玉米肽缓解小鼠体力疲劳的作用

目的：研究玉米肽缓解小鼠体力疲劳的作用。方法：分别将小鼠按体重随机分成4组，即空白对照组和玉米肽低、中、高3个剂量组。灌胃不同剂量玉米肽样品30 d后，观察各组小鼠负重游泳（WLS）时间、肝糖原含量以及游泳后血清尿素氮、血乳酸指标的变化。结果：玉米肽3个剂量组与空白对照组相比，小鼠WLS时间存在显著差异（P＜0.05），中剂量组小鼠肝糖原储备量较空白对照组有显著提高（P＜0.05），该组小鼠运动后血清尿素氮水平较空白对照组显著降低（P＜0.05）。各剂量组处理后，小鼠血乳酸曲线下面积均有降低，然而未表现出显著差异（P＞0.05）。结论：玉米肽具有缓解小鼠体力疲劳的作用。     

中草药复配乳蛋白ACE抑制肽的试验研究

为了将具有降血压功效的药食同源中草药与具有降血压活性的牛奶蛋白酶解液复配,以完成一款具有辅助降压功效的功能性牛奶的实验研究提供理论依据和技术参数。试验以ACE抑制率为指标,优化胰蛋白酶酶解脱脂乳的最佳工艺,并从15味中草药中筛选出具有较高ACE抑制活性的提取液,再将优化所得酶解液和筛选出的中草药提取液进行复配,获得高ACE抑制率的活性功能乳组方。结果表明:胰蛋白酶酶解脱脂乳的最佳酶解工艺为底物质量浓度7 g/100 mL、酶解时间6 h、加酶量5%、酶解温度31℃、pH6.9,脱脂乳酶解液的ACE抑制率为58.51%;筛选得出山楂、决明子的ACE抑制率较高,分别为50.88%、45.34%;且当山楂提取液和决明子提取液混合时ACE抑制活性提高,两者为2:1时,ACE抑制率较高为52.52%;酶解液和中草药提取液(山楂提取液:决明子提取液为2:1)按1:1进行复配,ACE抑制率最高为59.09%,对研究具有辅助调节血压效应的保健功能性乳制品具有理论和实践探讨意义。     

裙带菜α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备

通过响应面法优化裙带菜α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的制备工艺,以期得到一种调控餐后血糖的新型有效成分。选择五种蛋白酶酶解裙带菜蛋白筛选最佳水解酶,研究底物浓度、加酶量、pH、酶解温度、酶解时间对产物抑制率和水解度的影响,并根据单因素实验结果运用Box-Behnken设计原理进行三因素三水平的响应面优化试验,测定酶解液的分子量并绘制酶抑制动力学曲线。结果表明,最佳酶解条件为碱性蛋白酶,底物浓度7.11%,pH10.14,温度47 ℃,加酶量10000 U/g,反应时间1 h,在此条件下,酶解液的抑制率为51.17%,与预测值接近;裙带菜酶解液多为小肽,半抑制浓度为46.079 mg/mL,抑制类型为典型的可逆混合型抑制。本研究获得了裙带菜α-葡萄糖苷酶抑制活性肽的最佳制备工艺和理化性质,为开发新型降血糖活性肽提供理论基础和实验依据。     

五种蛋白酶对牡蛎酶解产物滋味特性的影响

以牡蛎为研究对象,在水解度一致的情况下,探究胰蛋白酶、动物蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶对牡蛎酶解产物感官、肽分子量和游离氨基酸的影响。结果表明:五种酶解产物均具有较强的鲜味。碱性蛋白酶酶解产物在五种酶解产物中整体感官评价最佳。分子量<5 kDa肽比例从大到小是胰蛋白酶(74.99%)、动物蛋白酶(73.44%)、中性蛋白酶(71.53%)、碱性蛋白酶(68.46%)和风味蛋白酶(58.77%)。五种酶解产物中游离氨基酸百分比均呈现出谷氨酸百分比最高、组氨酸百分比最低的特点。游离氨基酸总量从高到低分别为胰蛋白酶(22.816 mg/g)、中性蛋白酶(20.775 mg/g)、风味蛋白酶(20.530 mg/g)、动物蛋白酶(16.287 mg/g)、碱性蛋白酶(16.232 mg/g)。胰蛋白酶、动物蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶酶解产物中TAV大于1的游离氨基酸数量分别为10、8、8、9和11种。5种蛋白酶酶解产物中,TVA值最大的氨基酸均是谷氨酸。     

绿豆抗氧化肽的酶法制备及其抗氧化活性

为提高绿豆淀粉生产过程中产生的废弃物绿豆蛋白的资源利用率，研究了酶法制备绿豆抗氧化肽的最佳条件，并探究其抗氧化活性。通过选用不同蛋白酶及其复合酶，对绿豆蛋白进行水解，综合考虑反应时间、加酶量等因素，对酶解反应进行优化。通过体外抗氧化实验对水解制得的多肽溶液进行抗氧化能力检测，最终确立了最佳的反应条件，具体如下：选用中性蛋白酶进行酶解，底物质量分数3%，酶解时间3 h，加酶量质量分数2%，pH 7，温度50 ℃。按照该条件所制得的绿豆多肽溶液，质量浓度为5 mg/mL时，DPPH自由基清除率可达（91.58±2.44）%，同时还具有较强的还原能力。经凝胶层析柱分离纯化后得到5个分离组分，其中小分子肽段组分5的抗氧化能力最强，高于其他大分子肽段以及未分离多肽。     

鲣鱼蛋白肽谱效关系研究

采用鲣鱼为原料,以蛋白质回收率为指标,酶解制备不同工艺条件的样品。通过测定其黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制活性、ORAC值、分子质量分布图谱和总氨基酸含量,构建鲣鱼蛋白肽体外化学活性与其分子质量分布图谱、总氨基酸含量图谱之间的谱效关系。结合超高效液相-质谱联用(LC-MS/MS)方法研究其降尿酸肽和抗氧化肽的分布。研究表明,鲣鱼蛋白肽的XOD抑制活性与其ORAC值具有显著的相关性。由多肽分子质量<1ku所占含量的分布区段和脂肪族氨基酸的含量可初步预测鲣鱼蛋白肽的化学活性。质谱分析表明,纯化组分的质谱基峰图在不同时间段的信号强度与鲣鱼蛋白肽的降尿酸活性和抗氧化活性具有明显的相关性。     

高温、高湿和光照对特殊医用配方食品流变特性的影响

为确定特殊医用配方食品在高温、高湿、光照条件下的流变性变化,以豌豆肽为原料进行影响因素(高温、高湿、光照)试验、加速试验、长期试验,揭示环境因素对特殊医用配方食品黏性、弹性与流变性质的影响。特殊医用配方食品在高温下5 d之后食用安全性降低;在高湿条件下放置10 d左右的医用食品,其食用安全性相对于放置5 d左右的医用食品安全性要高;在光照条件下5 d之后食用安全性降低。由此可见,温度、湿度、光照对特殊医用配方的食用有很大影响。在加速试验及长期试验中,医用食品最佳保质期时间应控制在2~5个月。文章为具有广阔发展前景的特殊医用食品的开发、食用条件及储存条件提供理论数据和指导依据。     

降糖肽Aglycin的高效表达及活性鉴定

基于自组装肽ELK16能在大肠杆菌细胞内自聚集的特性,本研究将Aglycin通过一个内含肽Mxe GyrA与自组装肽连接,构建能在体外自剪切的重组表达载体pET30a-Aglycin-Mxe-PT-ELK16。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行蛋白表达条件的优化,得到目的蛋白聚集体,随后对聚集体进行DTT切割条件的优化,经过进一步纯化最终可得到纯度为98.15%、产量为5.53mg/g菌体湿重的Aglycin肽。采用基因工程手段重组表达Aglycin的产量比目前化学提取方法提高了近100倍。此外,经体外实验证明,Aglycin对α-葡萄糖苷酶抑制的IC50(36.48μmol/L)比阿卡波糖(991.33μmol/L)低,说明Aglycin比阿卡波糖有更强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,这进一步证明Aglycin有开发为α-葡萄糖苷酶抑制剂的潜力。     

海参二肽基肽酶Ⅳ抑制肽的酶解制备及结构鉴定

通过抑制二肽基肽酶IV(Dipeptidyl-peptidase IV, DPP-IV)的活性,从而减少GLP-1的降解,提高血液中胰岛素的水平,是控制血糖水平的一种重要手段。本文以海参(Holothariatubulosa)为原料,通过探究蛋白酶种类、加酶量和酶解时间对酶解产物DPP-IV抑制活性、蛋白回收率和水解度的影响,确定了海参DPP-IV抑制肽的制备条件,并进一步测定了其分子量分布和总氨基酸组成,最后通过UPLC-MS/MS鉴定了其潜在的活性肽序列。结果发现,木瓜蛋白酶与复合蛋白酶1:1的复配酶解具有最佳的酶解效果,其产物的得率和DPP-IV抑制活性均最高,且在加酶量为干海参质量的1%,酶解时间为4 h时,海参酶解产物在终浓度为2 mg/mL时的DPP-IV抑制率为66.97%,蛋白回收率为76.25%,水解度为6.10%。酶解产物的分子量大都小于5000 u,且富含脯氨酸(Pro)和丙氨酸(Ala)等与抑制DPP-IV活性有关的氨基酸。将获得的酶解物中的肽段进行液质联用检测,并通过Mascot分析筛选得到28条具DPP-IV抑制肽的肽序列,分子量在500～1936 u。本实验结果为以海参为原料进行降血糖产品的开发奠定了基础。