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研究猪肝SOD的分离提取、纯化以及初步表征。以猪肝为原料,通过抽提液加热、丙酮沉淀和Sephadex G-200层析柱色谱提取、纯化Cu,Zn-SOD;在单因素试验的基础上,采用L(934)设计对提取工艺进行系统优化。结果表明:经过热变性,可以除去大部分杂蛋白,提高了SOD的比活力;最佳的提取条件是:在1.4%的盐浓度下,于70℃水浴中热变性10 min,然后加1.6倍体积的丙酮获得SOD粗沉淀;溶解后的粗酶液经Sephadex G-200层析柱纯化后,经SDS-PAGE电泳检测为单一条带,HPLC检测显示为单一对称峰,均表明最终得到了高纯度的SOD;紫外-可见吸收光谱和ICP-MS分析结果均表明得到的是含铜、锌的SOD,即Cu,Zn-SOD;以邻苯三酚为底物,该酶的Km值为1.574,Vmax为0.268。 相似文献
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目的参照国标方法,建立鸡肉中弯曲菌定量检测的CCDA平板计数法。方法通过对选择性CCDA培养基中添加不同浓度组合的抗生素和生长促进剂,确定最佳添加浓度组合,并与普通CCDA平板计数法进行比较,建立鸡肉中弯曲菌定量检测方法,同时评价该方法的特异性和检测限。结果添加一定浓度抗生素和生长促进剂的选择性CCDA培养基和普通CCDA培养基对弯曲菌标准菌株定量计数的吻合度为(100±5)%;除弯曲菌外,其他5种肠道细菌在该CCDA培养基中均不能生长;该方法对弯曲菌菌悬液可检测至10 CFU/mL。运用该方法对50份鸡肉样品进行调查研究,共检测出22份阳性样品,弯曲菌检出率为44%,平均检测值为20CFU/100 cm~2,检测结果与国标方法阳性符合率为100%。结论该方法简便、特异性好、准确度高,为定量检测鸡肉中弯曲菌提供了新技术。 相似文献
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