什么是蛋白质计量

正蛋白质是由氨基酸脱水缩合而成的生物大分子,是生命的物质基础,是生命活动的主要承担者,没有蛋白质就没有生命。早在1878年,恩格斯就指出"生命是蛋白体的存在形式",突显蛋白质在生命活动中的重要性。究竟什么是蛋白质计量呢?它是指以蛋白质测量理论、测量标准与测量技术为主体,实现蛋白质的特性量值与标称特性在国家和国     

液相色谱-质谱联用测定蛋粉中胆固醇含量

建立了液相色谱-大气压化学电离-同位素稀释质谱法测定蛋粉中的胆固醇含量的方法。本方法采用选择离子模式检测,用括弧法对蛋粉胆固醇进行定量计算。通过胆固醇一级标准物质保证测量过程的溯源性,通过采用添加胆固醇同位素标记物作为内标减少了样品前处理过程和液相色谱-质谱测定时物质响应所产生的误差,提高了测量结果的准确性。本方法具有较高的测量准确度和精密度,可作为复杂基体胆固醇测定的高准确度测定方法。     

C-反应蛋白纯品的同位素稀释质谱法测定与国际比对

建立了C-反应蛋白的液相色谱-同位素稀释串联质谱检测方法。作为C-反应蛋白纯品标准物质的潜在定值方法,选取同位素标记亮氨酸和缬氨酸为内标,重量法与待测样品准确混合。利用Zorbax SB-Aq色谱柱分离,电喷雾三重四极杆串联质谱多反应监测模式(MRM)测定。对样品的测定不确定度进行计算与分析,测得结果为（41.5±0.9） mmol/kg。利用该方法参加了基于中、日、韩三国计量院合作框架下的国际比对,并取得了比对结果的等效一致。     

液相色谱-同位素稀释质谱法准确测定血清中肌酸酐含量

利用液相色谱-同位素稀释质谱法准确测定血清中的肌酸酐含量。该方法特异性高、重复性好，可实现肌酸酐与肌酸的完全分离。利用该方法参加国际物质量咨询委员会(CCQM)2005年组织的关键比对CCQM-K12.1，测定血清中肌酸酐含量的准确定值。实验结果与其他各国一致，验证并提高了我国血清中肌酸酐含量准确定值的化学计量能力，为建立相应权威性方法及其参考系统提供了技术支持。     

蛋白质纯化分析仪校准方法及其不确定度评定

本文研究建立了一种蛋白质纯化分析仪的校准方法,确定了蛋白质纯化分析仪的主要计量特性包括泵系统的流量设定值误差SS、流量稳定性极差SR、紫外－可见检测器的基线噪声和基线漂移、仪器整机性能的定性、定量测量重复性、pH和电导测定重复性等。介绍了采用人生长激素溶液标准物质、氯化钾电导率标准溶液和pH标准溶液对仪器主要计量特性指标进行校准的过程,并对流量设定值误差的不确定度评定进行了讨论。本研究工作有助于保证蛋白质纯化分析仪测定结果的准确性和溯源性,并为蛋白质纯化分析仪校准规范的制定奠定基础。     

化学发光分析仪计量校准用生物化学反应标准体系研究

化学发光分析仪检测的是微弱光信号,传统的物理标准光源光强度往往超出其检测范围,难以用于计量校准。为此,该文建立并优化两种生物化学模拟发光标准体系。将8-羟基喹啉(8-Ox)引入鲁米诺-过氧化氢-金属离子体系中,实现发光方式由闪光型到辉光型的转变,在100 s内发光值的相对标准偏差仅为1.1%;由此建立发光强度稳定的化学发光标准体系,利用此体系考察化学发光分析仪的重复性、交叉污染、线性相关系数。利用三磷酸腺苷(ATP)-荧光素-荧光素酶反应,建立生物发光标准体系,考察化学发光分析仪检测灵敏度。为化学发光分析仪日常的校准工作以及国家计量校准规范的制订提供实验基础。     

高效凝胶排阻色谱法测定大豆多肽相对分子质量分布及不确定度评估

采用高效凝胶排阻色谱法测定大豆多肽保健品的肽相对分子质量分布.通过优化标准物质的选择和流动相组成比例等测定条件,考察方法的日内和日间精密度.以相对分子质量标准物质制作标准曲线,对大豆多肽中100～1000分子量范围的多肽分布进行了测定,测定结果的扩展不确定度为9.2,测量结果可表示为(63.3±9.2)%.     

α-淀粉酶活性测定方法研究及测量结果不确定度评估

以2-氯-对硝基苯麦芽三糖苷为底物,采用初始速率法测定了α-淀粉酶的活性.通过实验考察了底物浓度、酶浓度、pH、温度、离子强度等对酶活性测定的影响.同时测定了α-淀粉酶的米氏常数,并对酶活性测定结果的不确定度进行了评估,酶活性测定的不确定度来源为酶反应过程、底物浓度测定、酶加入体积和温度的测定.     

荧光淬灭测定蛋白质含量方法的建立及反应机理研究

<正>蛋白质含量通常采用氨基酸分析法、凯氏定氮法、比色法、紫外分光光度法等进行测定。蛋白质含量的荧光分析法是近年来发展起来的蛋白质含量分析方法,具有灵敏度高、线性范围宽等特点。采用荧光法测定蛋白质含量     

人转铁蛋白含量同位素稀释质谱测定方法研究

建立一种人转铁蛋白(hTRF)纯品含量同位素稀释质谱测定方法.人转铁蛋白经酸水解后,以水(含0.8mmoI/L全氟庚酸和0.1％三氟乙酸)和乙腈为流动相,以氨基酸国家标准物质为标准,同位素标记氨基酸为内标,采用高效液相色谱-同位素稀释联用法对水解液中的脯氨酸、缬氨酸和苯丙氨酸进行测定,并进一步计算得出蛋白纯品的含量.同时采用质量平衡法测定人转铁蛋白的含量,验证所建方法的可行性.在优化的条件下,人转铁蛋白含量测定结果为0.830 g/g,相对标准偏差为0.6％,扩展不确定度为0.014 g/g(k=2),检出限和定量限分别为3.78×10-5 g/g和1.26×10-4 g/g.所建方法准确度高、溯源清晰,可作为人转铁蛋白纯品标准物质的定值方法,对于建立我国人转铁蛋白测定结果的量值溯源传递体系具有积极的意义.