CpG ODN对rHBsAg免疫小鼠NK细胞表面分子表达及其活性的影响

目的探讨合成的含CpG基序的寡核苷酸(CpG ODN)与重组乙型肝炎病毒表面抗原(rHBsAg)联合免疫小鼠对NK细胞表面标志NK1.1表达情况及其细胞毒活性的影响。方法采用C57BL/6小鼠,经后腿胫骨前肌免疫2次,FACS检测脾细胞NK1.1表面分子的表达,生物活性法测定脾脏NK细胞的细胞毒活性。结果各实验组间NK细胞表面标志NK1.1的表达差异无显著意义;加CpG ODN各组与相应未加CpG ODN组比较对靶细胞的杀伤活性显著增强,且各组与对照组比较杀伤活性差异均具有显著意义。结论CpG ODN对免疫小鼠NK细胞表面分子NK1.1的表达无明显影响,而对其细胞毒活性具有明显的增强作用,显示CpG ODN具有潜在的免疫佐剂效应。     

绿色荧光蛋白融合表达HBsAg基因载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的　构建绿色荧光蛋白融合表达HBsAg基因的载体 ,并检测其在COS 7细胞中的表达。方法　采用PCR获得HBsAg基因 ;利用该基因片段和质粒pEGFP 3.1的HindⅢ /KpnⅠ限制性酶切位点构建融合表达载体pGHBs 3.1;通过脂质体介导的方法将该载体转染到COS 7细胞中 ,用PCR法检测基因转染 ,ELISA检测HBsAg的瞬时表达 ,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达。结果　融合表达载体pGHBs 3.1转染COS 7细胞后 ,在细胞中检测到HBsAg基因片段 ,转染细胞培养上清中检测到HBsAg表达 ,用荧光显微镜观察到转染细胞中有绿色荧光蛋白表达。结论　表达载体pGHBs 3.1在COS 7细胞中获得了表达 ,表达的融合蛋白具有HBsAg和绿色荧光蛋白的双重活性 ,该载体可用绿色荧光蛋白作为报告基因观察HBsAg的表达及定位。     

表达乙肝病毒表面抗原人参细胞系统的建立

目的建立乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞表达系统。方法构建含有HBsAg基因的植物细胞表达载体质粒pBIBSb。采用农杆菌感染人参细胞的方法,经农杆菌培养、农杆菌与受体细胞共培养、受体细胞的脱菌培养以及转化体细胞的选择培养后,筛选在G418抗生素培养基上正常生长的细胞株。应用ELISA方法检测抗性细胞株的HBsAg表达;提取基因组DNA进行PCR扩增反应。结果质粒pBIBSb的酶切结果正确。经G418抗生素筛选得到8株正常生长的细胞株,其中5株能够表达HBsAg,提取基因组DNA进行PCR扩增反应,得到大小约700 bp的扩增片段。结论获得了整合HBsAg基因,并能够稳定表达HBsAg的人参细胞表达系统。     

人参皂甙对小鼠体内外免疫调整作用的初步研究

本实验研究了人参总皂甙(GS)对正常小鼠免疫功能的影响,人参皂甙单体Re、Rd对免疫受抑状态小鼠(考的松处理)免疫功能的调整作用,并对人参的作用机制进行了实验性的初步探讨。 实验结果表明:给正常小鼠体内注射GS,可增强低剂量白喉类毒素免疫后的一次抗体反应(P<0.001),对高剂量白喉类毒素免疫,可轻度增强一次抗体反应(P<0.01),而对二次抗体反应无效,即使增大GS剂量亦无作     

BPI抗菌作用及其临床应用的展望

杀菌／渗透－增强蛋白（Ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ／ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ－ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ,ＢＰＩ）是一种相对分子质量为５５ ０００的阳离子蛋白,主要存在于多形核白细胞（Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｎｅｃｌｅａｒ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ,ＰＭＮ）的嗜天青颗粒中［１］。最近发现,ＢＰＩ也可微量表达于 ＰＭＮ和单核细胞表面［１］。１９７９年,Ｗｅｉｓｓ等首先从人ＰＭＮ中分离获得相对分子质量为５５０００的天然ＢＰＩ分子（Ｎａｔｕｒａｌ　ＢＰＩ）,简称ｎＢＰＩ５５［２］。 １９８９～１９９０年,Ｇｒ…     

CpG ODN2006对乙型肝炎疫苗免疫BALB/c小鼠抗体产生的影响

目的探讨合成含CpG基序的寡脱氧核苷酸(CpGODN2006)对乙型肝炎疫苗增强小鼠特异性抗体产生的效应。方法采用BALB/c小鼠,经后腿胫骨前肌注免疫2次,ELISA法检测血清中抗HBsIgG效价。结果疫苗+CpG组较疫苗组和空白对照组的抗HBsIgG效价明显增高,且维持时间长。结论CpGODN2006对小鼠抗HBsIgG的产生具有明显的增强作用。     

含CpG基序寡核苷酸对rHBsAg免疫小鼠脾脏组织及细胞增殖的影响

目的探讨合成含CpG基序的寡核苷酸(CpGODN)与重组乙型肝炎表面抗原(rHBsAg)联合免疫对小鼠脾脏淋巴组织及细胞增殖的影响。方法经后腿胫骨前肌初次免疫BALB/c小鼠,2周后加强免疫1次;常规石蜡切片,H-E染色,观察脾脏组织学改变;3H-TdR掺入法检测免疫小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应。结果抗原+CpG组脾脏可见明显的组织学改变。加CpG与不加CpG的2组比较,淋巴细胞增殖反应显著增强。结论CpGODN能够有效刺激小鼠脾脏组织T细胞区淋巴细胞增生,生发中心明显增大,而且能够显著增强淋巴细胞增殖反应。