HBsAg缺失型乙型肝炎病毒复制细胞模型的建立及其对乙型肝炎病毒复制的影响

目的体外构建HBsAg缺失型乙型肝炎病毒(HBV)复制细胞模型,并探讨HBsAg对HBV复制的影响。方法定点突变pch9质粒上HBV 1.1倍体基因S蛋白表达区,构建HBV1.1倍体HBsAg突变质粒,并进行测序鉴定;将鉴定正确的突变质粒瞬时转染HepG2细胞,设未突变pch9质粒转染细胞作为对照,采用ELISA法检测转染72 h的细胞培养上清中HBsAg的表达;Southern blot及Real-time PCR法检测转染72 h的细胞内HBV DNA的复制水平。结果定点突变质粒经测序证实构建正确;突变质粒转染72 h的细胞培养上清中HBsAg A450值为(0.06±0.003),表达呈阴性,对照细胞A450值为(1.82±0.010),表达呈阳性,转染突变质粒72 h的细胞内HBV DNA条带浓度明显高于转染未突变质粒的细胞;转染突变质粒的细胞内HBV DNA绝对拷贝数分别为9.33×106、5.26×106,约为转染未突变质粒(6.91×105)的7.6～13.5倍。结论已成功构建了HBsAg缺失型HBV复制细胞模型,为HBV DNA复制及相关研究提供了实验依据;推测HBsAg是HBV DNA形成的自限性因素,能够负调控HBVDNA复制。     

Two New Coordination Polymers: [M（phen）（e,a-cis-1,4-chdc）（H2O）]n（M=Mn and Cu; phen=1,10-phenanthroline; chdc=cyclohexanedicarboxylate）

1,4Cyclohexanedicarboxylicacid(1,4chdcH2)possessesachair typestructurewithcis andtrans conformations,soitcanconnectmetalionsindiffer entdirections.Hence,chdcmaybeagoodcandidate fortheconstructionofnovelcoordinationpoly mers[1-9].AsshowninFig.1[9],conformationAis Fig.1TransformsbetweenthedifferentconformationsofchdcH2theleaststableandisabletochangetoitsconformer Beasily.However,itisalittlemoredifficultwhenC becomesBbecausetheαprotonsshouldbedeproto natedtoacceleratetheequilibriumalthoughBi…     

Synthesis and Structural Characterization of [Co（Q）2（H2O）2]（Q=8-Hydroxyquinoline Ion）

8-Hydroxyquinoline(HQ) and its derivatives areof the most intensivelyinvestigatedligands in the co-ordination chemistry[1 -3]. They have been used inmetallic ion detection,chromatography and especiallyin organic light-emitting diodes (OLEDS)[4]. Poly-oxometalates compounds have received muchattentionbecause of their potential applications in catalysis ,sorption, magnetism,photochemistry[5 ,6]. We origi-nally intended to gain the organic-inorganic hybridcomplex of HQ and polyoxometalates . …     

瓣状内切核酸酶1基因重组真核表达质粒的构建及鉴定

目的构建瓣状内切核酸酶1(Flap endonuclease 1,FEN1)基因重组真核表达质粒,并进行鉴定。方法提取L02细胞总RNA,逆转录合成cDNA,经巢式PCR扩增FEN1基因,定向克隆至载体pcDNA3.1,构建重组真核表达质粒,经酶切及测序进行鉴定。将鉴定正确的真核表达质粒转染293T细胞,Western blot检测FEN1蛋白的表达。结果 FEN1基因重组真核表达质粒经酶切及测序鉴定证明构建正确;在相对分子质量约47 000处可见目的蛋白条带,转染细胞中FEN1蛋白表达量较空载体转染组及空白细胞对照组提高约3倍。结论已成功构建了FEN1基因重组真核表达质粒,并可在293T细胞中过表达FEN1。     

壳聚糖协同脐血造血干细胞对小鼠的免疫恢复研究

为了解壳聚糖对脐血移植的影响,在体外培养的基础上,采用MTT法观察水溶性壳聚糖对脐血干细胞的作用,同时在体内检测移植后小鼠造血细胞数量、体液免疫和细胞免疫情况,以了解水溶性壳聚糖对脐血造血干细胞植入的影响.观察结果表明,壳聚糖在体外对脐血造血细胞有扩增作用,与细胞因子相比扩增倍数为11.32;脐血造血细胞在体内移植的同时,壳聚糖有类生长因子作用,可促进免疫抑制小鼠造血重建和免疫恢复.