PROfound研究——前列腺癌精准治疗新希望

转移性去势抵抗性前列腺癌（metastatic castrate-resistant prostate cancer,mCRPC）是前列腺癌发展的终末阶段。患者生存预后很差。尽管不断地有新的治疗手段出现，比如新型内分泌治疗以及紫杉醇类化疗，mCRPC患者的生存期依然很有限。奥拉帕利是一款聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶（poly ADP-ribose polymerase,PARP）抑制剂，PARP酶在DNA修复中扮演着重要的角色。奥拉帕利已经获批用于卵巢癌和乳腺癌的治疗。目前，奥拉帕利用于mCRPC治疗的III期临床研究PROfound的结果在2019年的欧洲肿瘤内科学会（ESMO）年会与2020年的美国临床肿瘤学会-泌尿生殖系统肿瘤研讨会（ASCO-GU）已经发布。本文将带来PROfound研究的结果以及最新的结果更新。     

前列腺癌临床诊治热点问题

在欧美国家，前列腺癌居男性恶性肿瘤发病率的首位；在我国，前列腺癌的发病率呈逐年上升趋势。在泌尿外科三大常见肿瘤中，前列腺癌的临床诊治最为复杂，早期诊断是取得较好疗效的前提。前列腺癌诊断方法多，但可靠性差；治疗过程漫长，随访要求高；国内各地区治疗水平差距较大，部分医生对前列腺癌缺乏正确的认识，导致许多患者无法得到标准治疗。借鉴国外最新的研究进展，结合我国的具体国情，对前列腺癌临床诊治中的几个问题进行思考和探讨。     

健康月报

最适合睡前吃的三种食物1小米粥色氨酸在人体内代谢生成5-羟色胺,它能够抑制中枢神经兴奋度,产生一定的困倦感,并在人体内进一步可转化生成有镇静和诱发睡眠的褪黑素。     

科学家发现癌症转移关键蛋白

英国伦敦国王学院研究人员最近在《细胞生物学杂志》上发表研究文章称,他们首次发现一种癌细胞转移所需的关键蛋白,以这种蛋白为靶点,或将成为预防继发性癌症(癌症转移)的有效方法。这一蛋白被研究人员命名为Cdc42蛋白,存在于癌细胞内部。研究人员发现,这种蛋白能够帮助癌细胞依附于血管壁上,从而使它们通过血液扩散到身体的其他部位。通过对小鼠癌细胞以及人类前列腺癌和乳腺癌细胞的观察,研究人员发现,Cdc42蛋白还会影响癌细胞表面另一种蛋白——β1整合蛋白的数量。抑制Cdc42蛋白或β1整合蛋白,癌细胞便无法再依附于血管内壁的内皮细胞上,从而减少了其扩散的机会。     

前列腺癌经直肠超声的临床分期声像特征与优势分析

目的:分析经直肠超声在检查前列腺癌中临床分期的超声声像特征与优点,反映其临床应用价值。方法:采用GE logie 500Pro彩色多普勒超声诊断仪,探头频率5~7.5 MHz进行检测,对55例年龄58~89岁(平均73.5岁)、直肠指检(DRE)触及前列腺质地较硬或可疑结节、血清特异性抗原(PSA)>4 ng/m L的患者进行直肠超声(TRUS)检查,结合临床分期对比超声声像图表现及特征,同时这些病例均进行直肠超声引导穿刺活检,并手术证实为前列腺癌。结果:55例患者中,直肠超声检出前列腺癌48例,符合率可达87.3%,超声表现特征呈形态不规整,边界欠光滑,内外腺分界不清,局部隆起,低回声结节或突破包膜、侵犯邻近组织或远处转移;7例诊断为前列腺增生或增生结节,误诊率为12.7%,超声表现特征呈形态尚整齐,边界光滑,内外腺分界清晰,内部中等回声而周边一细狭的低回声结节。结论:经直肠超声是前列腺癌阳性检出率较高的筛查方法,根据声像图特征初步判定临床分期,具有临床价值。其图像分辨率明显优于经腹部检查,且无创伤、费用低、操作简单、患者容易接受,对临床有着重要的应用价值。     

初诊无远处转移的穿刺病理Gleason评分10分前列腺癌的临床特点

目的　分析初诊无远处转移的穿刺病理Gleason评分为10分前列腺癌的临床特点并探讨外放疗联合内分泌治疗的疗效。方法　2003年1月至2014年3月北京协和医院收治初诊无远处转移的Gleason评分10分前列腺癌患者9例。所有患者均接受全盆腔外放疗联合长期内分泌治疗。全盆腔外放疗的照射剂量为50.0 Gy，前列腺、双侧精囊腺及区域阳性淋巴结加量至76.2～78.0 Gy。内分泌治疗采用最大限度雄激素阻断：口服抗雄激素药物加每月注射一次黄体生成素释放激素类似物。分析患者临床特点及联合治疗效果，并运用Kaplan-Meier法绘制生存曲线。 结果　患者中位随访时间为4.8年（26~75个月）。治疗前中位血清前列腺特异性抗原（prostate specific antigen，PSA）为11.2 μg/L，其中6例低于20 μg/L，3例高于70 μg/L。中位穿刺活检针数阳性率为90.9%。TNM分期：3例T2c，4例T3a，2例T3b；6例N0，3例N1；9例M0。随访期间，6例患者出现生化复发，其中5例进一步发展为转移性前列腺癌；4例患者死亡，其中3例死于前列腺癌。5年无生化复发率、无远处转移率、肿瘤特异性生存率及总体生存率分别为28.6%、 57.1%、66.7% 和57.1%。5例出现1～2级早期放疗胃肠道不良反应，6例出现1～2级早期泌尿系统不良反应，无晚期胃肠道及泌尿系统不良反应。无骨折、心血管意外等严重内分泌治疗并发症。 结论　初诊无远处转移的穿刺病理Gleason评分10分前列腺癌常伴穿刺阳性范围大、肿瘤分期偏晚等高危因素，患者通常预后不良，放疗联合内分泌治疗等及时和积极的综合治疗方案往往是必需的。     

miR-34a通过调控雄激素受体基因抑制前列腺癌细胞系LNCaP增殖

目的：探究miR-34a对雄激素受体（AR）基因的调控作用及对前列腺癌（PCa）LNCaP细胞增殖、凋亡的影响。方法：收集2016年10月至2019年9月本院泌尿外科行前列腺穿刺活检确诊为PCa患者组织标本36例,另取同期行手术治疗切除的良性前列腺增生（BPH）组织标本41例。体外培养LNCaP细胞,分别转染miR-34a mimics（mimics组）,miR-34a mimic NC（NC组）,设正常生长细胞为空白对照组（BC组）,另在mimics组基础上转染AR过表达（AR过表达组）载体及其对照（AR对照组）,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,实时定量PCR（RT-qPCR）检测miR-34a及AR mRNA表达水平,免疫印迹法检测AR蛋白、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）及原癌基因产物（c-Mcy）、细胞凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、capase-3）的表达水平。结果：与BPH组织比较,PCa组织中miR-34a表达水平显著降低（P<0.05）,AR mRNA及蛋白表达水平均显著增加（P<0.05）;与BC、NC组比较,mimics组LNCap细胞miR-34a表达水平、细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著增加（P<0.05）,AR、Cyclin D1、Bcl-2、Bax蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,同一时间LNCap细胞活力均显著降低（P<0.05）;双荧光素酶实验结果显示,miR-34a与AR可能存在一定的调控关系,过表达AR基因可逆转miR-34a mimics对LNCaP细胞增殖抑制,促进凋亡作用。 结论：miR-34a可能通过调控AR抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖,促进其凋亡。     

RON蛋白与CXC趋化因子受体4蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌患者阿比特龙耐药的相关性

目的：研究受体酪氨酸激酶（RON）蛋白与CXC趋化因子受体4（CXCR4）蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌（CRPC）患者阿比特龙耐药的相关性。方法：选取2017年1月至2020年2月我院收治的127例接受阿比特龙治疗的CRPC患者,根据是否耐药分为观察组（n=32,阿比特龙耐药患者）、对照组（n=95,缓解患者）。采用免疫组化与蛋白免疫印迹检测比较两组RON、CXCR4蛋白表达,采用Logistic回归分析进行RON、CXCR4蛋白与耐药的单因素、多因素分析,采用受试者工作特征曲线（ROC）及ROC下面积（AUC）分析RON、CXCR4蛋白预测耐药的价值,并在阿比特龙耐药细胞株中加入RON、CXCR4抑制剂,观察两者对阿比特龙耐药细胞凋亡指标［半胱氨酸蛋白酶（caspase）-3、caspase-9、细胞凋亡率］的影响。结果：免疫组化显示,观察组RON阳性表达率（71.88%,23/32）较对照组（27.37%,26/95）高;观察组CXCR4阳性表达率（65.63%,21/32）较对照组（12.63%,12/95）高;蛋白免疫印迹检测显示,观察组RON、CXCR4蛋白较对照组高（P<0.05）;RON、CXCR4蛋白与耐药均呈正相关（P<0.05）;加入RON、CXCR4抑制剂后,RON、CXCR4表达被成功抑制,且caspase-3、caspase-9、细胞凋亡率均高于阿比特龙耐药细胞株（P<0.05）;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭显示,抑制RON、CXCR4表达,细胞迁移及侵袭细胞数目均显著降低（P<0.05）;RON蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.789,截断值＞4.11,敏感度为84.37%,特异度为61.05%（P<0.05）;CXCR4蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.825,截断值＞3.42,敏感度为75.00%,特异度为80.00%（P<0.05）;RON+CXCR4蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.884（95%CI：0.815～0.934）,敏感度为87.50%,特异度为83.16%（P<0.05）。 结论：CRPC患者RON、CXCR4蛋白表达显著增加,与患者阿比特龙耐药密切相关,有望成为预测耐药的标志物,抑制RON、CXCR4蛋白表达,可促进CRPC阿比特龙耐药细胞的凋亡。     

T-cadherin基因在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞DU145增殖的影响

目的探讨T-cadherin基因在前列腺癌组织中的表达及其对前列腺癌细胞DU145增殖的影响。方法采用RT-PCR法检测40份前列腺癌及相应癌旁组织中T-cadherin基因mRNA的表达。分别用10 ml滴度为1.6×10~(12)pdf/ml的GFP-T-cadherin腺病毒(Ad-GFP-T-cadherin)和GFP腺病毒(Ad-GFP)感染前列腺癌DU145细胞后,MTT法检测T-cadherin对前列腺癌DU145细胞增殖的影响,Western blot法检测T-cadherin对P21和cyclin D1蛋白表达水平的影响,同时设空白对照组(未感染病毒)。结果 T-cadherin在38/40(95%)的前列腺癌中表达下调(P0.01),其表达与前列腺癌的分期、格里森评分及分化有关。Ad-GFP-T-cadherin组DU145细胞中P21蛋白表达水平明显高于Ad-GFP组及空白对照组(P0.01),而cyclin D1蛋白表达水平及增殖活性明显低于Ad-GFP组及空白对照组(P0.01);空白对照组DU145细胞的增殖活性及细胞中P21、cyclin D1蛋白表达水平与Ad-GFP组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 T-cadherin的表达与前列腺癌的发生密切相关,且可通过上调P21和下调cyclin D1蛋白的表达抑制前列腺癌DU145细胞的增殖。     

虾蛄多肽的酶解工艺及其抗肿瘤活性的初步研究

目的:通过正交试验优化酶解条件,提取分离虾蛄软体组织,根据其体外抗肿瘤活性,筛选最佳酶解条件。方法:采用L16(45)正交试验设计方法,通过探索其抗前列腺癌作用,优化胰蛋白酶酶解虾蛄多肽的提取条件。结果:虾蛄多肽酶解最佳条件为:料液比1∶2,pH为7.5,加酶量为1000u/g,温度40℃,时间为4h,其对前列腺癌PC-3细胞株的体外抑制率为60.9%。结论酶解所得的虾蛄多肽对前列腺癌细胞具有一定的抑制生长作用。