海藻酸裂解酶的发酵条件优化

通过纯化实验，从海带(Laminaria japoIlica)得到1株具有较高海藻酸酶活力的菌。对其发酵培养，测定发酵液的酶活力，得出海藻酸酶发酵获得最大酶活力的条件：pH7．5左右，25℃，褐藻酸钠添加量为0．5％，蛋白胨作为主要氮源时，连续培养144h。     

从麦麸中提取菲汀的工艺条件优化

研究了从麦麸提取菲汀的工艺条件,并对菲汀含量进行了检验。通过正交实验得到优化实验条件为初始pH值2.0,60℃水浴浸泡6h。通过二次浸泡并进行摇床动态浸泡方式,改进了传统的一次、静态浸泡的方式,从而大幅度提高了菲汀的提取率。另外,采用铁盐法进行菲汀含量测定提取效果。该工艺操作简便,可以降低原料消耗,提高废渣质量,减少废水排放量。     

海藻酸裂解酶的发酵条件优化

通过纯化实验,从海带(Laminariajaponica)得到1株具有较高海藻酸酶活力的菌。对其发酵培养,测定发酵液的酶活力,得出海藻酸酶发酵获得最大酶活力的条件:pH7.5左右,25℃,褐藻酸钠添加量为0.5%,蛋白胨作为主要氮源时,连续培养144h。     

卤虫有效抗炎部位的研究

以药理实验为指导,利用溶剂法、大孔吸附树脂吸附法、硅胶柱层析法及高效液相色谱法提取分离卤虫的有效抗炎部位,对卤虫的抗炎作用进行初步的研究。通过急性炎症———二甲苯致小鼠耳廓肿胀反应。结果表明,利用本方法提取分离的卤虫有效抗炎部位,具有明显的抗急性炎症作用,对炎症的抑制率最高可达80.70%,与对照品相比P<0.001(t值检验)。     

利用酶提液速酿酱油

本文报道酶提液转移淋浇速酿酱油法.从酶活力与氨态氮水平经时变化方面将该法与传统法做了比较.结果表明,该法能充分发挥酶解作用,从而提高酱醅中氨氮水平.     

酶切方式对工程菌植酸酶性质的影响

将无花果曲霉（A.ficuum)AS3.324的植酸酶基因（phyA)，克隆到pPIC9K中，得到重组载体pPIC9K/phyA Ⅱ，分别用限制性内切酶Dra I和Bpul 102 I线性化，用电穿孔转化方法导入宿主巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris)GS115中，构建了两种植酸酶工程酵母。本文比较了这两种工程菌表达的植酸酶的酶学性质。研究结果表明，两者的酶学性质无显著差异。     

高产植酸酶酵母Candida Krusei WZ—001的等离子束诱变选育

从土壤中筛选得到的 1株高产植酸酶酵母菌CandidaKruseiWZ 0 0 1 ,利用等离子诱变方法对这一菌株进行诱变 ,获得 1株植酸酶高产突变株 ,其酶活性比出发菌株提高了 98%。比较了N+、H+、Zn2 +3种离子注入菌体的诱变效果 ,实验结果表明N+离子注入效果最佳 ,注入最佳剂量为 5 0× 1 0 13N+/cm2 。     

基因工程重组酵母植酸酶性质研究

对基因工程重组酵母所产的植酸酶进行分离和纯化 ,并考察纯化酶的酶学性质。该植酸酶酶蛋白分子量为 85 .2kD ;有 2个pH活力峰 :pH 2 .0和 pH 5 .0 ;最适温度为 5 0℃ ;在 3 7℃下以植酸钠为底物的反应初速度为 3 3 .5 μmol/(min·mL) ,米氏常数Km 为 0 .71mmol/L ;Ca2 +对此酶有较强的激活作用 ,Zn2 +、Fe2 +、Cu2 +、Al3+和Fe2 +对其有较强的抑制作用 ,而K+、Na+和Mg2 +对酶活性影响不大。     

无抗性选择标记的植酸酶基因转化DNA的构建

构建了无抗性选择标记植酸酶基因的转化片段DNAphyAⅡ 。两侧设置了高等植物基因组DNA保守序列CAATbox,TATAbox和polyA的DNA片段 (DNAphyAⅡ ,5’ CAATbox TATAbox CaMV3 5S phyAⅡ GUS Nos Tem polyA 3’) ,为提高转化率奠定了分子基础 ,此外DNAphyAⅡ 中植酸酶蛋白编码基因phyAⅡ前后的启动子和终止子序列 ,确保了phyAⅡ会得以正确表达     

植酸酶毕赤酵母基因工程菌高密度发酵

高密度发酵是提高发酵产品、产量的一个非常有效的手段。对一株巴斯德毕赤酵母的植酸酶工程菌Gs115 /phyAⅡ ,采用酵母高密度发酵方法 ,葡萄糖的补加采用逐渐增加的方式 ,控制溶氧和还原糖浓度 ,获得细胞密度为 80g/L。甲醇诱导后 ,最高植酸酶活力达到 4 .1× 10 4U/mL。