基于CBT的多源Steiner树构造算法

构造最小代价树问题可形式化为图论中Steiner树问题。而Steiner树的求解已经被证明是一个NP-complete问题，不可能在多项式时间求得其精确解，所以出现许多启发式算法：在可接受时间内，得到一棵近似的最优多播树。这些算法一般先指定所有链接边的费用，通过一定方法或规则，找出包含源端和所有目的端的一棵近似最优的多播树。很显然，它们并没有考虑由于路径的共享重叠而引起最小生成树链接边费用的变化。现利用CBT算法思想对变化的费用进行建模并对典型启发式算法作了改进，以适应不断变化了的链路费用。     

新建本科院校土木专业"1+2+4"人才培养模式研究

以新建本科院校的现状和土木专业人才培养的困惑为切入点,基于提高新建院校土木专业人才培养的竞争力,结合土木专业的特点,从办学实力、专业水平、学生潜质、学生就业、人才需求等角度进行分析,认为新建本科院校土木专业应以培养多类型人才为目标,对人才培养模式进行了创新,提出"1+2+4"人才培养模式,并对"1+2+4"培养模式的内涵、实施及保障措施进行了分析.     

掺外加剂混凝土在负温下的硬化强度

混凝土中掺入化学外加剂,已成为冬季施工的重要方法之一,为缺乏蒸汽或电热能源的露天分散工程的冬施创造了有利条件。目前混凝土外加剂已由单一剂发展到复合剂,其中以NaNO_2复合剂在负温混凝土中最为常用。NaNO_2和早强剂复合使用,其电解溶液能降低水的冰点,使水泥水化在负温下继续进行。复合组分中,NaNO_2主要起抗冻作用,早强剂Na_2SO_4、NaCl或磺化焦油主要起负温下的早强和增强作用。     

新型狂犬病病毒中和抗体检测方法的建立

目的建立一种安全、快速、经济的新型狂犬病病毒中和抗体的检测方法。方法在狂犬病病毒弱毒株HEP-Flury基因组Ψ区插入增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein eGFP)基因,利用反向遗传技术,拯救重组病毒rHEP-eGFP,分别采用荧光显微镜观察、直接免疫荧光染色鉴定及电镜观察等方法对rHEP-eGFP病毒进行鉴定;分别绘制rHEP-eGFP和亲本毒株HEP-Flury的生长动力学曲线;将rHEP-eGFP在BHK-21细胞中连续传代9次,测定各代次rHEP-eGFP的滴度,荧光显微镜下观察eGFP的表达;采用TCID50法检测狂犬病病毒标准攻击毒株CVS-11和rHEP-eGFP的毒力;以rHEP-eGFP病毒为抗原,建立新型荧光抗体病毒中和试验(fluorescent antibodyvirus neutralization,FAVN)-eGFP,对25份犬血清的抗体效价进行测定,并与标准FAVN检测结果进行比较。结果经荧光显微镜观察、直接免疫荧光染色鉴定和电镜观察表明,成功拯救出rHEP-eGFP病毒;重组病毒rHEP-eGFP与亲本病毒HEP-Flury的生长特性相似;rHEP-eGFP连续传代9次,均能稳定表达eGFP;CVS-11的毒力为108TCID50/ml,rHEP-eGFP的毒力为107.3TCID50/ml;FAVN-eGFP与FAVN测定25份犬血清抗体效价的结果具有良好的一致性。结论建立的新型狂犬病病毒中和抗体检测方法(FAVN-eGFP)准确度高,特异性好。     

牛干扰素γ蛋白在Vero细胞中的表达及其抗病毒活性

目的在Vero细胞中表达牛干扰素γ基因,并对其抗病毒活性进行鉴定。方法将牛干扰素γ全基因克隆至pcDNA3.1(+)载体,构建重组表达质粒,经PCR及双酶切鉴定,将鉴定正确的阳性质粒通过脂质体法转染Vero细胞,分别采用间接免疫荧光和Western blot法检测细胞转染效率和干扰素γ蛋白的表达,采用细胞病变抑制试验检测其抗病毒活性。结果间接免疫荧光显示绿色荧光,表明牛干扰素γ蛋白在Vero细胞中得到表达,转染效率约为50%;Western blot检测可见相对分子质量约为22 000的目的条带,进一步验证了该蛋白的表达;细胞病变抑制试验显示细胞病变明显减少,表明表达的干扰素γ蛋白具有明显的抗病毒活性。结论成功在Vero细胞中表达了牛干扰素γ蛋白,其具有明显的抗病毒作用。     

东方马脑炎病毒E2蛋白的表达、纯化及免疫原性

目的表达、纯化东方马脑炎病毒(eastern equine encephalitis virus,EEEV)E2蛋白,并检测其对小鼠的免疫原性。方法利用IPTG诱导重组大肠埃希菌BL21-pET30-EEEV-E2,表达E2蛋白,用包涵体纯化试剂盒纯化重组E2蛋白,进行SDS-PAGE和Western blot分析。将BALB/c小鼠随机分为4组:PBS对照组、弗氏佐剂对照组(弗氏佐剂与PBS按体积比1∶1乳化)、E2蛋白组(E2蛋白与PBS按体积比1∶1混合)和E2蛋白+弗氏佐剂组(E2蛋白与弗氏佐剂按体积比1∶1乳化),每组10只,各组均经小鼠后肢肌肉免疫3次,两次免疫间隔时间均为14 d,免疫剂量均为100μl/只。第2次免疫后第7天,采用流式细胞术检测小鼠体内CD4+和CD8+T细胞比例;第2次免疫后第14天,采用细胞因子ELISA定量试剂盒检测小鼠血清中IL-2、IL-4和IFNγ的含量;第3次免疫后第7天,采用MTT法检测小鼠淋巴细胞增殖情况;每次免疫后第14天,采用ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体效价。结果表达的重组E2蛋白相对分子质量约为53 000,表达量为菌体总蛋白的26.3%;纯化的重组E2蛋白纯度达95%以上;表达和纯化的重组E2蛋白均可与鼠抗His标签单克隆抗体结合。与PBS对照组、弗氏佐剂对照组和E2蛋白组相比,E2蛋白+弗氏佐剂组小鼠体内CD4+与CD8+T细胞比值、血清中IL-2、IL-4和IFNγ浓度、体内淋巴细胞增殖指数均明显升高(P﹤0.01);小鼠初次免疫后即可产生E2蛋白IgG抗体,且随着免疫时间的延长,抗体效价逐渐上升,第3次免疫后第14天,抗体效价可达1∶320。结论表达并纯化了重组E2蛋白,其能使小鼠产生较强的免疫反应,为新型EEEV疫苗的研制提供了参考。     

基于k-means聚类算法的山东省GSME企业网站应用分析

运用k-means方法对山东省成长型中小企业应用网站开展电子商务的调查数据进行聚类分析,表明企业应用电子商务水平符合阶段性模型,虽然企业电子商务应用还处于较低阶段,但企业对电子商务具有较高的认知水平,门户网站的功能性得到加强,同时对网站的运营与管理还有待加强。最后,结合政府政策以及网络服务运营商的业务发展状况,提出一些中小企业有效利用门户网站的策略。     

浅议华北地区中小城镇及农村地区预应力混凝土构件生产质量控制

对华北地区部分中小城镇及农村地区预应力混凝构件的生产质量情况进行了调查,对该类构件在工程应用中引发质量事故的原因进行分析,提出了建立保证构件生产质量长效机制的措施建议。     

基于无线网络适配器的射频电路设计技巧和实现

以基于802．11g的无线网络适配器的PCB设计为例，根据射频电路工作的特点，集中探讨与RF电路板分区设计有关的各种问题，并给出了一些仰制PLL杂散信号的意见和方法。     

西方马脑炎病毒E2基因的克隆与原核表达

目的克隆并原核表达西方马脑炎病毒(Western equine encephalomyelitis virus,WEEV)E2基因。方法采用PCR法从重组质粒pVL1393-C-E中扩增E2基因,插入原核表达载体pET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET-30a(+)-E2,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果重组表达质粒pET-30a(+)-E2经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为52 900,诱导6 h目的蛋白的表达量较高,约占菌体总蛋白的23.5%,重组蛋白主要以包涵体形式存在,可与鼠源His单克隆抗体特异性结合。结论克隆并原核表达了WEEV E2基因,为E2蛋白免疫原性及WEEV亚单位疫苗的研究奠定了基础。