菠菜叶片线粒体DNA的提取及RAPD分析

以菠菜叶片为实验材料,采用差速离心法、DNaseI处理得到无核污染的线粒体、以SDS法去除蛋白,消化RNA得到单纯的菠菜叶片mtDNA,通过对mtDNA纯度的测定,从而建立了菠菜叶mtDNA快速、高效的提取技术体系;同时选取30个引物对三种菠菜mtDNA进行RAPD扩增,对提取的mtDNA体系进行了RAPD分析,结果表明,由引物S7、S16、S21、S24扩增出的条带清晰、多态性较好,片段大小在200~2000 bp之间,表明菠菜各品种的mtDNA各碱基序列上的多态性,是各品种之间进化凸现的原因之一。本研究建立的试验方法耗时短、对离心机的要求不高,并且提取的mtDNA产率高、结构也比较完整。