中华草龟内脏油的水酶法提取及其不同部位脂质组成分析

采用单因素实验对水酶法提取中华草龟内脏油工艺进行优化,采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）和超高效液相色谱-电喷雾电离-四极杆时间质谱法（UPLC-ESI-Q-TOF-MS）分析中华草龟内脏、脂肪块、卵、肌肉脂质的脂肪酸组成、脂质组成。结果表明,水酶法提取中华草龟内脏油最优工艺条件为使用碱性蛋白酶、酶解时间0.5 h、酶添加量（以内脏粉质量计）0.5%、酶解温度55 ℃、pH 7、料液比1∶ 4,在此条件下提油率为（66.56±1.25）%。中华草龟4个部位脂质中检出包括异构体在内的16种脂肪酸,检出139种脂质成分,主要为甘三酯,还有少量的磷脂、鞘磷脂和甘二酯。主成分分析表明,脂肪块和内脏中的脂质成分相似,而与卵、肌肉中脂质组成有较大差异。综上,中华草龟脂质具有作为食用油脂开发的潜力。     

中华草龟肉抗肿瘤活性肽的分离纯化及鉴定研究

该研究选取中华草龟肉为原料,以其木瓜蛋白酶酶解所得多肽对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制功效为活性检测指标,采用MTT细胞毒性实验对具有抗癌作用的多肽组分进行追踪测定。先采用截留分子量10 ku的超滤膜对酶解液进行截留,再通过Sephadex G-75、G-50及LH-60等层析技术手段对截留所得活性成分进行分离纯化。RP-HPLC谱图的结果表明,最终分离纯化出了一个纯度较高的抗癌活性组分TP-1,其IC50值约为2.7 mg/mL,呈明显的抗癌剂量依赖性与时间依赖性,且对正常细胞毒性极小。随后通过紫外、红外、圆二色谱对TP-1进行理化性质表征,并采用质谱技术对该多肽主成分分子量进行鉴定。结果表明TP-1中含有β折叠,β转角和无规则卷曲结构,且主成分多肽分子量约为1410.7 u,本研究成果为进一步开展中华草龟活性肽的抗癌机理研究奠定了坚实基础。