北京数字出版信息中心结构设计

北京数字出版信息中心的结构特点为层层缩进,内设庭院,采用了斜框架,外挑尺寸大。工程结构采用了框架-剪力墙体系。在结构设计中,对框架的总剪力按照UBC规范进行了调整,放大了斜框架柱的内力,根据调整结果进行结构配筋。结构的整体计算分析表明,变形和承载力都满足要求,说明结构设计合理。     

深圳地铁一期工程竹子林站基坑钢支撑施工

深圳地铁一期工程12A标段竹子林站位于深圳市福田区。本工程中的支撑系统位于车站西端SK12+988 4～SK13+066 4范围内钻孔桩围护区段,支撑系统施工内容包括钢管支撑、钢腰梁、中间支承格构柱及纵向连系梁的定位、制作、拼装及吊装过程。1　中间支撑柱及连系梁施工本工程支撑体系中支撑柱Z1共11根,柱长11 15m,埋入基坑底面下2900mm;支撑柱Z2共4根,柱长8 09m,埋入基底下1950mm。中间支承柱施工过程为:钻孔→中间柱下放→灌注基础混凝土→抽泥浆→灌砂。桩顶以上土方施工完成后,钻孔桩围护施工期间同时进行中间支承柱的施工,放出支承柱位…     

标准引领推动建造水平升级——《装配式混凝土结构住宅主要构件尺寸指南》解读

一、编制背景近年来,我国装配式建筑在市场和政策双重驱动下发展迅速,相关技术体系和标准体系逐步完善,正在快速有序地发展。同时,各地在推进装配式建筑发展过程中标准化程度不高等问题比较突出,大量装配式建筑项目对标准化构件的应用比例较低,各类构件通用性和互换性较差,造成了后续制作、施工、运营维护过程中成本增加与资源浪费。     

狂犬病病毒糖蛋白基因重组慢病毒载体的构建及鉴定

目的构建狂犬病病毒SRV9株糖蛋白基因重组慢病毒表达载体,并进行鉴定。方法将狂犬病病毒SRV9株糖蛋白基因克隆至慢病毒载体pLVX-ZsGreen-IRES上,筛选阳性重组克隆。将质粒pLVX-ZsGreen-IRES-SRV9G、包膜质粒pMD2.G和包装质粒psPAX2共转染293T包装细胞系,通过荧光显微镜观察报告基因表达情况。收集上清,经浓缩后接种293T细胞,进行重组慢病毒感染细胞的鉴定;用限制性内切酶切除质粒pLVX-ZsGreen-IRES-SRV9G绿色荧光蛋白基因,采用直接免疫荧光试验检测狂犬病病毒糖蛋白的表达情况。结果重组慢病毒表达载体经酶切和测序证明构建正确。荧光显微镜下可见重组慢病毒感染的293T细胞有大量绿色荧光出现,病毒滴度为3×107 IU/ml;直接免疫荧光检测表明,糖蛋白基因在293T细胞内获得有效表达。结论成功构建了狂犬病病毒SRV9株糖蛋白基因重组慢病毒载体,为狂犬病基因工程疫苗的研制奠定了基础。     

板材企业消防安全现状分析及对策研究

随着国民经济的发展,以及市场对产品的需求,板材企业在很多省市成为当地的支柱产业之一,为当地经济建设的发展贡献了重要的力量,同时解决了大量的就业。然而与此同时,很多板材企业由于急于发展经济,项目上马快,最终导致忽视消防安全,在企业生产中形成较多火灾隐患,甚至是酿成重特大火灾事故的现象也随之出现。文章就某市板材企业的消防安全现状进行了调查分析,并有针对性地提出消防监管工作措施,为今后板材企业的消防安全管理提供一定程度的参考和借鉴。     

重组杆状病毒高效表达猪圆环病毒2型Cap蛋白及其免疫特性分析

目的利用重组杆状病毒高效表达猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)Cap蛋白,并分析该蛋白的免疫特性。方法将PCV2 Cap基因克隆至转移载体pFastBacⅠ,转化感受态E.coli DH10Bac细胞,获得重组杆粒r Bacmid-Cap,转染Sf9细胞,SDS-PAGE和Western blot法检测重组杆状病毒,并于High Five(H5)细胞中进行高效表达。将小鼠随机分为PBS对照组、杆状病毒组、重组杆状病毒组及疫苗对照组,均经小鼠肌内注射,100μL/只,分别于第0和14天进行免疫,于首免后第21、28、35及42天经小鼠眼眶静脉丛采血,分离血清,ELISA法进行检测。结果 PCR和测序分析结果表明,重组转移质粒和重组杆粒构建正确。重组PCV2 Cap蛋白的相对分子质量约28 000,可与抗His标签单克隆抗体及抗PCV2 Cap多克隆抗体发生特异性结合。重组杆状病毒按MOI=5及1感染H5细胞约72 h,PCV2 Cap蛋白表达量最高,表达产量约150μg/mL。首免后第21、28、35及42天,重组杆状病毒组小鼠血清抗体水平明显高于PBS对照组及杆状病毒组(P 0. 001);首免后第21、28、35天,重组杆状病毒组小鼠血清抗体水平明显高于疫苗对照组(P 0. 05),首免后第42天,两组差异无统计学意义(P 0. 05)。结论成功利用杆状病毒表达系统高效表达了PCV2 Cap,重组蛋白可诱导小鼠产生较高水平抗体,本研究为PCV疫苗的研制奠定了基础。     

汉坦病毒SEO型S基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

目的构建汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体。方法应用RT-PCR方法扩增汉坦病毒SEO型的YZG-Changchun株S基因,克隆至pMD18-T载体中,经酶切鉴定及PCR分析后,定向克隆入原核表达载体pET-28a中,转化E.coliRosetta,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析外源蛋白的表达情况。结果表达载体经双酶切和测序证明构建正确。IPTG浓度为1.0 mmol/L,诱导4.5 h时,S基因在原核细胞中得到了高效表达,表达的蛋白占菌体蛋白总量的37%,纯化后的蛋白具有良好的抗原活性。结论已成功构建了汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体,并得到高效表达。     

犬细小病毒VP2蛋白重组人5型腺病毒的构建

目的构建犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)VP2蛋白重组人5型腺病毒。方法将从CPV中PCR扩增的VP2基因克隆至穿梭质粒pacAd5 CMVK-NpA中,经酶切及测序鉴定,将构建正确的重组穿梭质粒pacAd5-cVP2与骨架质粒pacAd5 9.2-100经PacⅠ酶切线性化,共转染293AD细胞,进行同源重组,包装出重组腺病毒rAd5v-cVP2,按Karber法计算重组腺病毒的病毒滴度(TCID50)。电镜下观察重组腺病毒的形态;RT-PCR及Western blot法检测CPV VP2基因mRNA的转录及蛋白的表达水平。结果重组穿梭质粒pacAd5-cVP2经酶切及测序证明构建正确;包装出的重组腺病毒rAd5v-cVP2的病毒滴度可稳定在108.25TCID50/ml;电镜下观察可见典型的腺病毒外型特征;重组腺病毒感染的293AD细胞可检测到VP2基因的转录和表达。结论已成功构建了CPV VP2蛋白重组人5型腺病毒。     

东营会展中心结构设计中的关键技术

东营会展中心展馆结构采用管桁架+塔架拉索结构体系,上覆PTFE膜材;由于建筑功能要求不设缝,展馆钢屋盖长度达360m,层2钢筋混凝土结构长度达189m,属严重超长结构;会议中心采用车辐式索桁架结构,钢索的张拉工艺采用位移控制法。对上述设计中的关键技术进行了介绍,供类似工程参考。     

钢结构住宅的技术体系与发展趋势

改革开放以来,钢结构建筑推广步伐加快,尤其在公共建筑领域的应用"风生水起".除了厂房、多层房屋领域,还扩展至超高层建筑、大跨度会展中心、体育场馆、大型交通建筑等,目前在建和已建成的200m以上钢结构超高层已达千余座,钢结构正向着更高、更广、更轻的方向发展.