热带假丝酵母磷酸甘油酸激酶基因启动子功能鉴定

热带假丝酵母是重要的工业生产菌株,但表达系统还不完善导致代谢工程育种手段受到限制。探索新的表达元件对热带假丝酵母的基因工程育种十分重要。本文通过多重序列比对从热带假丝酵母ATCC 20336基因组中扩增得到一个具有较高活性的磷酸甘油酸激酶基因(PGK1)启动子,以酵母增强型绿色荧光蛋白(yeGFP3)作为报告基因,整合到热带假丝酵母基因组上并对其表达活性进行研究。通过分离300、550、750 bp和846 bp4个长度的启动子片段分别表达yeGFP3,转化XZX宿主菌获得P-1、P-2、P-3和P-4共4个转化子。荧光显微镜结果表明,随着启动子长度的截短,荧光逐渐减弱,前3个转化子的相对荧光强度分别为P-4的4.98%、9.84%和48.4%。同时分析了4个转化子的yeGFP3转录水平,转录水平分别为P-4的5.6%、13.8%和60%。初步判断PGK1启动子至少存在2个上游激活序列(UAS)。     

中温α-淀粉酶的酶学性质研究

通过盐析、DEAE．FF和Superdex．75，对BacillusamyloliquefaciensM23产生的α-淀粉酶进行了纯化，得到电泳纯的α-淀粉酶，纯化倍数为29．61，活力回收率为20．06％。用SDS．PAGE测得该酶的分子量为58kD。该酶的最适反应温度为55℃，最适反应pH值为6．0。纯酶液在pH7．O～10．0缓冲液中室温放置24h，可保持80％以上活力。55℃保温15rain，基本丧失活力，添加10mmol／L的Ca2＋能显著提高酶的热稳定性。Ca2＋、Mg2＋和CO2＋具有激活该酶活性的作用，EDTA抑制酶的活性。60℃，以可溶性淀粉为底物的Km，Vmax，分别为4．33g／L、1．19g／L·min。薄层层析结果表明该酶水解淀粉生成糊精和寡聚糖。     

地衣芽孢秆菌碱性果胶酶基pe1B 的克隆与鉴定

果胶裂解酶(E.C.4.2.2.2)可水解聚半乳糖醛酸α-1,4糖苷键释放出可溶性的不饱和寡聚乳糖醛酸,用于水果加工、棉纺织预处理、饲料工业、咖啡和茶发酵、油提取等方面.本研究从地衣芽孢杆菌CICIM B1699染色体DNA中扩增出一种新的果胶裂解酶编码基因pelB,再将其克隆入启动子PQ下游,分别获得重组质粒pla-PQ-pelB和pHY-PQ-pelB.在重组质粒pLa-PQ-pelB的介导下,基因pelB在大肠杆菌JM109中得到表达,所表达的重组果胶裂解酶的酶学性质显示其最适反应温度为45℃,最适pH为10.5.在重组质粒pHY-PQ-pelB的介导下,基因pelB在地衣芽孢杆菌CICIM B1699中表达4.2U/mL的重组果胶裂解酶酶活,较对照菌株高出60%.     

基于特定局部特征布局的视频运动目标挖掘

针对局部特征描述子的高维特性以及视频中的复杂场景,提出一种利用频繁出现的特定局部特征空间布局对视频中运动目标进行挖掘的方法.在运动分割辅助下实现局部特征筛选,仅保留特定的运动相关特征,采用一种非参数维度约减方法建立精简描述子,并通过新的事务构建方式完成挖掘过程.标准数据集上的对比实验结果表明,该精简描述子在95％灵敏度情况下只有不到7％的假阳性率,整个挖掘方法相比同类方法具有更好的挖掘性能和可扩展性.     

基于同步挤压小波变换的振动信号自适应降噪方法

振动信号在噪声影响下,特征提取十分困难。为此应用同步挤压小波变换(Synchrosqueezing Wavelet Transform,SST)对振动信号进行降噪,针对分解后本征模态分量(Intrinsic Mode Function,IMF)的选取问题,提出一种基于瞬时频率复杂度和自相关系数峰度值的同步挤压小波变换降噪方法。算法首先对原始信号进行SST信号分解并提取小波脊线生成固有模态分量,然后对生成的分量进行Hilbert变换得到瞬时频率曲线,再根据瞬时频率的复杂度选择相应的合成分量重构信号。为了进一步消除噪声影响,该方法同时采用了自相关系数峰度阈值法对筛选后的分量进行二次剔除,最终实现对原始信号降噪的目的。试验最后通过不同标准方差的噪声仿真信号以及物流机械传送设备振动信号验证该方法的可行性和有效性,同时将该方法与基于集成经验模式分解(Ensemble Empirical Mode Decomposition,EEMD)和小波变换的方法进行比较,结果表明该方法的降噪性能要优于其他方法。     

SAR对抗仿真系统及压制干扰研究

论述了合成孔径雷达（SAR）干扰的基本原理以及干扰技术的发展过程。介绍了研制的某SAR干扰对抗仿真系统，描述了该系统的构成及仿真流程，阐述了干扰仿真模块的功能及实现方法。在提高地面目标的生存能力，开展对SAR的对抗的前提下，针对包括连续波，转发，脉冲干扰等在内的多种干扰样式，研究了仿真系统对地面目标的戍像效果，对不同干扰样式的干扰效果进行了定量分析，并在不同的干信比条件下，对干扰效果进行了评估。不同战情条件下的仿真结果验证了该系统的有效性。     

普鲁兰酶产生菌的分离与鉴定

以淀粉工业用普鲁兰酶的开发为目的，采集全国不同地区的土壤样本，分离其中的嗜中温细菌，经过形态学鉴定后，通过16SrDNA最终确定其属种并建立细菌库。对该细菌库中短短芽胞杆菌所产普鲁兰酶进行了初步的酶学研究，研究表明野生短短芽胞杆菌的初始酶活都很低，有几株其初始产酶水平大于1U／mL。酶学性质研究表明，短短芽胞杆菌普鲁兰酶有较好的应用价值，其最适作用pH在4～6之间，最适作用温度在50℃～60℃之间，其中来源于CICIM B1490的普鲁兰酶，其酶学性质与目前使用黑曲霉糖化酶的酶学性质相似，能够作为以后研究的初发菌株。     

生物转化法生产茶氨酸的重组大肠杆菌的构建

为构建生物转化法生产茶氨酸的基因工程菌，作者分析了影响大肠杆菌高效表达γ-谷氨酰基转肽酶的几个主要因素．将大肠杆菌JM109的ggt基因接入两种不同的质粒中后，转化大肠杆菌JM109，并在一定的条件下进行表达．通过对比E．coli JM109和转化子的γ-谷氨酰基转肽酶表达活性的不同，探讨了ggt基因的拷贝数、启动子的强弱等几个因素对γ-谷氨酰基转肽酶高效表达的影响．实验表明，将含有自身信号肽和启动子的E．coli JM109的ggt基因接入高拷贝的质粒pUC18中，仅提高ggt基因的拷贝数不能增加γ-谷氨酰基转肽酶的表达量．将含有自身信号肽但不含有自身启动子的E．coli JM109的ggt基因接入具有tac启动子的表达载体pEtac中，发现在强启动子tac的控制下，γ-谷氨酰基转肽酶的表达量提高至出发菌株的2．3倍．将构建的工程菌用于生物转化法生成茶氨酸，底物转化率相应地提高至出发菌株的1．7倍．     

益生菌在冰激淋产品中货架期的稳定性

<正> 近年来,世界各国对乳酸菌和益生菌的研究越来越普遍和深入,这些有益菌对人体胃肠道的各种功效也已被科学界证实和认可。冰激淋作为一种深受人们喜爱的传统食品,添加益生菌既给冰激淋产品带来新的健康概念,又为新品研发拓展广阔空间。