红色红曲菌组蛋白去乙酰化酶MrSir2的原核表达及活性分析

根据基因组序列信息,利用cDNA末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)得到了红色红曲菌中组蛋白去乙酰化酶mrsir2基因的完整cDNA序列,其编码序列(coding sequence,CDS)为1539 bp,编码512个氨基酸,含有一个SIR2蛋白保守结构域。根据大肠杆菌的密码子的偏好性对mrsir2序列进行优化,优化后的序列与p ET-28b载体连接后转入宿主菌E.coli BL21中进行IPTG诱导表达,并优化表达条件。实验结果表明:在16℃条件下用终浓度为0.25 mM的IPTG诱导培养16 h后,目的蛋白Mr Sir2可溶性表达效果良好。Ni2+柱亲和层析纯化后的Mr Sir2重组蛋白在SDS-PAGE上显示为一条约75 ku大小的条带,蛋白定量浓度达1.97 mg/mL,经Western blot鉴定为目的蛋白,测定酶活为78.5(OD/min/mg),780μM的二氢香豆素(dihydrocoumarin,DHC)对Mr Sir2蛋白的酶活抑制率为47%。Mr Sir2蛋白的可溶性表达为全面了解其酶学特征提供了材料,也为体外分析蛋白相互作用奠定了基础。     

基于混沌的复倒谱域双重音频水印算法

为了增强水印的安全性,采用混沌理论对水印信息进行加密,在无法获知加密密钥的情况下,水印信息不能被完全获取。基于时域能量特点自适应选取嵌入帧,针对音频信号倒谱变换后倒谱系数的特征,利用统计均值调制的方法进行嵌入,提高了水印的不可感知性。并引入了多重水印的思想,在抵抗多重水印攻击的情况下,也给数字音频版权保护带来帮助。实验证明,该算法在随机剪切、抖动攻击等同步攻击下具有良好的鲁棒性。     

岩体水力劈裂非稳定渗流影响机制初探

水力劈裂是石油开采、土石坝安全控制、原位地应力测试、隧洞突涌水防治等中的常见突出问题.首先,构建一维非稳定渗流模型,推导其解析解,并将水力劈裂关键因素水压力、水力梯度随时间的变化规律与有限元模拟结果进行对比,从而证明该理论解的正确性.其次,非稳定渗流结果与稳定渗流对比表明,在非稳定渗流状态下水压突增时刻,靠进水口处水力梯度最大,而趋于稳定状态时,水力梯度逐渐减小并最终达到稳定.同时,渗透性越小,高水力梯度作用时间越长,岩体发生水力劈裂的危险性越大.因此,采用非稳定渗流研究岩体水力劈裂作用机制是十分必要的.