中子和γ射线照射对小鼠骨髓造血细胞死亡方式的探讨

为探讨中子和γ射线照射后小鼠骨髓造血细胞的死亡方式及其意义,采用不同剂量中子和60Co γ射线全身照射350只BALB/c小鼠,通过光镜、电镜、流式细胞术、原位末端标记和DNA凝胶电泳等观察造血细胞凋亡与坏死情况.研究发现,中子照射后小鼠骨髓中坏死和凋亡的造血细胞均明显增多,5.5Gy组以坏死为主,而γ射线照射后则以凋亡为主,且呈剂量相关性.凋亡的细胞表现为核染色质浓缩、边移,呈半月型、环状或不规则状,凋亡小体形成,电泳下见DNA梯状图谱.坏死的细胞表现为核肿胀、溶解,线粒体膜、核膜等膜性结构破坏.2.5-5.5Gy中子及5.5-12Gyγ射线照射可使骨髓造血细胞死亡方式不同:中子照射以凋亡与坏死并存,5.5Gy组以坏死为主;而γ射线照射则以凋亡为主.     

IL-8动员造血细胞救治致死性照射小鼠的初步研究

将人重组白细胞介素－8(rhIL-8）动员的雄性小鼠外周血单个核细胞（MNCs）静脉输注给受到8．5Gy照射的同种雌性小鼠,并对存活的受体小鼠进行Y染色体PCR检测。结果表明,经rhIL－8动员的造血干／祖细胞可使受照射小鼠长期重建造血。提示rhIL－8具有快速有效的动员造血细胞的作用。     

补肾活血法治疗慢性再生障碍性贫血疗效的临床评价

目的:评价补肾活血法对慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia, CAA) 有效性和安全性。方法:CAA 患者60 例随机分为治疗组和对照组, 治疗组给予补肾活血中药, 对照组给予再障生血片, 采用原位杂交法检测治疗前后骨髓造血细胞IL-2、IL-8水平的变化, 并与正常组18 例相比较。结果:治疗组疗效高于对照组, 基本治愈率分别为66.67 %和40.00 %(P <0.05) 。治疗前CAA 患者骨髓造血细胞IL-2、IL-8 阳性指数均高于正常对照组(P <0.05);各组疗后IL-2、IL-8 阳性指数明显降低(P <0.05);治疗后治疗组IL-2、IL-8 阳性指数高于对照组(P <0.05) 。结论:补肾活血中药能够降低CAA病人骨髓造血细胞IL-2、IL-8 分泌水平, 促进骨髓造血功能恢复。     

在搅拌培养和静态培养中造血细胞亚群组成的分析

目的　分析转瓶和方瓶培养过程中造血细胞亚群组成的变化。方法　观察培养过程中脐血单个核细胞总细胞扩增倍数 ,CD34+ 细胞、CD33+ 细胞、CFU GM、CD4 1+ 细胞、CFU Mk和BFU E占总细胞的比例及其随培养时间的变化。结果　 14d的培养中 ,无论是用转瓶和方瓶 ,总细胞不断扩增 ,CD34+ 细胞含量在第 7天、CFU GM含量在第 10天、BFU E含量在第 5天达到最高 ,而后出现分化 ,转瓶和方瓶培养的CD34+ 细胞和CFU GM和BFU E含量差异无显著意义 ;CFU Mk则不同 ,其含量在转瓶培养第 7天时达到最高 ,而在方瓶第 10天达到最高 ,在转瓶中CFU Mk的含量一直低于方瓶培养 ;两种培养过程中CD33+ 细胞比例均在 5 0 %～ 70 %之间 ,而且差异无显著意义。转瓶培养中CD4 1+ 细胞含量到后期出现下降 ,而方瓶中则一直增加。结论　与静态培养环境相比 ,搅拌环境对干 祖细胞分化速度、粒 巨噬系祖细胞和红系祖细胞的分化没有明显影响 ,但不利于巨核系祖细胞的扩增 ,促进了其分化     

多种分离方法分离脐血造血细胞效率的比较

目的:比较多种分离方法分离脐血造血细胞的效率。方法:依据随机方法将133例脐血标本分为3组,A组选择HES法,B组选择Ficoll法,C组选择明胶法。所有标本均进行CD_(34+)细胞检测,同时进行造血祖细胞体外培养。结果:A组CD_(34+)细胞产率明显高于B组,C组CD_(34+)细胞产率明显高于B组,A组CD_(34+)细胞产率明显C组,组间两两比较差异有统计学意义(P0.05);A组CFCs产率明显高于B组,C组CFCs产率明显高于B组,A组CFCs产率明显C组,组间两两比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:在分离脐血造血细胞过程中,HES法的分离效率高于HES法、明胶法。     

源于驴血清白蛋白的肽促进骨髓造血细胞增殖的试验研究

目的:探讨源于驴血清白蛋白的生物活性肽LH-6对骨髓造血细胞的体内外促增殖作用。方法:从正常人骨髓标本中纯化骨髓有核细胞,在DMEM培养基中加入不同浓度的生物活性肽LH-6培养;用透射电镜观察增殖后的骨髓细胞超微结构;将不同浓度的生物活性肽灌胃失血性贫血小鼠模型7 d,考察其体内作用效果。结果:肽LH-6可促进骨髓造血细胞增殖,有浓度依赖性,最佳作用浓度为1μmol/L;其促进骨髓有核细胞的增殖率达70%(p0.05);用透射电镜观察增殖后的细胞超微结构,没有发生变化,体内效果显示肽LH-6对促进白细胞、红细胞和血小板增殖有一定的作用,其中促进白细胞增殖超过30%。结论:肽LH-6促进骨髓造血细胞的增殖,属于正常造血,为造血干细胞的体外扩增提供一条新途径。肽LH-6可作为潜在的补血目标新药。     

人骨髓细胞长期冻存的观察

以１０％二甲基亚砜作冷冻保护剂，用“二步”冻存法在液氮液相中冻存１７份骨髓细胞，１、５、１０年ＣＦＵ—ＧＭ回收率分别为７２．４±１２．３％、６９．７％±１０．３％和５５．５±１８．８％，计算出ＣＦＵ—ＧＭ回收率相关公式Ｙ＝０．７６２４—０．０２０９Ｘ。表明在液氮中不能无限期保存骨髓细胞活力。但用２０％ＦＭ—ＣＭ、ＰＨＡ—ＬＹＣＭ、ＰＨＡ—ＰＭＣＭ孵育冻存骨髓细胞，其ＣＦＵ—ＧＭ、ＢＦＵ—Ｅ、ＣＦＵ—ｍｉｘ集落产率明显增加，仅含ＣＦＵ—ＧＥＭｍ的集落产率不增加，此现象说明部分经冷冻保存损伤的造血细胞能在一定条件恢复其活力。     

造血细胞发育调控机制的研究进展

造血发育调控是干细胞研究领域的重要内容,涉及多个层次.它在骨髓局部发生,构成特定的造血微环境.调节因子数量众多,包括细胞因子,趋化因子,粘附因子和细胞外基质中的一些介导分子.造血细胞在调节因子趋导下分别向多个系列定向发育.HOX基因,GATA基因,C/EBP基因等基因家族在不同系列发生特异性的差异表达,这成为造血细胞发育分化的本质性变化.两条主要的细胞信号转导通路,JAK-STAT通路和MAPK通路,介导调节调节因子对造血相关基因的活性调控.上述因素的复杂组合,构成调控网络,最终造成造血细胞的发育分化.     

510.6 nm激光对脐血造血细胞的增殖作用

介绍了５１０．６ｎｍ激光对造血细胞的刺激作用,促使颗粒－巨噬细胞集落形成单位（ＧＭ－ＣＦＵｃ）增多。从人脐带血中分离制备的有核细胞中,加入集落刺激因子（ＣＳＦ）后进行体外培养,形成的ＧＭ－ＣＦＵｃ为１８．６±１２．６／１０４;如果加入的ＣＳＦ是经激光照射后的细胞制成的,其ＧＭ－ＣＦＵｃ为４０．５±２０．２／１０４;如果先用激光照射脐带血的有核细胞,在培养时加入的ＣＳＦ是未经激光照射后的细胞制成的,也有增殖效应,ＧＭ－ＣＦＵｃ为３６．５±１８．５／１０４;如果脐带血中的有核细胞和制备ＣＳＦ的细胞都用激光照射,发现ＧＭ－ＣＦＵｃ明显增多,其值为５７．４±４１．２／１０４,是未经激光处理者的三倍多