河豚毒素的研究进展

河豚毒素是河豚中的有毒物质,是毒性很强的神经性毒素.对河豚毒素的性质、来源、作用机制、检测方法以及应用等几个方面做了较详细的阐述,为河豚毒素的进一步研究提供理论依据.  

Identification of Toxin and Fish Species in Cooked Fish Liver Implicated in Food Poisoning

ABSTRACT: The cooked fish liver retained by the victims was assayed for toxicity and mitochondrial DNA. Meanwhile, 8 live specimens of puffer Takifugu niphobles were also assayed. The toxicity of cooked fish liver was 280 ± 20 mouse units per gram (MU/g). All specimens of T. niphobles showed high toxicity (more than 850 MU/g) in the liver. The toxin from cooked fish liver and liver of T. niphobles was identified to be tetrodotoxin. The cooked fish liver and fresh liver of T. niphobles showed the same sequence genotype and the same single restriction site for Bsa I. Therefore, the species of cooked fish liver was suggested as T. niphobles.  

生物毒素和中毒控制中常见毒物快速测定技术研究简介

为改变生物毒素和中毒控制领域常见毒物的检测缺乏快速、灵敏、简便技术的现状，选择该领域有代表性的难新问题进行攻关。分别建立了检测粮油食品中AFB1的2个ELISA方法，最低检出浓度分别为0．01μg／kg和0．1μg／kg，回收率均在80％以上，同时研制出拥有我国自主知识产权的2个AFB1ELISA试剂盒，建立了2条年产量分别为1．5万盒和2000盒的生产线。建立了检测河纯鱼中河豚毒素的直接和间接ELISA方法，最低检出浓度分别为0．1μg/L和1μg／L，回收率均高于70％。研制出基于直接法的河豚毒素ELISA试剂盒，筛选出了国产可食的河纯鱼种。建立了检测粮食中伏马菌素B1的ELISA方法，最低检出浓度为5μg/L，回收率75．24％～117．65％，研制出检测伏马菌素B1的ELISA试剂盒。建立了食品和中毒样品中亚硝酸盐、甲醇等20种毒物的快速检测方法，所建方法与国标法相比检测结果差异无显性，但检测时间缩短50％以上、检测成本降低80％～95％。自行设计研制出便携式智能化微型光电比色仪和光反射传感器，与建立的20种毒物快速检测技术配套使用，实现了中毒样品的现场智能化、自动化快速定量检测。研制出携带方便、便于中毒现场使用的毒物检测箱，建立了一条年产量2000套的生产线。整个课题申请专利5项，批准2项；获奖2项；产生2项国家标准和1项企业标准。在国内外杂志上共发表章28篇。快速检测技术各项指标均达到国际同等、国内领先水平。  

河豚鱼的去毒方法与去毒后风味调整的研究

本研究对我省餐饮业常见的私下加工的几种河豚鱼品种的毒性进行了检测，并用两种碱性去毒剂和一种非碱性去毒剂对河豚鱼的毒素进行了去毒方法的比较和筛选试验，同时还对去毒后鱼体风味的调整进行了试验研究，获得了一系列的试验研究数据。  

用昆明小鼠定量测试河豚毒素的研究

为建立昆明小鼠定量测定河豚毒素(TTX)方法,选用雄性昆明小鼠进行研究,结果显示TTX致昆明小鼠的LD50为0165μg,TTX剂量在045～256μg之间与昆明小鼠平均死亡时间成线性关系;当河鱼样品提取液TTX浓度低于045μgml时,腹腔注射1ml提取液致小鼠平均死亡时间大于4min,在此范围内与ICR小鼠进行比较,毒素检测结果基本一致。此外对该传统实验方法进行了无需小鼠体重校正、利用平均数计算等项改进。用昆明小鼠定量测试河豚毒素既方便又可靠。  

昆明系小鼠生物法定量测定水产品中河豚毒素

为建立昆明系小鼠定量测定河豚毒素(TTX)方法,选用体质量19～21g的昆明系小鼠作为实验对象,用不同质量浓度TTX溶液腹腔注射小鼠。结果显示:TTX致昆明系小鼠的半数致死量(LD50)为0.18μg,小鼠死亡时间与TTX注射剂量满足方程Y=e(0.357/X+1.005)。此外,采用体积分数0.5%乙酸溶液提取TTX,回收率达到90%以上,对样品的最低检测限为0.56μg/g。昆明系小鼠定量测定河豚毒素,准确、稳定、方便快捷,可用于水产品安全检测。  

Identification of Tetrodotoxin and Fish Species in an Adulterated Dried Mullet Roe Implicated in Food Poisoning

ABSTRACT: There was 1 victim of neurotoxic food poisoning from an adulterated dried mullet roe in Kaohsiung, Taiwan, in March 2001. The victim exhibited typical neurotoxic symptoms. The residue of dried mullet roe retained by the victim was assayed for toxicity and mitochondrial DNA. Its toxicity was 3450 mouse units per gram. The toxin was partially purified and identified as tetrodotoxin and derivative. The sequence of the 376‐nucleotide region in the cytochrome b gene of the mitochondrial DNA exhibited the same genotype and the same restriction site for SapI as that of the toxic puffer fish Lagocephalus lunaris.  

河鲀食用毒性评价与安全措施研究

为了充分利用河资源 ,开展了河安全利用课题研究。利用高效液相色谱法和竞争抑制性酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法对安全利用过程中的河毒素进行检测 ,同时引入危害分析和关键控制点 (HACCP)系统 ,对河食品从原料生产到成品的各环节进行危害分析 ,确定关键控制点。制订了原料接收、活鱼暂养、加工去毒、河制作、以及环境卫生的控制标准和措施。结果表明 ,河的分布具有地域差异性。河体内毒素分布很不均匀 ,主要集中在肝、卵巢、皮肤等部位 ,而且季节性变化明显 ,个体差异显著。运用该研究成果自 1995年至 2 0 0 2年进行人体试食试验以来 ,未发现一例中毒症状和体征 ,各项试验证明 ,经去毒工艺处理的河是安全的 ,经食用后不会引起河毒素中毒。这对于保证河资源的安全利用有着重大的意义。  

河豚毒素DNA适配子的筛选与结构分析

人工合成113个碱基的随机ssDNA文库,以河豚毒素为靶物质,采用SELEX技术进行12轮筛选,测定各轮富集文库与河豚毒素的亲和力,其中第10轮富集文库与河豚毒素的亲和力最高。将第10轮富集文库进行克隆、测序,用DNAMAN软件分析克隆子的一级和二级结构,并测定克隆子与河豚毒素的亲和力。结果表明:与河豚毒素结合力高的DNA适配子经过10轮筛选后得到富集,成功筛选到最高亲和力的DNA适配子G10。  

液质联用技术在生物毒素食品安全检测分析中的应用

生物毒素是自然界一种重要的生命现象, 是人们探讨生命科学奥秘和开发新药的重要工具和物质基础, 也是食品安全领域的重点防治对象。真菌毒素和海洋生物毒素是与食品安全相关的两类生物毒素, 二者均具有毒性强、污染面广的特点, 对人类健康具有极大的危害。在生物毒素众多分析检测手段中, 液质联用技术因灵敏、高效等特点而被广泛应用。本文以液质联用技术为切入点, 综述了该技术用于生物毒素食品安全检测分析的研究与应用进展, 同时对相关的样品处理技术研究也进行了概要介绍。