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1.
研究硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-coenzyme A desaturase 1,SCD1)基因表达对草原安格斯牛血液脂肪酸组成的影响,采集38 头平均体质量(698±34) kg、48 月龄草原安格斯牛血液样品,测定其脂肪酸组成与含量,采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定SCD1基因表达量,一代测序技术检测SCD1基因在C878T位点的突变对实验牛血液脂肪酸组成的影响,分析SCD1基因表达与脂肪酸组成间的相关性。结果表明:血液样品中共测得36 种主要脂肪酸,饱和脂肪酸(saturated fatty acids,SFA)以棕榈酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)为主,含量分别达22.53%和26.95%,单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acids,MUFA)中油酸(C18:1 n-9c)含量最高(15.09%);由SCD1基因表达与脂肪酸组成的显著性分析结果可知,SCD1基因表达对肉豆蔻酸(C14:0)、肉豆蔻油酸(C14:1)、C16:0、棕榈油酸(C16:1)、C18:0、C18:1 n-9c、亚油酸(C18:2 n-6c)、MUFA和MUFA/SFA以及C14指数、C18指数、脂肪酸总不饱和指数和伸长指数均影响显著;相关性分析结果显示,SCD1基因表达量与C16:0、C16:1、C18:0、C18:1 n-9c和MUFA含量均呈正相关;SCD1基因在878位点处出现了C/T突变,有CC、TT和CT 3 种基因型,不同基因型与脂肪酸组成之间均无显著相关性。综上所述,草原安格斯牛血液中的SCD1基因表达对其脂肪酸组成具有调控作用,可作为遗传标记参考基因。 相似文献
2.
3.
运用生物信息学方法对侧耳属蘑菇(平菇、杏鲍菇和白灵菇)的麦角硫因合成酶基因Egt 1进行挖掘,对其蛋白结构和功能进行预测,并构建酿酒酵母表达载体,在酿酒酵母EC 1118中进行表达研究。结果表明:克隆得到侧耳属平菇、杏鲍菇和白灵菇麦角硫因合成基因PoEgt 1、PeEgt 1和PtEgt 1,三者核苷酸序列同源性为97.03%,氨基酸序列同源性为97.93%,联合菌体破碎法并通过体外酶促反应后检测到麦角硫因,产量为(2.5±0.08)mg/L,证明了该基因具有单基因合成麦角硫因的活性。 相似文献
4.
本研究探讨了α-松油醇对指状青霉抑霉唑抗性菌株Pdw03的抑制作用及其抑菌机理。体外实验结果表明α-松油醇抑制Pdw03生长的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal fungicidal concentration,MFC)均为4.00 μL/mL;体内实验研究发现MFC和5 MFC α-松油醇可明显降低接种Pdw03椪柑果实的绿霉病发病率和发病直径;碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色实验发现,经1/2 MIC α-松油醇处理后,Pdw03的细胞膜完整性降低,麦角固醇含量显著降低(P<0.05),麦角固醇合成相关基因ERG9表达量显著下调(P<0.05)。综上,α-松油醇通过抑制ERG9基因的表达影响菌株Pdw03的生长,可作为采后柑橘病害防治的有效替代品。 相似文献
5.
目的:通过基因干扰和过表达技术,研究V-ATP酶H亚基(V-ATPase membrane subunit H,VMAH)蛋白在柑橘绿霉病菌指状青霉生长中的生理功能,及其作为抗柑橘绿霉病药物作用靶点的可行性。方法:采用菌丝生长法和孢子萌发法,研究沉默和过表达VMAH基因对正常和胁迫条件下指状青霉细胞生长特性的影响。结果:在正常生长条件下,沉默VMAH基因显著抑制了指状青霉菌丝体的生长;而过表达VMAH基因对菌体生长表现出显著促进作用。在不同pH值环境下,沉默VMAH基因显著抑制了指状青霉菌丝的生长,尤其在偏酸性(pH值低于2)和偏碱性(pH值高于8)条件下尤为显著;而过表达VMAH基因在一定程度上促进了菌体菌丝的生长,pH值为6时,其促进作用最显著。与野生株相比,沉默VMAH基因对胞外Ca2+、Cu2+、Fe2+等金属离子胁迫处理较为敏感。VMAH基因沉默菌株对质子泵抑制剂类杀菌剂的敏感性显著增加,尤其V-ATP酶专一性抑制剂巴佛洛霉素A1最为明显;而VMAH基因过表达菌株对质子泵抑制剂类杀菌剂的敏感性显著降低。结论:VMAH在指状青霉生长过程中发挥重要作用,是研发低耐药性柑橘采后杀菌剂的潜在作用靶点。 相似文献
6.
食源性诺如病毒是引发全球食品安全事件的重要病原,近年来新冠疫情的持续肆虐,更突显了加强食品领域病毒安全研究的紧迫性。该研究以实验室前期获得的食源性诺如病毒高效单克隆抗体为对象,克隆并系统分析了其重链和轻链可变区基因序列。从分泌食源性诺如病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E3中提取总RNA,通过RT-PCR扩增单克隆抗体1E3的重链可变区VH和轻链可变区VL的DNA序列。将产物克隆到PMD19-T载体,测序并分析其可变区氨基酸序列。通过NCBIblast比对,显示扩增的VH和VL序列为小鼠抗体可变区序列,进一步利用Vbase2数据库对测序结果进行基因结构分析,定位了VH和VL上的高变区域互补决定区CDR和骨架区域FR,各包含3个CDR和4个FR区域,其中VH片段为360bp,编码120个氨基酸,属于IGHV3-2*02家族;VL片段为339bp,编码113个氨基酸,属于IGKV1-135*01家族。通过分子对接表明抗体重链上位点D108与病毒衣壳P蛋白上N195形成氢键,为关键氨基酸残基。食源性诺如病毒单克隆抗体VH和VL片段的成功扩增促进了基因工程抗体的发展及其在食品安全新型检测与控制技术的应用。 相似文献
7.
Ewa ya Katarzyna Dziendzikowska Dariusz Kamola Jacek Wilczak Rafa Sapierzyski Joanna Harasym Joanna Gromadzka-Ostrowska 《International journal of molecular sciences》2021,22(9)
Background: The incidence of Crohn’s disease (CD) is increasing worldwide, and it has currently become a serious public health issue in society. The treatment of CD continues throughout a patient’s lifetime, and therefore, it is necessary to develop new, effective treatment methods, including dietotherapy. The present study aimed to determine the effects of consumption of oat beta-glucans with different molar mass on colon inflammation (colitis) in the early stages of 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS)-induced CD in an animal model. Methods: Sprague–Dawley rats (control and TNBS-induced CD) were divided into three dietary groups and fed for 3 days (reflecting acute inflammation) or 7 days (reflecting remission) with a feed containing 1% low (βGl) or high (βGh) molar mass oat beta-glucan or a feed without this polysaccharide. The level of colon inflammatory markers and the expression of cytokines and their receptor genes were measured by ELISA and RT-PCR methods, respectively. Results: Acute inflammation or remission (3 or 7 days after TNBS administration, respectively) stages of experimentally induced CD were characterized by an increase in the level of inflammatory markers (IL-1, IL-6, IL-10, IL-12, TNF-α, CRP, MPO, COX, and PGE2) and the disruption of some cytokine signaling pathways as well as macro- and microscopic changes of colon tissue. The consumption of oat beta-glucans reduced the level of inflammatory markers and recovered the signaling pathways and histological changes, with stronger effects of βGl after 7 days of colitis. Conclusions: Dietary oat beta-glucans can reduce colitis at the molecular and organ level and accelerate CD remission. 相似文献
8.
目的:探讨脂质及药物代谢相关基因SLCO1B1和ApoE的基因多态性在安徽地区汉族心血管疾病患者中的分布,以评估他汀类药物个体化用药的效益/风险比。方法:利用PCR-荧光探针法技术检测2019年1月至2020年8月合肥市第二人民医院736例心血管疾病患者外周血基因组中SLCO1B1基因的rs2306283(388A>G)和rs4149056(521T>C)位点和ApoE基因的rs429358(388T>C)和rs7412(526C>T)位点的基因多态性分布特点,并与已报道的中国其他地区汉族心血管疾病患者的数据进行比较,分析不同地区间的基因型分布差异。结果:检测到安徽地区汉族心血管疾病患者中SLCO1B1基因型有6种,分别为*1a/*1a型(6.11%)、*1a/*1b型(29.08%)、*1b/*1b型(44.57%)、*1a/*15型(4.08%)、*1b/*15型(15.49%)、*15/*15型(0.68%),未检测到*1a/*5型、*5/*5型和*5/*15型;ApoE基因有6种表型,分别为E2/E2型(0.41%)、E2/E3型(11.96%)、E2/E4型(1.09%)、E3/E3型(67.66%)、E3/E4型(17.93%)、E4/E4型(0.95%)。两种基因的基因多态性频率分布满足Hardy-Weinberg遗传平衡,具有群体代表性。本研究人群中携带SLCO1B1正常肌病风险型的比例最高,约占79.76%;SLCO1B1中度肌病风险型和高度肌病风险型的人群比例较低,分别为19.57%和0.68%。ApoE大众类基因型比例最高,约占68.75%;ApoE保护类基因型及风险类基因型的人群比例分别为12.37%和18.88%。不同性别间SLCO1B1和ApoE基因表型患者差异无统计学意义。与华南地区心血管疾病患者相比,安徽地区ApoE基因多态性分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论:安徽地区736例心血管疾病患者SLCO1B1和ApoE基因型分别以他汀药物剂量耐受性较高的正常肌病风险型和对他汀药物敏感的大众类基因型为主,服用他汀类药物诱发肌病的风险较低,降脂疗效较好;且两种基因的多态性分布均不受性别的影响,但ApoE基因多态性分布特征可能在地域上存在差异。因此,检测SLCO1B1和APOE基因多态性对于临床评估效益/风险比有重要的指导意义。 相似文献
9.
In Vivo Simultaneous Analysis of Gene Expression by Dual-Color Luciferases in Caenorhabditis elegans
Both fluorescent and luminescent observation are widely used to examine real-time gene expression patterns in living organisms. Several fluuorescent and luminescent proteins with specific optical properties have been developed and applied for simultaneous, multi-color observation of more than two gene expression profiles. Compared to fluorescent proteins, however, the application of multi-color luminescent imaging in living organisms is still limited. In this study, we introduced two-color luciferases into the soil nematode C. elegans and performed simultaneous analysis of two gene expression profiles. Using a green-emitting luciferase Eluc (emerald luciferase) and red-emitting luciferase SLR (stable luciferase red), the expression patterns of two genes were simultaneously observed in single animals from embryonic to adult stages over its whole life span. In addition, dual gene activities were observed at the single embryo level, with the simultaneous observation of morphological changes. These are the first application of a two-color luciferase system into a whole animal and suggest that precise relationship of expression patterns of multiple genes of interest can be analyzed over the whole life of the animal, dependent on the changes in genetic and/or environmental conditions. 相似文献
10.
Monika Savarin Urska Kamensek Katarina Znidar Vesna Todorovic Gregor Sersa Maja Cemazar 《International journal of molecular sciences》2021,22(6)
Targeting tumor vasculature through specific endothelial cell markers represents a promising approach for cancer treatment. Here our aim was to construct an antibiotic resistance gene-free plasmid encoding shRNAs to simultaneously target two endothelial cell markers, CD105 and CD146, and to test its functionality and therapeutic potential in vitro when delivered by gene electrotransfer (GET) and combined with irradiation (IR). Functionality of the plasmid was evaluated by determining the silencing of the targeted genes using qRT-PCR. Antiproliferative and antiangiogenic effects were determined by the cytotoxicity assay tube formation assay and wound healing assay in murine endothelial cells 2H-11. The functionality of the plasmid construct was also evaluated in malignant melanoma tumor cell line B16F10. Additionally, potential activation of immune response was measured by induction of DNA sensor STING and proinflammatory cytokines by qRT-PCR in endothelial cells 2H-11. We demonstrated that the plasmid construction was successful and can efficiently silence the expression of the two targeted genes. As a consequence of silencing, reduced migration rate and angiogenic potential was confirmed in 2H-11 endothelial cells. Furthermore, induction of DNA sensor STING and proinflammatory cytokines were determined, which could add to the therapeutic effectiveness when used in vivo. To conclude, we successfully constructed a novel plasmid DNA with two shRNAs, which holds a great promise for further in vivo testing. 相似文献