快速灵敏的LC-MS/MS法测定人血浆中阿莫西林并应用于两种制剂的一致性评价

目的: 建立快速灵敏的LC-MS/MS法测定人血浆中阿莫西林浓度，并用于两种阿莫西林胶囊的一致性评价。方法: 采用岛津公司LCMS-8060型LC-MS/MS仪，以MRM模式测定阿莫西林（m/z 366.00/114.00）的浓度，d4-阿莫西林作内标（m/z 370.10/114.05），离子源为ESI源。色谱柱选用Waters ACQUITY BEH C18（2.1×50 mm，1.7 μm），梯度洗脱。血浆样本加入内标，经甲醇沉淀蛋白后取上清液进样检测。结果: 所建方法经验证，其线性、准确度、精密度、最低定量限、提取回收率、特异性、基质效应、稳定性等各项指标均符合CFDA的指导原则及最新核查标准要求，并较文献报道中的方法有处理简单、灵敏度高、色谱峰形好的优点。结论: 所建方法快速、灵敏，适用于人血浆中阿莫西林浓度的检测。用于一致性评价的样本实测，两种制剂生物等效。     

酶标板法检测甘油三酯净含量方法的优化、验证及其在人血白蛋白层析纯化工艺中的应用

目的优化酶标板法检测甘油三酯(triglyceride,TG)净含量的方法,进行验证,并将其应用于监测人血白蛋白层析纯化工艺中样品的脂类含量,对工艺优化提供指导。方法建立酶标板上快速检测TG含量方法,通过两步酶反应的吸光度值的差值计算TG净含量。确立该方法的标准曲线范围,并进行准确度和精密度进行验证。采用该方法监测层析工艺中样品的TG净含量,优化人血白蛋白层析纯化工艺。结果该方法检测TG的线性范围在78~2 500μg/ml之间,游离甘油(free glycerin,FG)的线性范围在8.13~260μg/ml之间,R2均为0.997。各样品检测结果 CV均4%,回收率在102%~107%之间,准确度较好;同一样品由同一个实验员在同一试验中连续测定6次和由不同的实验员在不同日期内分别测定3次的结果,CV均3%,精密度较好。在人血白蛋白层析纯化工艺中采用去脂剂可将白蛋白样品中的残余脂类去除。结论优化后的甘油三酯净含量检测方法为人血白蛋白层析纯化工艺的优化提供了指导,在血液制品工艺研发过程中具有重要的应用价值。     

三维荧光光谱结合交替三线性分解方法同时测定人血浆样中姜黄素和双去甲氧基姜黄素含量

利用激发发射三维荧光光谱结合交替三线性分解(ATLD)二阶校正方法,克服了姜黄素(CUR)和双去甲氧基姜黄素(DME)荧光光谱重叠以及未知背景物荧光干扰问题,实现了两者在人血浆样本中的直接快速定量研究。实验结果表明CUR的平均加标回收率为105.3±0.9%,定量检测限为2.20 ng/m L;DME的平均加标回收率为106.5±1.6%,定量检测限为0.164 ng/m L。     

2014年供血浆人群及血液制品戊型肝炎病毒感染情况分析

目的分析2014年供血浆人群及血液制品的戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)HEV感染情况。方法采用ELISA法对不同省份(四川省、山东省、山西省)供血浆人群血浆样品进行HEV Ag、HEV Ig M和HEV Ig G的检测,并对HEV Ag阳性供血浆者作追踪分析;对合并血浆及血液制品成品进行HEV Ag检测。结果 36 340份供血浆者样品中有HEV Ag阳性26份(0.07%);3 780份血浆样品中有HEV Ig G阳性1 519份(40.19%),HEV Ig M阳性34份(0.90%)。115批合并血浆样品及113批血液制品成品中的HEV Ag检测结果均为阴性。结论调查的供血浆人群HEV阳性率存在地区差异,血液制品的安全性较高。     

一种HBV/HCV/HIV多重PCR血筛试剂的性能评价

目的评价Cobas Taq Screen MPX Test version 2.0试剂(以下简称MPX V2.0)在cobas s 201核酸血液筛查系统上检测原料血浆HBV DNA、HCV RNA及HIV RNA的性能。方法利用国际标准品,对试剂的灵敏度、特异性、耐受性、不同基因型检测能力、重复性、抗交叉污染能力及其对阳性混合样本的拆分检测能力进行验证,并对15 273份原料血浆进行检测,统计检测结果无效率,综合评价该试剂的性能。结果该试剂检测HBV、HCV及HIV-1的灵敏度分别为2.44、8.07和47.21 IU/ml;特异性均为100%;HBV A~G 7种基因型均能在3倍灵敏度被检出,HCV及HIV-1各基因型均能被检出;HBV、HCV及HIV-1 3倍灵敏度样品和阴性样品用不同批号的试剂,在不同时间均能准确检测;低浓度HBV、HCV及HIV-1样品检测Ct值的变异系数分别为3.61%、1.80%和2.39%;抗交叉污染试验中无交叉污染发生;阳性混合样本(96混)能被准确拆分;15 273份原料血浆HBV DNA阳性检出率为0.33‰(5/15 273),未检出HCV和HIV阳性样品;检测批无效率和样品最终结果无效率分别为2.56%和0.66%。结论MPX V2.0试剂灵敏度高,能检测国内流行基因型,具有良好的特异性、耐受性、重复性和抗交叉污染能力,满足《欧洲药典》和FDA对HBV、HCV和HIV核酸检测的要求,适用于原料血浆的核酸筛查。     

人血浆中盐酸沙格雷酯的UPLC-MS/MS测定及药代动力学研究

建立一种快速、准确测定人血浆中盐酸沙格雷酯的UPLC-MS/MS分析方法。以阿立哌唑为内标,0.2 m L含药血浆经乙腈沉淀蛋白后进样分析;流动相组成为乙腈:0.01 mol/L甲酸铵水溶液=30∶70,梯度洗脱方式,乙腈比例在2 min内从30%变为65%,流量0.3 m L/min,柱温为35℃,进样量3μL。质谱条件:气动辅助电喷雾离子化(ESI)源;正离子检测(MRM)模式,盐酸沙格雷酯质荷比为(m/z 430.1→m/z 135.1)和内标阿立哌唑质荷比为(m/z 448.1→m/z285.1)。结果表明:盐酸沙格雷酯在10.0~1 280.0 ng/m L范围内呈线性,定量限为10.0 ng/m L,基质效应影响小,日内、日间变异系数均小于13.3%,相对回收率在92.0%~118.2%之间。该方法准确、快速、灵敏,可用于微量血浆的盐酸沙格雷酯血药浓度测定、人体内药代动力学及生物等效性研究。     

复合布托啡诺时丙泊酚抑制宫腔镜手术患者体动的半数有效血浆靶浓度

目的：确定复合布托啡诺时丙泊酚抑制宫腔镜手术患者体动的半数有效血浆靶浓度（Cp50）。方法：选择21例拟行宫腔镜手术患者，年龄20～55岁，ASA Ⅰ或Ⅱ级。麻醉采用非插管静脉麻醉，麻醉诱导采用靶控输注丙泊酚，当血浆靶浓度和效应室靶浓度达平衡时方可宫腔镜手术操作，手术操作前5 min静脉缓慢注射酒石酸布托啡诺20 μg/kg。监测麻醉不同时点的麻醉深度及不良反应。采用序贯法确定丙泊酚血浆靶浓度（Cp），第1例患者丙泊酚血浆Cp设为2.5 μg/mL，手术中发生体动时为阳性，下一例采用高一级浓度，否则采用低一级浓度，浓度的比值为1∶1，根据结果将患者分为阳性和阴性组。用序贯法公式计算复合布托啡诺时丙泊酚抑制宫腔镜手术患者体动的Cp50及其95%CI。结果：复合布托啡诺时丙泊酚抑制宫腔镜手术患者体动的Cp50及其95%CI为2.23（2.12～2.34）μg/mL。所有患者均未发生严重不良反应。结论：复合20 μg/kg布托啡诺时丙泊酚抑制宫腔镜手术患者体动的Cp50为2.23 μg/mL，为宫腔镜手术麻醉安全用药提供参考。     

高脂血症性胰腺炎患者不同血液净化方式的疗效观察

目的研究高脂血症性胰腺炎患者中采用不同血液净化方式治疗后的临床效果。方法将我院收治的30例高脂性胰腺炎病例筛选分析,按治疗过程中所采用的血液净化方式,分为血液灌流(HP)联用连续性静脉-静脉血液滤过组(CVVH)和二重血浆置换术组,探讨两组治疗前后血脂及c反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)变化情况。结果治疗后所有患者的血清甘油三酯、胆固醇、CRP、IL-6、TNF-α均降低(均P<0.05)。治疗开始后第24小时CVVH组中CRP、TNF-α、IL-6低于二重血浆置换术组,而CVVH组中甘油三酯低于二重血浆置换术组。结论血液灌流联用连续性静脉-静脉血液滤过治疗高脂血症性胰腺炎有较好的效果,能更有效降低甘油三酯及炎性因子。     

2型糖尿病患者血浆致动脉粥样硬化指数相关危险因素研究

目的:探讨2型糖尿病患者血浆致动脉粥样硬化指数(AIP)与其他致动脉粥样硬化(AS)危险因素的相关性。方法:152例2型糖尿病患者以AIP值0.06为切点,分为非致动脉硬化表型组(N组65例:AIP<0.06)和致动脉硬化表型组(A组87例:AIP≥0.06),比较两组间的临床生化指标。结果:A组体重指数(BMI)、腰臀比、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素分泌指数(HOMA-β)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)、血尿酸均高于N组(P<0.05或P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于N组(P<0.01),且冠心病发病率较高(P<0.05)。相关分析表明,AIP与BMI、腰臀比、收缩压、舒张压、HOMA-IR、HOMA-β、TC、TG、LDL-C、VLDL-C、血尿酸呈正相关(P<0.05),与HDL-C负相关(P<0.01)。Logistic Regression分析结果显示,HDL-C、LDL-C、VLDL-C、TG是AIP的独立影响因素(P<0.01)。结论:2型糖尿病患者中,能间接反应LDL-C颗粒大小的指标AIP与肥胖和胰岛素抵抗、高胰岛素血症、HDL-C、VLDL-C、TG、血尿酸等其他致AS危险因素密切相关,控制这些危险因素有利于降低AIP,从而减缓AS的发生和发展。