利用偶联反应光度法检测甲磺隆

在pH值为7．0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠体系中，甲磺隆与亚硝酸钠反应生成重氮盐，重氮盐与α-萘胺进行偶联反应生成红棕色化合物，该产物在500nm处有最大吸光值，据此，建立了利用偶联反应测定甲磺隆残留的新方法。在最佳条件下，甲磺隆质量浓度与吸光值呈良好的线形关系，线性范围为10～150mg／L。平均回收率为98．10％，相对标准偏差为2．12％。     

植物乳杆菌G63电转化方法的优化

为获得植物乳杆菌G63高效的电转化方法,本研究从细胞生长状态、细胞弱化剂质量浓度、洗涤液、质粒添加量和电击参数等方面对菌株G63的电转化效率进行优化。结果表明：取菌株G63对数生长中期的细胞制备感受态,以1 g/100 mL甘氨酸作为细胞弱化剂,分别用1 mmol/L MgCl2和30 g/100 mL聚乙二醇1000洗涤细胞,并用30 g/100 mL聚乙二醇1000作为电击液,加入20 μg穿梭质粒,在1.5 kV和400 Ω条件下进行电击,可以获得最高的电转化效率,转化效率达到1.18×103 CFU/μg DNA,满足后续遗传学实验要求。     

邻单胞菌M6中甲基对硫磷水解酶(MPH)的纯化及性质的研究

通过热变性、硫酸铵沉淀、DEAE-Sephadex-A50阴离子交换层析和CM Sepharose Fast Flow阳离子交换层析等一系列步骤从有机磷农药降解菌Plesiomonas sp.M6中获得了甲基对硫磷水解酶(Methyl parathion hydrolase, MPH,EC 3.1.8.3)的电泳纯.酶谱显示和SDS-PAGE电泳表明纯化的酶只有一条条带,其分子量约为33kD.该酶热稳定性比较高,55℃、15min处理后酶活保持稳定,最适反应pH为9.0,最适反应温度在10℃左右.动力学分析表明其对甲基对硫磷的米氏常数(Km)为2.14mmol/L, 最大反应速度(Vmax)为14.08μmol/L.min,转换数(kcat)为2863s-1.