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目的对WuT3杂交瘤细胞生物反应器无血清培养上清中单克隆抗体进行分离纯化,建立中试分离纯化工艺。方法采用两步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化WuT3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后,进行中量试验和中试放大。结果建立的纯化方法可以放大到中试规模,每批投料30000ml培养上清,可收获单抗达1.5g,单抗总回收率大于60%。经分离纯化后,单抗IgG纯度大于95%,采用免疫荧光法检测抗体活性合格。结论建立了一条生物反应器无血清培养杂交瘤细胞大规模分离纯化单抗的工艺路线。 相似文献
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HSV-tk基因/GCV系统治疗肿瘤的旁观者效应与缝隙连接关系的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因/丙氧鸟苷(GCV)系统杀伤肿瘤细胞时旁观者效应与细胞间缝隙连接的关系。方法 用PA317细胞包装STK质粒(逆转录病毒载体介导的HSV-tk基因),形成假逆转录病毒颗粒,转染有缝隙连接的大鼠胶质瘤细胞C6和无缝隙连接的入宫颈癌细胞 Hela,制成 C6 tk+和 Helatk+细胞,将不同比例的C6和 C6 tk+、Hela和 Hela tk+细胞混合,每种比例8孔,培养 24h后 4孔加入含0.5μg/mlGCV的培养基,4孔作对照,6d后用MTT法测量细胞存活率。在两个培养皿中放入周围粘有33mm高滤纸的载玻片,分别接种 C6、C6 tk+细胞。细胞 80%汇合后将载玻片互换,并加入含0.5μg/ml GCV的培养基,6d后观察细胞形态。结果C6细胞组存在旁观者效应,Heal细胞组不存在旁观者效应。培养皿中tk+细胞大部分被杀死,tk-细胞无变化。结论HSV-tk基因/GCV系统杀伤肿瘤细胞时旁观者效应与细胞间缝隙连接有关。 相似文献
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从医院环境空间、心理需求和管理创新三个方面出发,分析了空间环境对病人生理、心理和行为的影响,指出医院公共空间的设置应契合使用者对医院总体空间的使用需求,从而提高医疗建筑的质量,实现以人为本的理念。 相似文献
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计算机的发明和使用将人们带入了一个前所未有的高速运转的信息时代,作为计算机同一家族成员的电脑数控技术的应用同样给传统的制造业带来了巨大的变革,它逐渐成为了机械制造业实现自动化的重要依托,同时,数控技术在不断的进步和发展,延伸到了国民生产需求的许多重要领域。文章将就数控技术在机械制造行业中的运用以及未来的发展前景做简要的分析,希望通过不断的研究和科学实践使数控技术更好的为机械制造业效力,为我国市场化经济的发展贡献力量,服务于国家的现代化建设。 相似文献
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目的 为了获得光纤连接器端面研磨与化学机械抛光(CMP)过程中的运动状态对加工精度的影响规律.方法 建立双驱动差动行星式抛光机的运动学方程,基于这个方程利用随机磨料点法对磨料切削轨迹和平均相对速度场等进行了计算机数值模拟,然后依据PRESTON方程讨论了在加工中运动参量对光纤连接器端面的平均速度分布的均匀性,以及对加工形状精度的影响.结果 获得了磨料切削轨迹,平均相对速度分布等对形状精度的影响规律.结论 增大系杆长度和齿环转速可以使轨迹与平均相对速度分布获得合理状态,而系杆的转速存在一个合理的参数区域. 相似文献
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目的建立能稳定分泌抗SARS-CoV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法用SARS-CoV灭活全病毒液免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术建立6株稳定分泌抗SARS-CoV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并进行全面鉴定。结果免疫双扩散证实1C6细胞株分泌的单抗为IgG2a亚类,其余5株细胞分泌的单抗为IgG1亚类;腹水效价均达到10-6以上;6株细胞分泌的单抗均不与麻疹病毒等其它5种呼吸道病毒发生交叉反应;Westernblot证实6株细胞分泌的单抗均识别相对分子质量约150000的S蛋白及其相对分子质量为120000的裂解片段;相加指数证实6株细胞分泌的单抗识别相关的抗原表位;用硫氰酸铵洗脱法比较了6株细胞分泌的单抗的相对亲和力大小,依次为1A4>4F6>1C6>1B10>2H2>1F3;中和试验证实单抗4F6和1F3具有中和活性,中和效价均为1∶10;杂交瘤细胞株连续培养3个月以上及冻存半年后复苏,细胞生长良好,效价稳定。结论已获得抗SARS冠状病毒的单克隆抗体,为SARS的早期诊断及进一步研究奠定了基础。 相似文献
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王志友 《中国新技术新产品》2013,(5):136
为了在机械加工生产过程中使机床设备能够按照既定的要求安全准确地运行,在安装机械设备的同时,如何进行机械调试,记录总结调试过程中所出现的难题,进而提出解决相应困难的方案措施。以下内容就上面几个问题作了简要分析。 相似文献