完善粗煤泥处理工艺降低末精煤灰分

三河尖煤矿选煤厂利用动力煤洗选工艺生产炼焦精煤，在增加了一套粗煤泥处理系统后，降低了末精煤灰分，满足了用户要求     

辣白菜中明串珠菌的筛选及鉴定

从辣白菜中分离筛选益生菌一明串珠菌.通过对其生理生化特性的研究以及16S rDNA序列的系统发育树分析确定其分类地位.结果表明属于肠膜明串珠菌,命名为kimshi 001,在NCBI上的登录号为FJ655776.     

明串珠菌的稳定高效电转化

明串珠菌电转化的再现性差、效率稍低,因此重新优化了电转化方法。以pCW4为载体,明串珠菌为受体菌,固定接菌量和氨苄浓度,优化了PBS溶液的pH值、LiAc-DTT孵育时间、溶菌酶的量和孵育液中蔗糖浓度。利用MRS(含质量浓度0.48 mg·L-1氨苄)培养明串珠菌(初始OD600为0.048),OD600为0.5左右时收集菌体,用LiAc-DTT溶液(含100 U·mL-1溶菌酶、浓度0.5 mol·L-1蔗糖)孵育20 min,再用pH值为6.9的PBS洗涤和电转化,得到较高的转化率,为2.47×105μg-1DNA。     

明串珠菌电转化的优化

为了构建食品级基因工程受体菌,课题对明串珠菌的电转化条件进行了优化.以大肠杆菌-明串珠菌穿梭质粒pCW4为载体,以明串珠菌为受体,文章优化了细胞壁处理方式、电击参数、复苏时间等与电转化相关的因素.结果表明:用氨苄浓度0.7μg/mL的MRS培养基培养明串珠菌至OD600为0.5左右,以PBS作缓冲液,收获制成感受态细胞,与1μg DNA混合,在电场强度12 kV/cm、电阻200 Ω、电容25μF下电击转化,以含80 mmol/L MgCl2的MRS培养基复苏培养3h,得到最高的转化效率为1.75×105 cfu/μg DNA.     

T-DNA在丝状真菌中的插入突变及其应用前景

利用根癌农杆菌介导的转化系统已经在酵母菌和多个属种的丝状真菌成功建立起相应的T—DNA插入突变体系,使之有可能成为真菌生理学、生物化学以及发育生物学相关理论研究的潜在工具．综述了丝状真菌质粒DNA转化和T—DNA转化的差别、T—DNA插入突变的主要特点和优点、T—DNA转化丝状真菌的方法以及T—DNA已转化的丝状真菌种类,并对T—DNA插入突变在丝状真菌中的应用前景进行了分析．     

辣白菜中分离含内源性质粒的魏斯氏菌及其鉴定

为了探讨魏斯氏菌在辣白菜中起的作用和获得与明串珠菌相关乳酸细菌的质粒,从辣白菜中分离了魏斯氏菌。辣白菜是朝鲜民族的传统食品,在低温条件下大白菜经过乳酸细菌发酵而成的。将辣白菜汁液均匀涂布在含2%(m/v)CaCO3的MRS平板上,30℃恒温培养箱中培养24h～36h,在中国内地首次分离获得了魏斯氏菌。通过对该菌进行镜检、生理生化特性检测以及16S rDNA序列的系统发育树分析确定其分类地位。结果表明其属于Weissella cibaria,命名为kimshi006,在NCBI上的登录号为HM369807。这一魏斯氏菌菌株含有2条内源性质粒,其大小分别为大约3000bp和8000bp。     

土壤中明串珠菌的筛选与鉴定

从土壤中分离筛选明串珠菌,通过对其生理生化特性的研究并基于16S rDNA序列的系统发育树分析确定其分类地位。结果该菌株为革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性、精氨酸和七叶苷水解阴性、发酵葡萄糖产酸产气、不生成葡聚糖。可发酵利用果糖、蔗糖、蜜二糖、麦芽糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、棉籽糖、核糖、水杨苷,延迟利用半乳糖和甘露糖,微弱利用纤维二糖、乳糖、海藻糖和L-鼠李糖,不可利用甘露醇;系统发育树表明该菌株属于假肠膜明串珠菌,命名为kimshi005,在GenBank上的登录号为GU130195。     

可见光分光光度法测定米曲霉发酵液中总黄酮

米曲霉可发酵生产黄酮类物质,为确定发酵液中总黄酮含量,采用可见光分光光度法(A510)进行测定,并优化了测定条件.确定乙醇浓度为95%(体积分数),亚硝酸钠浓度为4%(质量分数),硝酸铝浓度为10%(质量分数)以及氢氧化钠浓度为4%(质量分数)时最适用于米曲霉发酵液中总黄酮含量的测定.最后分别用芦丁和槲皮素物质的量为标准确定总黄酮含量.     

动力煤选煤厂生产炼焦精煤应注意的几个问题

根据三河尖洗煤厂的生产实践，论述了在动力煤选煤厂生产炼焦精煤过程中要考虑煤炭品种、可选性、工艺流程、入洗量、产品质量及洗煤效益等几个问题，并提出了一些建议。     

明串珠菌的基因研究进展

明串珠菌是韩国泡菜、德国泡菜和腌菜等发酵蔬菜中的优势细菌,保持产品的质量中起着重要作用,在各种乳制品中也有其的应用,因此近年来在内地对它的研究开始活跃。该文论述明串珠菌的有用蛋白质基因的克隆与异源表达、对明串珠菌的遗传转化和染色体改造、基因组等方面的研究进展,为今后的明串珠菌基因研究提供借鉴。