靶序列富集多重PCR结合DHPLC同时检测5种食源性致病菌

目的建立同时检测沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌5种食源性致病菌的简便、灵敏的高通量方法。方法根据GenBank公布的5种致病菌的特异性靶基因序列,设计5对特异性引物,与通用引物连接构成复合引物。经过反应条件的优化,建立了5种致病菌的靶序列富集多重PCR(target enriched multiplex PCR,Tem-PCR)扩增方法,扩增产物采用变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)技术进行检测。结果采用Tem-PCR-DHPLC方法,检测48株试验菌株,未发现非特异性结果。对5种致病菌检测灵敏度,除金黄色葡萄球菌为620 cfu/mL外,其余都小于100 cfu/mL。对4种样品的检测结果与国家标准方法相符合。结论 Tem-PCR-DHPLC检测方法,相比传统多重PCR方法,能有效地解决引物扩增效率不均衡的问题,不需优化引物浓度,方法特异性强,灵敏度高,具有较好的实用性。     

物理化学综合性、设计性实验的初步探索

在现有物理化学实验的基础上增加综合性、设计性实验,使学生得到更加全面、系统、综合的训练,收到了较好的效果。     

涂层防护性能的测试方法研究

通过介绍无机涂层的防腐机理,对涂层/金属体系性能和失效过程进行了探讨。系统阐述了无机涂层的测试方法和技术,重点分析了电化学阻抗谱法(EIS)在评价涂层性能中的应用,为进一步研究无机涂层腐蚀的本质和过程提供了有价值的参考。     

碘分配系数及平衡常数的计算

在碘和碘离子反应平衡常数的测定实验中,由于碘的水溶液较难配制且与碘四氯化碳溶液构成的复相系统不易建立平衡,文章因此采用两种不同浓度的KI溶液与碘的四氯化碳溶液构成两个复相平衡系统,采用氧化-还原滴定方法确定各组分平衡浓度,并在此实验基础上推导出了碘的分配系数及反应平衡常数的计算公式。实验表明,采用上述方法建立的复相系统较易达到平衡,实验测定的分配系统和平衡常数更为准确。     

十二烷基三甲基溴化铵/醇/庚烷/水微乳化作用研究

以铁氰化钾为电化学探针,用循环伏安法测定了十二烷基三甲基溴化铵(DTAB)/醇/庚烷/水体系微乳液的扩散系数,同时用电导率法研究了微乳液的结构及结构转变。绘制了不同条件下DTAB微乳体系的拟三元相图,探讨了体系的微乳化作用规律,考察了醇的种类、含量对微乳区形成的影响。结果表明,当醇(正丁醇)固定时,随着醇含量增加,微乳区面积先增大后减小;醇的链长不同,体系的微乳区类型及面积分数均不同,随着醇碳链的增长,微乳区面积先增大后减小。     

3 种食源性致病菌Tem-PCR检测方法的建立

应用靶序列富集多重聚合酶链式反应（target-enriched multiplex-polymerase chain reaction,Tem-PCR）技术建立金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和志贺氏菌3 种食源性致病菌的快速检测方法。分别以金黄色葡萄球菌femA基因、沙门氏菌invA基因和志贺氏菌ipaH基因为靶基因,设计3 对特异性引物,并与通用引物连接组成Tem-PCR引物,通过反应条件优化,建立了Tem-PCR检测方法。结果显示,建立的Tem-PCR方法特异性强,对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和志贺氏菌的检测灵敏度分别为1.1×103、2×103 CFU/mL和1.2×103 CFU/mL。Tem-PCR检测方法有效地解决了传统多重PCR引物扩增效率不均衡的问题。     

冰提苜蓿冰结构蛋白及其对冷冻面团的影响

以紫花苜蓿草粉为原料,采用冰结合磷酸盐缓冲溶液法提取苜蓿冰结构蛋白。通过对苜蓿冰结构蛋白提取率的计算,对提取过程中的p H值、缓冲溶液的浓度、料液质量体积比进行优化。经单因素实验及响应曲面实验得到提取苜蓿冰洁构蛋白的最佳工艺参数为:料液质量体积比为1 g∶20 m L,缓冲液p H 8.0,磷酸盐缓冲液浓度为61 mmol/L,其最终提取率可达到2.87%。利用生物显微镜对苜蓿冰结构蛋白的冰晶形态进行观察,可以观测到许多体积小、且呈现六棱型及多边型的不规则形状,说明其对冰晶生长及冰晶形态的抑制与修饰效果显著,具有很好的抗冻活性。利用SDS-PAGE对苜蓿冰洁构蛋白进行检测,确定其蛋白质相对分子质量约为52 000,苜蓿冰结构蛋白应用到冷冻面团中发现可改善面团的品质。     

表面张力和表面吉布斯自由能的严格证明

表面张力和表面吉布斯自由能是界面现象中非常重要的两个概念,表面张力定义为垂直作用在单位长度界面上的力,而表面吉布斯自由能是定温定压条件下,增加单位表面积引起系统吉布斯自由能的增量,实际上它们是从不同角度观察表面现象的同一物理量,但各教材中基本上没有详细的论述。文章从吉布斯自由能的实际意义角度对两者同一性进行严格的证明。     

浅谈师范类高校物理化学教学方法

根据物理化学课程的特点,探讨了高等教育师范类物理化学课程教学的有效教学模式。文章从激发学生的学习兴趣、增强教师的业务素质和善用现代化教学手段三方面进行了分析和讨论,探讨物理化学课程教学改革。     

地方高师培养中学化学师资的改革与实践

围绕在基础教育新课程背景下如何培养高素质化学师资,从优化人才培养方案,改革化学实验教学,创新教育实践模式,面向基础教育实际开展特色培养等方面,论述了几年来的探索进程与改革的成效。