川芎嗪对雪旺细胞神经生长因子合成与分泌的影响

目的观察川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TMP)对雪旺细胞(Schwann cells,SCs)合成与分泌神经生长因子(Nervegrowth factor,NGF)的影响,探讨其促进周围神经损伤修复的可能机制。方法采用DMSO溶解TMP,将SCs分为正常对照、溶媒对照组和不同浓度TMP组(终浓度分为25、50、100和200μg/ml),作用24 h后,通过MTT法和流式细胞术分析TMP对SCs增殖和凋亡的影响,Real-Time PCR与ELISA法分别检测TMP在mRNA和蛋白质水平对SCs合成与分泌NGF的影响。结果 TMP对SCs的增殖活力及凋亡均无影响。溶媒对照组、25、50μg/ml TMP组NGF基因mRNA水平和细胞培养上清中NGF含量与正常对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05);100、200μg/ml TMP组与正常对照组相比明显增高(P<0.05),两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TMP可促进SCs合成与分泌NGF,且该作用具有浓度依赖性,这可能是其促进神经损伤修复的机制之一。     

分化抑制因子id1在骨肉瘤中的表达与肺转移、两年生存率的关系

目的：检测分化抑制因子id1在人骨肉瘤组织中的表达情况,并分析与患者临床特点、肺转移及两年生存率的关系。方法：运用免疫组织化学法检测39例人骨肉瘤,20例骨软骨瘤组织中id1的表达情况,结合临床资料和随访结果进行统计分析。结果：骨肉瘤组织中id1的表达明显高于骨软骨瘤,差异具有统计学意义（P〈0,05）,其表达水平与患者Enneking临床分级有关,与患者年龄、性别无关。id1表达阳性的患者肺转移发生率高于阴性患者,两年生存率低于阴性患者。结论：id1在人骨肉瘤组织中高度表达,并与患者肺转移,两年生存率密切相关,可能作为骨肉瘤生物治疗的新靶点。     

聚己内酯载药微球的制备及释药性能研究

首次以利福喷丁为模型药物、聚己内酯为载体材料,制备了用于长效抑制骨结核生长的利福喷丁聚己内酯缓释微球,观察其理化特性和体外释放性能。采用O/W乳化溶剂挥发法制备载利福喷丁聚己内酯微球,系统考察了投药量、聚乙烯醇的浓度、乳化速度对微球形貌、粒径、载药量和包封率的影响。通过对制备工艺的优化,得到最佳制备条件是乳化速度300r·min-1,投药量20mg,聚乙烯醇的浓度2%。所制备的载利福喷丁聚己内酯微球圆整,表面有微孔,大小分布均匀,粒径分布较窄,平均粒径为(27.249±0.256)μm、载药量(3.098±0.011)%、包封率(34.078±0.123)%。实验结果表明:聚己内酯是负载利福喷丁的一种理想控释材料。     

复合骨修复材料——聚氨基酸/硫酸钙的生物相容性研究

采用原位熔融缩聚法合成聚氨基酸/硫酸钙(poly(amino acids)/calcium sulfate,PAA/CS)复合材料.分别将PAA/CS圆片和其浸提液与L929细胞共培养后观察细胞形态变化,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性,流式细胞仪测定细胞周期.将致密圆柱状PAA/CS材料植入兔胫骨近端干骺端,进行...     

纳米羟基磷灰石/聚酰胺复合材料的人工肱骨头体内成骨中BMP-2及其基因表达研究

目的：对新型纳米晶骨修复和前建复合材料（n-HA／PA66）人工肱骨头的成骨能力及将其作为人工关节替代品的可行性进行评价。方法：新西兰大白兔20只，行双侧肱骨头切除，以nHA／PA人工肱骨头进行双侧肱骨头置换术。术后1、2、3、4、6、12、24周处死周分别处死动物。对假体与受体骨界面先行大体观察，然后分别用甲基丙烯酸甲酯（PMMA）制作硬组织片，甲苯胺兰染色和Masson染色后，对n-HA／PA人工肱骨头与受体骨界面进行BMP-2免疫组织化学检测和原位杂交BMP-2基因表达检测。结果：人工肱骨头在动物体内成骨的BMP-2及其基因表达研究显示，假体植入第3周，免疫组织化学染色显示BMP-2即有弱阳性表达，至6，12周为强阳性；第24周，BMP表达阳性率及阳性程度均有所降低。此外，原位杂交观察假体植入第1、2周，成骨细胞中BMP-2 mRNA表达呈弱阳性，第3周成骨细胞中BMP-2 mRNA表达呈强阳性，而在第4周，成骨细胞中表达阳性率和阳性程度均有所下降。研究显示人工肱骨头体内成骨的BMP-2及其基因表达高峰时间较文献报道的骨折模型晚。结论：n-HA／PA66人工肱骨头具有良好的成骨能力，作为新型人工关节材料为可与受体骨发生生物键合。     

聚氨酯/纳米羟基磷灰石/聚酰胺66股骨髁修复犬骨软骨缺损的实验研究

制备了PU/n-HA/PA66股骨髁,用扫描电镜观察材料表面情况并测定其孔隙率;将PU/n-HA/PA66股骨髁与自体髁植入犬股骨远端,以替代、修复骨软骨缺损,进行大体观察、组织学、免疫组化、CT、血常规和生化检测以及肝、肾、脾组织学检测。结果表明材料孔隙率为80.89%±5.01%,孔径主要分布在300～800μm之间。术后实验动物活动正常,切口愈合良好,两组髁假体均与自体骨结合紧密,PU/n-HA/PA66股骨髁网孔中的骨小梁逐渐增多成熟,材料孔穴中的新生骨Ⅰ型胶原阳性表达。术后动物碱性磷酸酶水平升高[(62.67±24.04)U/L],肝、脾、肾HE染色未见异常。PU/n-HA/PA66股骨髁具有良好的骨修复、软骨替代能力和生物相容性,具有应用前景。     

三维CT重建下的国人腕舟骨测量

目的：为新型生物材料腕舟骨假体的设计和置入提供理论数据。方法：健康成年男女各50例在CT下进行双侧腕关节扫描;获取腕关节DICOM格式文件,利用MIMICS软件重建腕舟骨,并根据腕舟骨假体的设计要求进行测量。结果：舟骨最大长度（26.16±2.72）mm、舟骨体部最大宽度（13.99±1.72）mm、舟骨体部最小高度（7.52±0.53）mm、舟骨结节宽度（13.37±1.68）mm、舟骨结节高度（8.82±0.93）mm、桡舟关节面角度（151.86±6.36）度、舟骨背侧最大角度（133.12±5.85）度、头舟关节面纵向最大角度（138.00±5.05）度、头舟关节面横向最大角度（170.27±5.09）度、背侧近远长度比值（1.15±0.091）。结论：腕舟骨的相关参数均是设计新型生物材料假体和置入的关键指标,可以根据这些数据进行适合国人假体的设计。     

内源性糖皮质激素在酒精性股骨头缺血坏死骨细胞凋亡中的作用

探讨内源性糖皮质激素在酒精性股骨头缺血性坏死骨细胞凋亡中的作用.选用90只家免,随机分为3组.采用给予灌胃法实验组家兔含乙醇50%的烈性白酒8ml/kg·d,药物干预组等量白酒加氨鲁米特25mg/kg·d,对照组等量生理盐水,1～6个月.化学发光法测定血清皮质醇含量,原位杂交检测GCRmRNA表达,TUNEL法检测骨细胞凋亡.结果表明,家免血清中皮质醇变化为:实验组(5.49±1.38)μg/dL>干预组(2.15±0.49)μg/dL>对照组(0.73±0.24)μg/dL,3组之间差异均有显著性(P<0.01).实验组股骨头骨细胞2个月时GCRmRNA弱表达,3个月弱表达或不表达,6个月时不表达;干预组1～3个月时中等表达,6个月时GCRmRNA弱表达;时照组为中等表达.实验组出现大量骨细胞凋亡,以软骨下区最为明显,2个月时实验骨组细胞凋亡数为(107.6±25.87)×10-3,明显高于干预组(60.83±25.34)×10-3和对照组(46.23±23.00)×10-3(P<0.05,P<0.01),但干预组与对照组之间差异无显著性.随着时间推移,凋亡细胞逐渐增多,3、6个月时实验组分别为(195.53±15.72)×10-3和(392.56±26.39)×10-3、干预组分别为(99.20±20.64)×10-3和(144.70±27.63)×10-3、对照组分别为(41.56±22.85)×10-3和(44.09±24.26)×10-3,3组间差异均有显著性(P<0.05,P<0.01).结果表明,饮酒后可明显增加内源性糖皮质激素的释放,在酒精性ANFH骨细胞凋亡的过程中起重要作用.     

纳米羟基磷灰石/聚氨基酸复合材料体外成骨样细胞相容性评价

为评价自制纳米羟基磷灰石/聚氨基酸(n-HA/PAA)复合材料体外细胞相容性,采用MG63成骨样细胞与材料共同培养,以n-HA为对照进行以下实验:①细胞形态学观察;②细胞吸光度值的MTT检测;③细胞碱性磷酸酶(ALP)活力检测;④细胞骨钙素(OCN)含量的酶联免疫法(ELISA)检测;⑤流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果表明,n-HA/PAA复合材料对MG63细胞形态无明显影响,材料周围及表面细胞贴壁生长良好,并随时间的延长细胞逐渐增多。MTT检测细胞吸光度值随培养时间的延长而逐渐增加,且细胞增殖明显,实验组与对照组间各时间点比较无明显差异(P>0.05)。细胞ALP活力及OCN含量随培养时间的延长逐渐增加,实验组与对照组比较无明显差异(P>0.05)。两组材料对细胞的生长周期及凋亡均无明显影响,且两组细胞周期及凋亡细胞各自比较无明显差异(P>0.05)。     

载异烟肼聚己内酯微球的制备及其性质研究

采用O/O溶剂挥发法制备载异烟肼聚己内酯微球。系统考察了活性剂浓度、内外油相体积、投药量对微球粒径、载药量和包封率的影响。结合内外油相初始粘度分析载药微球成球性,用IR、XRD、SEM对微球化学结构、结晶状态和表面形貌进行表征。通过优化得到平均粒径为28.73μm、载药量为2.36%、包封率为49.58%、外观圆整、表面多孔的载药微球。与O/W溶剂挥发法制备微球对比表明,O/O法有效地提高了载异烟肼聚己内酯微球载药量与包封率,是包覆亲水性小分子药物的可行方法,该载药微球可望用于骨和关节结核病的缓释治疗。