RT-PCR法检测庚型肝炎病毒C(GBV-C)RNA

应用RT－PCR法在非甲～非戊型肝炎患者血清及单采浆站供血员血浆中检测到GBV－CRNA，扩增产物经序列测定进一步确证，在30例非甲～非戊型肝炎患者中阳性率为6．6％；在600例单采浆供血者血浆中阳性率为0．33％。提示GBV－C可能不是非甲～非戊型肝炎的主要致病因子，可能存在GBV－C健康携带者。     

几家HCV抗体诊断试剂盒检测系列血清的比较

应用Abbott、UBI及国内几家的HCV第二代抗体诊断试剂盒A、B、c及D检测25名HCV感染者的210份感染后不同时期的系列血清,首次采用ELISA及RIBA分片段检测抗体,并与敏感的PCR法检测血清中HCV RNA结果相比较。虽然各试剂盒的总体检测符合率无显著性差异,但个别国产试剂盒的早期检测能力尚有待提高。用任何一家抗体检测试剂盒均会漏检小部分标本,抗体检测阴性的血清在100000倍稀释后仍可检出HCV RNA,因此,有必要发展包括更多片段包被的第三代HCV抗体诊断试剂盒。     

丙型肝炎负链RNA的检测及意义

检测HCV（－）RNA是了解HCV复制的有效手段。本研究采用HCV负链RNA检测法检查5例慢性活动性丙型肝炎病人的肝组织及10例慢性活动性肝炎病人的血浆及淋巴－单核细胞。HCV负链RNA在前者均被检出，但在后者未被检出。将一份HCV负链RNA阳性的肝组织提取液作10－2稀释后仍可测得阳性结果，说明肝脏为HCV复制的主要器官；该方法可用于疑难病人肝穿刺标本的检测及其它研究。     

TSEs的病原学研究进展和生物制品的安全性策略

可传播性海绵状脑病(ＴＳＥｓ)是累及人类和若干种动物中枢神经系统的一组疾病。其致病因子尚未最终确定,但多数学者的研究结果支持朊毒体(Ｐｒｉｏｎｓ)学说[1,2]。人类ＴＳＥｓ包括克雅氏病(ＣＪＤ)、库鲁病、ＧＳＳ和致命性家族睡眠症(ＦＦＩ)。我国从1984～1997年间,已有多例ＣＪＤ病例报道[3～5]。已知的动物ＴＳＥｓ包括羊(绵羊和山羊)瘙痒症(Ｓｃｒａｐｉｅ)、牛海绵状脑病(ＢＳＥ,俗称疯牛病)、雪貂脑病(ＴＭＥ)、黑尾鹿和麋的慢性消瘦病(ＣＷＤ)。ＴＳＥｓ还可累及猪、小鼠、狨猴和猫科动物等。从1986年11月英国确认首例疯牛病后,…     

检测HCV RNA的PCR试剂质控试行参考品的建立

选慢性丙型肝炎病人中HCVRNA含量不等的阳性血清作为阳性标准，采用选自HCV基因5’端非编码区的不同引物来扩增病毒基因，扩增产物与分子量标准进行比较，部分产物用酶切初步分析进行确证。选国家HCV抗体诊断试剂盒临床验证参考品中的阴性样品作为阴性标准，经反复检测显示HCVRNA为阴性。选强阳性血清经5%小牛血清稀释作为灵敏度标准，检测范围为10－5～10－7。应用该参考品对北医肝病研究所的三批HCVRNA诊断试剂盒进行检测，阳性和阴性标准均符合要求，灵敏度为10-5～10-6。     

全国乙肝诊断试剂1996～1997年度抽检结果

目前,国内生产乙肝诊断试剂有55个厂家的264个生产文号。其中未纳入批批检定的抗-HBs,HBeAg,抗-HBe,抗-HBc（试剂,根据生物制品管理规定和卫生部的要求,我所在1996年6月至1997年12月间对45个厂家4个品种的576批试剂及HBsAgEIA678批试剂进行第3个年度抽检。实际抽到40个厂家441批试剂,批总合格率为63％（276／441）;RIA方法测定HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb的合格率分别为90％（19／21）,62％（13／21）,92％（11／12）,80％（12／15）,6％（l／18）。EIA法测定抗一HBs,HBeAg,抗一HBe,抗一HBc的合格…     

人巨细胞病毒gp52蛋白基因片段的克隆及表达

目的为获得高表达人巨细胞病毒 ｇｐ５２蛋白基因的工程菌。方法通过计算机分析,筛选出巨细 胞病毒蛋白ｇｐ５２中优势抗原决定簇,用ＰＣＲ技术扩增克隆了含强抗原决定簇的基因片段。将克隆的基因片段插 入表达载体ｐＥＴ２８（ａ）内,转化大肠杆菌ＢＬ２１,经Ｓｅｐｈａｒｅｒｙ１ Ｓ－２００分子筛及Ｎｉ－ＮＴＡ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ螯合层析进行纯化。结 果获得的工程菌所表达的 ｇｐ５２蛋白片段相对分子质量约为 ２１ ０００,约占菌体可溶性蛋白的 ２８％。获得的表达蛋 白纯度达９５％,电泳显示单一条蛋白带,ＥＬＩＳＡ分析证实有较强的抗原性和较好的特异性。结论本研究对人巨细 胞病毒感染,尤其是对孕妇及献血员等感染的检测有重要意义。     

HBsAg酶联检测试剂的稳定性研究

采用4℃放置以及37℃加速破坏试验等方法，对国内外不同厂家HBsAg酶联检测试剂盒的稳定性进行分析。结果表明，国内与国外HBsAg-EIA检测试剂的稳定性差异有显著意义（P＜0．05）；国内同一厂家，不同批号的HBsAg酶联检测试剂的稳定性也不一致；进一步的研究结果提示，对参加国家“批批检定”的HBsAg－EIA检测试剂应随机抽检其稳定性。