盐析法联合离子液体双水相纯化木瓜蛋白酶

本实验以海南产番木瓜为研究对象,采取盐析法联合离子液体双水相对其富含的木瓜蛋白酶进行提取纯化。以不同饱和度的(NH_4)_2SO_4对粗酶液进行盐析,通过实验结果分析,确定了以饱和度分别为20%和45%的两步盐析法的最佳条件。然后再进行双水相萃取,通过单因素试验结果设计3因素3水平的响应面试验,优化双水相萃取条件为离子液体[C_4mim]N(CN)_2质量分数29.76%、(NH_4)_2SO_4质量分数16.08%、pH 8.18,在此最优条件下木瓜蛋白酶萃取率为89.01%,酶活力回收率为86.72%,所得到木瓜蛋白酶比活力为1 056 U/mg,纯化倍数达到9.6倍。然后对实验产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,经纯化的酶中杂条带明显减少,验证了分离纯化的效果。     

卧螺离心机内盐析流场的CFD-PBM耦合计算

目前对卧螺离心机内部流场的数值模拟大多采用传统欧拉模型，考虑其内部伴有盐析等固相粒子微观行为过程的研究少有报道。本文应用计算流体力学软件Fluent，基于群体平衡模型与多相流Eulerian模型、RNG k-ε模型耦合方法，对卧螺离心机内部盐析两相流场进行三维数值模拟，通过仿真与实验相结合的方式，得到卧螺离心机内盐析流场的晶体颗粒粒径分布、组分数分布和浓度分布及其变化规律，初步揭示了卧螺离心机内伴有盐析的流场晶体颗粒分布特性。研究结果表明：卧螺离心机内盐析晶体粒径的分布随液环半径的增大而增大，螺旋叶片正壁面粒径明显较背面大，从排液端至排渣端的晶体粒径分布有整体逐渐变大的轴向粒径梯度；流道内晶体粒径随转鼓转速的增大而减小，随进口固相体积分数的增大而增大；大粒径晶体的组分数在液环外侧及螺旋叶片正面附近相对较大，而中、小粒径晶体组分数的分布规律则与之相反；盐析颗粒浓度在液环外侧较高且分布均匀，且随转鼓转速的提高而提高，PBM模型与Euler模型计算结果有一定的相似与差异。     

葡萄籽多酚类物质的盐析萃取

采用乙醇/(NH4)2SO4两相盐析体系,从酿酒副产物葡萄籽中提取多酚、类黄酮和原花青素。实验结果表明,在室温下用组成(质量分数)为30%乙醇/18%(NH4)2SO4的体系提取葡萄籽中多酚、类黄酮以及原花青素,得率分别为64.54、42.45、23.16 mg·g-1;它们富集于上相乙醇相,萃取回收率分别为97.31%、98.19%、97.92%。室温条件下用2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)法与2,2′-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)法测定两相盐析萃取物抗氧化、清除自由基能力,IC50分别为61.85、71.76 mg·L-1,比传统的热回流提取物具有更强的抗氧化活性。     

葡萄籽多酚类物质的盐析萃取

采用乙醇/（NH₄）₂SO₄两相盐析体系,从酿酒副产物葡萄籽中提取多酚、类黄酮和原花青素。实验结果表明,在室温下用组成（质量分数）为30%乙醇/18%（NH₄）₂SO₄的体系提取葡萄籽中多酚、类黄酮以及原花青素,得率分别为64.54、42.45、23.16 mg·g^-1;它们富集于上相乙醇相,萃取回收率分别为97.31%、98.19%、97.92%。室温条件下用2,2-二苯基-1-苦基肼（DPPH）法与2,2'-连氮基-双-（3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸）（ABTS）法测定两相盐析萃取物抗氧化、清除自由基能力,IC₅₀分别为61.85、71.76 mg·L^-1,比传统的热回流提取物具有更强的抗氧化活性。     

盐析凝胶-电催化氧化法处理水射流磨料生产废水试验研究

采用盐析凝胶法对废水中的PVA加以回收,并对盐析凝胶后废水进行Fenton处理。考察了Na₂SO₄、Na₂B₄O₇·10H₂O投加量、pH、温度、反应时间等因素对PVA回收效果的影响;同时研究了电催化氧化氧化过程中反应时间、槽电压、初始pH、极板间距、通气量等因素的作用效果。结果表明,盐析凝胶-Fenton氧化法可以有效的回收废水中的聚乙烯醇,并能高效的降解废水中的有机物。在最佳条件下,即室温,pH为4.0,投加Na₂SO₄15 g/L,Na₂B₄O₇·10H₂O 2.5 g/L,反应60 min,废水中PVA回收率可达88.78%;在此基础上,电催化氧化进一步处理使得废水中的PVA降至123.61 mg/L,COD降至1143.93 mg/L,后续需做进一步处理。     

两种不同工艺制备的人凝血因子Ⅷ的比较

目的比较甘氨酸/Na Cl沉淀工艺(盐析工艺)和层析工艺制备的人凝血因子Ⅷ(FⅧ)。方法对盐析工艺和层析工艺制备的工艺过程样品和成品,采用双缩脲法检测蛋白含量,ACL7000血凝仪检测FⅧ凝固活性,并计算比活性,按《中国药典》三部(2010版)要求进行Tween-80残留量、TNBP残留量、外观、可见异物、水分、热原和异常毒性检测。结果层析工艺中以新鲜冰冻血浆为原料制备冷沉淀能较好地保证FⅧ的收率;聚乙二醇沉淀步骤能降低操作体积;层析处理能有效去除杂蛋白,使FⅧ比活至少提高25倍;S/D和80℃72 h病毒灭活处理对FⅧ质量无明显影响。两种工艺制备成品的外观、可见异物、异常毒性和热原检查均符合《中国药典》三部(2010版)相关规定,但层析工艺中FⅧ比活明显高于盐析工艺,并且对TNBP和Tween-80的去除效果更显著。结论层析工艺制备的FⅧ比活、Tween-80和TNBP残留量等关键性指标均优于甘氨酸/Na Cl沉淀工艺,该工艺更适于FⅧ的规模化生产。     

盐水液滴降压蒸发析盐过程数值模拟

盐水溶液的降压蒸发广泛应用于海水淡化和工业制盐等领域,因此研究盐水在降压过程中的蒸发特性具有重要意义,有助于解决我国水资源缺乏问题。本文通过数值模拟的方法研究了降压环境下盐水液滴蒸发析盐过程,获得了盐析质量和液滴温度随时间的变化。采用的工质为饱和盐水,液滴的初始温度分别为20℃、15℃、10℃;环境压力从0.1MPa降至2000~10000Pa。通过与实验数据相对比,验证了本文模型的有效性。通过该数学模型,分析了影响析盐率和液滴温度变化的主要因素。结果表明:液滴直径越大,在蒸发过程中其析盐率越高,但温度变化越慢;压降速率越快,液滴蒸发速率越快,析盐率越大,温度变化也越快;液滴初始温度越高,蒸发速率越快,液滴表面析盐率越高,但不同初始温度的盐水液滴,在蒸发过程中其最终温度趋于一致。     

青霉菌柚苷酶的分离纯化及酶学性质

对来源于Penicillium sp.1523的柚苷酶分离纯化工艺进行了系统分析,依次采用超滤、硫酸铵盐析和Sephadex G-200凝胶过滤层析操作对柚苷酶进行逐级纯化,通过SDS-PAGE电泳对各步骤的纯化结果进行分析鉴定,并考察了温度、pH及不同金属离子对酶活性的影响。结果显示纯化后的柚苷酶比活力达到4478.76U/mg,纯化倍数为11.99倍,活力回收率为38.10%。纯化后的柚苷酶经SDS-PAGE凝胶电泳鉴定显示两条清晰的条带,说明该酶由两个亚基组成,其分子量分别为89ku和72ku;同时酶学性质研究发现最适温度为50℃,热稳定性不理想,最适pH为4.0,Ca2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+、EDTA、Cu2+对该酶酶活有促进作用,而Fe2+、SDS在低浓度时便对柚苷酶酶活表现出抑制作用。本研究为青霉菌柚苷酶的大规模生物转化及分子改性提供了实验基础。     

盐析萃取菊芋发酵液中的2,3-丁二醇(英文)

The removal of solid impurities and separation of target products from a fermentation broth is becoming more tedious with the utilization of lignocelluloses as source of substrate.2,3-Butanediol,an important chemical used widely is also a main product of sugar-based fermentation carried out by Klebsiella pneumoniae.In this study,we investigated the use of salting-out extraction(SOE) that employed a K2HPO4/ethanol system consisting of 21% ethanol and 17% K2HPO4(mass fraction) to separate 2,3-butanediol from the viscous Jerusalem artichoke-based fermentation broth.After SOE,about 98% of solid matters was removed,and the viscosity decreased from 72.5 mPa s in the original fermentation broth to 4.4 mPa s in the top phase.The partition coefficient and yield of 2,3-butanediol reached 13.4 and 99%,respectively,and 89% of soluble proteins was removed from the broth.The results showed that SOE is an efficient way for isolating 2,3-BD from a highly viscous fermentation broth by removing much of the solid matters within the broth.     

响应面优化盐析萃取万寿菊花中叶黄素的研究

采用丙酮/磷酸氢二钾两相盐析体系萃取万寿菊花中叶黄素,确定最优盐析体系组成为27%(w/w)丙酮/18%(w/w)磷酸氢二钾。通过单因素实验探讨了提取温度、静置时间、料液比等对叶黄素在两相间分配行为的影响,并运用响应曲面法研究磷酸氢二钾质量分数、料液比、温度三个因素对万寿菊花中叶黄素得率的影响,得出三个考察因素最优工艺参数,即,磷酸氢二钾质量分数为20%,料液比1∶40,萃取温度42℃。在此条件下,叶黄素富集于上相丙酮相,得率为6.23 mg/g。室温下采用2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)法测定两相盐析萃取物的IC50为0.34 mg/m L,比索氏及超声辅助提取物具有更强的抗氧化活性。