急性放射损伤小鼠血清蛋白质组分析

为寻找急性放射病早期诊断指标和新的治疗靶点，探讨辐射损伤的发病机理，采用蛋白质组学的双向电泳和蛋白质氨基酸序列分析技术研究了8Gy γ射线照射后24h小鼠血清蛋白质的变化，鉴定有差异的蛋白质，并用蛋白质印迹(Western blotting)方法进行验证。结果显示，双向电泳发现8Gy照射后24h小鼠血清有一显著变化蛋白点，分子量约为15ku，经氨基酸序列分析发现为结合珠蛋白(Haptoglobin，Hp)的α亚单位。Western blotting方法进一步验证了双向电泳的结果。结果表明，经8Gy γ射线照射后24h小鼠血清中结合珠蛋白发生显著增加，可能在辐射损伤中发挥着一定的作用，此结果为探索急性放射损伤的发病机理提供了新的线索。     

信号转导和转录激活子5信号转导途径对受辐射KG-1细胞周期的调控作用

探讨信号转导和转录激活子５（ＳＴＡＴ５）信号转导途径在受辐射ＫＧ－１细胞中对细胞周期的调控作用。通过转染ＳＴＡＴ５基因的显性负突变体（ＤＮ－ＳＴＡＴ５）阻断ＪＡＫ／ＳＴＡＴ的信号传递后,瞬间转染ｃｙｃｌｉｎＤ１基因及ｃｙｃｌｉｎＢ１基因,观察ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白及ｃｙｃｌｉｎＢ１蛋白对受辐射细胞周期阻滞的影响作用。转染ＤＮ－ＳＴＳＡＴ５基因的受辐射ＫＧ－１细胞即使用粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）刺激亦不能跳出Ｇ１期阻滞;瞬间转染ｃｙｃｌｉｎＤ１基因及ｃｙｃｌｉｎＢ１基因分别能促进受辐射细胞跳出Ｇ１期和Ｇ２期阻滞。ＧＭ－ＣＳ所激活的ＪＡＫ／ＳＴＡＴ信号转导途径通过促进周期蛋白ｃｙｃｌｉｎＤ１及ｃｙｃｌｉｎＢ１的表达而对受辐射细胞周期进行调控。     

解惑核辐射

4月21日,日本政府宣布,将东京电力受损的福岛第一核电站周围20公里范围划定为禁止进入的警戒区。4月26日,联合国在纽约总部举行乌克兰切尔诺贝利核电站事故25周年纪念活动,缅怀这起史上最严重核泄漏事故的罹难者。     

致死剂量γ射线照射小鼠淋巴结淋巴细胞凋亡动力学及其与相关蛋白表达的关系

用原位末端标记、原位杂交和碱磷酶免疫组化技术,观察致死剂量γ射线照射小鼠淋巴结淋巴细胞的凋亡动力学变化,及其与Bax、Bcl-2和Bcl-XL表达的关系。结果表明,照射后24h淋巴结淋巴细胞凋亡指数迅速升高,在6—12Gy范围内与照射剂量呈正比,≥15Gy照射后变化不明显。6Gy照射后24h,淋巴细胞凋亡达高峰,尔后开始降低;然而直至照射后6个月和12个月,凋亡指数仍明显高于对照组。6Gy照射后24h,淋巴细胞Bax蛋白表达即出现升高,当剂量为12Gy时达到峰值,15Gy和20Gy照射后未观察到这种剂量效应关系。而Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达在照射后24h明显下降。bax和bcl-2mRNA的表达显示出相似趋势。以上结果显示,≤12Gy照射后细胞凋亡是淋巴细胞的重要死亡方式。照射后Bax的上调及Bcl-XL的下调在致死剂量照射引起的淋巴细胞凋亡调控中起重要作用。     

钙结合蛋白S100A8在放射性肺纤维化早期的表达及意义

本研究结合体内外实验，探讨了钙结合蛋白S100A8在放射性肺纤维化早期的表达及意义.20Gy6oCoγ射线全胸照射大鼠,建立大鼠放射性肺纤维化模型,分别于照射后1周、2周及4周活杀后取肺,采用免疫组化方法检测S100A8蛋白水平的变化;采用RT-PCR方法检测S100A8及与其形成复合物的S100A9 mRNA水平的变化.对于体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用T-PCR方法检测该细胞受γ射线与脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)处理后S100A8 mRNA水平的变化.照射后4周,S100A8蛋白在大鼠肺部巨噬细胞胞浆增强表达,S100A8和S100A9 mRNA在大鼠肺部也增强表达.结果表明,RAW264.7细胞中,γ射线与LPS能够协同作用增强该细胞S100A8 mRNA的表达.S100A8在放射性肺纤维化早期于巨噬细胞表达增强,发挥其趋化活性,参与炎症发生，进而在放射性肺纤维化形成过程中发挥作用.     

ErbB2 RNA干扰联合60Coγ照射对U251细胞增殖及凋亡的影响

构建特异性抑制白血病病毒致癌基因同源体2(ErbB2)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,并检测联合60Coγ照射对U251细胞增殖抑制及促进凋亡作用.设计、合成ErbB2特异性的19bp短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到Psilence2.1-U6-H1载体中,构建ErbB2特异siRNA的表达载体,Hind Ⅲ和BamHI双酶切及测序鉴定重组体,并转染U251细胞,四甲基偶氮唑盐法(Methylthiazolyl tetrazolium assay,MTT)检测细胞增殖活性,Hoechst 33258染色,Annexin-Ⅴ检测细胞凋亡情况.经双酶切与测序鉴定成功构建ErbB2-siRNA表达载体,转染星型胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞增殖活性(p＜0.05),并诱导细胞产生时间依赖性凋亡,24h凋亡细胞百分比增加10.52%,48h凋亡细胞百分比增加50.65%.联合60Coγ照射U251细胞增殖活性较单独转染进一步显著降低(p＜0.05).运用Psilence2.1-U6-H1载体构建的ErbB2-siRNA表达载体可有效抑制U251细胞增殖并促进时间依赖性细胞凋亡;联合60Coγ照射可增加增殖抑制效果.     

手眼系统中刀具刀头位姿标定与视觉引导

在服务机器人的日常任务中要求机械手抓取不同的目标,且根据目标的放置位姿的不同需要从相应角度进行抓取,但机械手与手持目标的位姿关系往往难以精确和直接地测量。以刀具作为手持目标,利用eye-in-hand手眼系统抓取该目标后,在线标定手眼与手持刀具刀头的位姿关系,首先给出了摄像机调焦前后焦距标定的计算方法,再将调整焦距视为摄像机沿光轴的平移运动,通过调焦前后摄像机获取的两幅图像,标定出刀具在摄像机和机械手坐标系下的位姿,同时给出了刀具刀头到期望加工点的导向矢量计算方法。     

冷冻速度对骨髓造血细胞活力的影响

本实验采用台盼兰染色、细胞容积和CFU-S测定技术观察了不同冷冻速度对小鼠骨髓有核细胞活存率和造血干细胞活力的影响。结果表明,冷冻速度越快,造血干细胞活力丧失越多;平均冷冻速度为-1.13℃、-1.75℃和-4.22℃/分时,其CFU-S活力分别为76.3、27.7和17.0%。文中对骨髓低温保存技术和造血细胞活力测定方法进行了分析和讨论。     

G-CSF促进造血功能恢复及其机理的研究

研究了粒细胞集落生长因子（Ｇ－ＣＳＦ）受辐射小鼠造血功能恢复的作用，并对机理进行了实战探讨。结果表明：Ｇ－ＣＳＦ不仅可以促进受辐射小鼠外周血细胞的恢复，促进脾脏内源性脾结节的形成，而且可以增加骨髓细胞含量和促进骨髓细胞巨噬系造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）的形成，提高受辐射小鼠的生存率，其促进辐射后机体造血功能恢复的机理是通过刺激照射后残余造血干细胞的增殖、分化，该过程需要一段较长的时间，而不是抑制照射     

钙结合蛋白S100A8在辐射损伤小鼠骨髓细胞的表达及意义

本文研究了钙结合蛋白S100A8在辐射损伤小鼠骨髓细胞中的表达,及其与细胞周期、凋亡的关系.运用蛋白/DNA双参数流式细胞技术,比较3.5、7 Gy 60Coγ射线照射后6 h小鼠骨髓中S100A8蛋白的表达变化,及S100A8阳性(S100A8 )与s100A8阴性(S100A8-)细胞周期和凋亡的改变.正常小鼠骨髓中,S100A8 细胞主要是粒细胞;与S100A8-细胞相比,S100A8 细胞增殖不活跃.辐射损伤后早期,小鼠骨髓中S100A8 细胞数及S100A8蛋白表达量无明显改变,S100A8-细胞发生G2/M期阻滞及凋亡.而S100A8 细胞周期不改变,也不发生凋亡.结果表明,S100A8 细胞相对S100A8-细胞具有辐射抗性.