇通过调控自噬在小鼠ALI模型中发挥其抗炎作用的潜在分子机制。通过Western印迹和染色方法检测LPS诱导的ALI小鼠细胞因子活性、炎症因子水平、sirtuin(SIRT1/3/6)表达、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活和自噬标志物表达,用Sybyl/Surflex模块研究了HT与SIRT和MAPK之间的分子对接。结果显示,LPS刺激的SIRT抑制、MAPK磷酸化和自噬抑制均被HT给药显著消除。伴随着BAL液中肺W/D比值、蛋白质浓度和炎症细胞水平的降低,HT治疗显著减弱肺水肿和炎症细胞浸润到肺组织中。包括TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和MCP-1等炎症介质的LPS驱动释放,被HT强烈调控。     

大青龙汤颗粒剂体外抗甲型H1N1流感病毒实验研究

目的:探讨大青龙汤颗粒剂体外抗甲型H1N1流感病毒的药效及对脂多糖所致大鼠发热的解热作用。方法:以甲型H1N1流感病毒感染狗肾细胞(MDCK),以细胞病变效应法(CPE)与噻唑蓝比色法(MTT)相结合,探讨大青龙汤颗粒剂对甲型H1N1流感病毒生物合成的抑制作用、对病毒吸附、穿入细胞的阻断作用及对病毒的直接杀伤作用。以脂多糖复制大鼠发热模型,分别测定大鼠不同时间点的肛温,绘制体温曲线,对解热作用进行分析。结果:大青龙颗粒剂对甲型H1N1流感病毒直接杀伤的半数有效浓度(IC50)为12.40 g·L-1,治疗指数(TI)为1.8。利巴韦林注射液的IC50为0.45 g·L-1,TI为1.0。模型组在造模后1 h即升温,5 h到达峰值,持续8 h。与模型组比较,大青龙汤颗粒剂高、低剂量组在造模后4～8 h有显著性差异。与阿司匹林组比较,大青龙汤颗粒剂高、低剂量组在1～3 h降温作用稍弱,第4小时、第5小时即与之相当,而第6小时至第8小时优于阿司匹林。大青龙汤颗粒剂高、低剂量组间无显著性差异,但低剂量组效果稍优于高剂量组。结论:大青龙颗粒剂在细胞水平表现出一定的抗甲型H1N1流感病毒作用,作用形式为直接灭活,且呈剂量依赖性;但其抑制流感病毒生物合成及阻断吸附、穿入细胞的作用不明显。其对脂多糖所致大鼠发热的解热作用显著,且药效持续时间长。     

抗性淀粉癸酸复合物通过肠道菌群对抑郁症小鼠的干预机制

采用抗性淀粉癸酸复合物（resistant starch-capric acid,RS-CA）实现癸酸在结肠的定点释放,研究癸酸对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）引起的小鼠抑郁症的改善作用。选取40 只雄性ICR 小鼠随机分成5 组（空白组、LPS组、LPS+RS 组、LPS+氟西汀组、LPS+RS-CA 组）。所有干预样品均以体积比2∶1 溶解在小鼠的饮水中。最后一次LPS 腹腔注射后,进行行为学实验;随后处死动物,眼球取血保留海马,用于生化指标检测;保留结肠和脑组织进行苏木精-伊红染色;收集粪便进行16S rRNA 检测。结果表明,经RS-CA 预处理的小鼠在悬尾实验和旷场实验中表现良好,同时降低了抑郁小鼠血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平,提高了海马5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）水平,表明RS-CA 对LPS 造成的结肠腺细胞杂乱排列以及海马神经元核浓缩和嗜酸变性具有改善作用。16S rRNA 结果表明,RS-CA 预处理逆转了与抑郁症相关菌群的失衡,包括Firmicutes/Bacteroidetes 比值降低,Prevotella、Parabacteroides、Klebsiella 和Acfinobacteria 恢复至正常水平;同时改善了肠道菌群的均匀性,使肠道微生物组成与正常组一致。以上结果表明,RS-CA 可以通过调节肠道菌群降低下丘脑-垂体-肾上腺素（hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA）轴炎症反应从而实现抗抑郁作用。