阿托伐他汀对稳定型心绞痛患者外周血T细胞亚组影响的初步研究

目的探讨阿托伐他汀对稳定型心绞痛患者外周血T淋巴细胞免疫的影响。方法借助三色荧光标记技术对27例行冠状动脉支架术治疗的稳定型心绞痛患者服用阿托伐他汀前和3个月后外周血T细胞上共刺激分子CD28的表达以及CD28-抑制性T细胞的变化进行流式细胞术测定,并用ELISA法检测血浆CD40L水平。结果阿托伐他汀服用6个月后,外周血采集物中CD4 和CD8 细胞亚组以及CD28 和CD28-亚组细胞相对数无显著变化,血浆CD40L水平与服药前比较明显降低。结论阿托伐他汀虽不能使稳定型心绞痛患者外周血中T淋巴细胞亚组构成发生变化,但能降低血小板源性的T淋巴细胞激活物sCD40L。     

糖尿病合并冠心病患者的冠状动脉病变特点

目的探讨糖尿病合并冠心病患者的冠状动脉病变特点及相关因素。方法对48例60岁以上临床糖尿病可疑合并冠心病患者行选择性左、右冠状动脉造影,并与同年龄组的非糖尿病患者50例对照。结果98例冠状动脉造影,有病理改变者58例,阳性率59.18%。共累积病变血管168支,其中男性79例,冠造阳性者51例(64.56%),女性19例,冠造阳性者7例(36.84%),差异显著(P<0.01)。糖尿病合并临床可疑冠心病患者48例(A组)与同年龄组的非糖尿病患者对照(B组),冠状动脉造影阳性率分别为70.83%及48.00%,差异显著(P<0.05)。其中A组单支血管病变10例(29.41%),多支血管病变24例(70.59%)。B组单支血管病变11例(45.83%),多支血管病变13例(54.17%),A组多支血管病变数明显高于B组,差异显著(P<0.05)。结论糖尿病临床可疑合并冠心病患者的冠状动脉造影阳性率明显高于非糖尿病的可疑冠心病组,且以多支血管病变为主。     

在兔外周血源性及骨髓源性单核细胞向树突状细胞转化过程中人粒-巨噬细胞集落刺激因子与人白细胞介素4的作用

背景：目前常用鼠作为动脉粥样硬化动物模型,但其体型较小,试验条件受限。兔也是常用的动脉粥样硬化动物模型之一,但其树突状细胞的培养和鉴定方式需要进一步摸索。目的：探讨兔外周血源性及骨髓源性单核细胞体外向树突状细胞转化的可行性。设计、时间及地点：细胞学体外对照观察,于2007-12/2008-10在南方医科大学珠江医院儿科实验室、中山医科大学达安医学检测中心完成。材料：6周龄雄性纯种新西兰大白兔12只,购自南方医科大学实验动物中心。人粒-巨噬细胞集落刺激因子、人白细胞介素4、脂多糖为美国Pepro Tech Inc产品。方法：兔心尖穿刺抽取血液20mL,同时行骨髓穿刺抽取骨髓10mL,采用密度梯度离心法分离收集中间云雾状细胞层,加入适量的含双抗的胎牛血清的1640培养液,培养2h后弃去未贴壁细胞,即为兔外周血源性和骨髓源性单核细胞。2种不同来源的单核细胞均分为2组：实验组以含有20μg/L人粒-巨噬细胞集落刺激因子、20μg/L人白细胞介素4的上述培养基隔日换液培养6d,其中在第5天加入10mg/L脂多糖刺激并孵育过夜;对照组未添加任何细胞因子。主要观察指标：光镜及电镜观察细胞形态,流式细胞仪鉴定细胞表型。结果：培养6d后,外周血源性和骨髓源性对照组细胞呈圆形或椭圆形,表面有小杆状突起,符合巨噬细胞的特征;实验组细胞呈不规则形,表面粗糙,胞体有形态不一的突起,符合树突状细胞的特征。流式细胞仪检测结果显示,外周血源性和骨髓源性的实验组细胞均高表达HLA-DR,CD86,低表达CD14,组间比较差异无显著性意义（t=0.5187,t=1.7151,t=0.0250,P均〉0.05）;对照组细胞HLA-DR,CD86,CD14的表达则与实验组相反。结论：在人粒-巨噬细胞集落刺激因子、人白细胞介素4及脂多糖联合作用下,兔外周血源性单核细胞及骨髓源性单核细胞均能转化为成熟树突状细胞。     

氧化低密度脂蛋白刺激内皮细胞程序性死亡配体-1的表达

目的:研究氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞的负性共刺激分子程序性死亡因子配体-1(PD-L1)袁达的影响,探讨动脉粥样硬化发病的免疫机制.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,并分别与不同浓度(10、50、100 mg/L)ox-LDL温育24 h,以PBS作阴性对照,采用逆转录聚合酶链反应、流式细胞技术分别检测人脐静脉内皮细胞PD-L1的mRNA及蛋白表达水平.结果:随着ox-LDL浓度的增加,人脐静脉内皮细胞的PD-L1表达逐步升高,低浓度(10 mg/L)OX-LDL与对照组比较差异无统计学意义,中浓度(50 mg/L)及高浓度(100 mg/L)ox-LDL组较对照组PD-L1表达显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:公认有致慢性炎症作用的ox-LDL刺激人脐静脉内皮细胞炎症反应时,上调负性共刺激分子PD-L1的表达,这种负反馈调节可能是抑制动脉粥样硬化的一种免疫机制.     

直接法和公式法检测血清LDL-C含量的偏差和分析

目的:观察和分析直接法测定血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量与Friedewald公式换算值之间的关系。方法:采集1330例送检者的血脂水平,其血清三酰甘油均低于400mg.dL-1(4.52mmol·L-1)。测定LDL-C采用选择性水解法和根据Friedewald公式换算。结果:两种方法检测LDL-C值随非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)水平的线性变化而波动,其偏差超过直接法检测值10%以上的占所有血样的40.76%。结论:直接法和Friedewald公式法检测血清LDL-C含量存在明显的偏差,可能与两种方法的系统误差有关。     

尾加压素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的:研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的诱导凋亡作用,以及这种诱导作用与细胞内游离Ca2+的关系。方法:(1)光镜观察培养的静脉内皮细胞形态。(2)分成浓度组和时间组:浓度组加入不同浓度的UⅡ(10-9～10-6mol/L),并将硫氮唑酮加入对照组及10-7mol/L组;时间组则观察10-7mol/LUⅡ作用后不同时间段HUVEC的凋亡率。(3)流式细胞仪分析细胞周期,计算凋亡率。(4)电镜检测细胞凋亡。结果:(1)UⅡ促进HUVEC凋亡,二者呈时间依赖性(P<0.05);二者呈明显量效关系(P<0.05)。(2)硫氮唑酮可抑制UⅡ的诱导作用。结论:UⅡ可诱导HUVEC凋亡,其机制可能与[Ca2+]i升高有关。     

冠心病患者外周血T淋巴细胞上PD-1的表达及意义

目的:研究程序性死亡因子-1(PD-1)在冠心痛患者外周血T淋巴细胞上的表达,初步探讨其在动脉粥样硬化发生发展中的意义.方法:选择冠心痛患者(55例)为研究对象,其中稳定性心绞痛患者(SA组)27例,急性冠脉综合征患者(ACS组)28例.30例经冠脉造影证实的非冠心痛患者为正常对照组.分别用免疫荧光、流式细胞术及RT-PCR检测PD-1蛋白及mRNA在T淋巴细胞上的表达情况.结果:与正常对照组相比,ACS组、SA组外周血T淋巴细胞上PD-1蛋白及mRNA的表达均明显降低(P<0.01),ACS组与SA组比较差异无统计学意义.结论:PD-1在冠心痛患者T淋巴细胞上的表达明显降低,这可能在冠状动脉粥样硬化的发生及发展中起到作用.     

提高人外周血单核细胞分离率的方法探讨

摘要 目的：对常规的单核细胞Ficoll-Hypaque密度分离法和塑料吸附法进行改进，以提高单核细胞的分离率、减少分离时间和实验耗材。方法：以改进的Ficoll-Hypaque密度分离法和塑料吸附法为实验组，常规Ficoll-Hypaque密度分离法为对照组，评价与对比两种方法的单核细胞分层效果、单核细胞分离率、所需时间和耗材，以及细胞收集率等内容和指标。结果：抗凝血离心结束后，实验组离心管中内容物清晰地分为上、中、下3分层。在上、中层液体交界处可清晰地见到环状乳白色的单个核细胞层，分层效果较常规对照组理想。在对20ml/管抗凝全血进行单个核细胞分离的过程中，实验组平均耗时(1.18±0.08)h(n=5)，对照组为(1.5±0.07)h(n=5)，差异有显著性(P<0.01)。在2-4h内收集到的贴壁单核细胞在实验组为(2.12±0.13)×106/ ml(n=5)，对照组为(1.60±0.16)×106/ml(n=5)，差异有显著性(P<0.01)。结论：改进的Ficoll-Hypaque密度分离法和塑料吸附法可明显提高单核细胞的分离率，减少了分离的时间和原料，同时也在一定程度上提高了单核细胞的收集率。该法对于需要从较大量的血液中分离出较多量的单核细胞时尤为适用，可为基础与临床细胞学研究提供一个较为有效的细胞获取途径。 关键词: 单核细胞 分离 人淋巴细胞分离液     

急性心肌梗死并发胸腔积液3例治疗体会

临床上急性心肌梗死（AMI）并发胸腔积液不多见，常被误认为是心肌梗死后心功能不全所致，治疗上侧重于纠正心衰．往往达不到预期效果，本文将我们遇到的3例心肌梗死后并发胸腔积液患者的治疗体会报告如下。     

编码微珠悬浮芯片集成检测冠状动脉粥样硬化性心脏病相关蛋白因子:可行性分析

目的:编码微珠悬浮芯片技术是新兴的蛋白质芯片技术,该方法被认为是医学检验发展的方向.实验拟进一步验证编码微珠悬浮芯片集成检测冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)相关蛋白因子并分析其可行性.方法:①试验对象:收集2007-08/09在本院心内科住院的冠心病患者的血清样本30例,男19例,女11例,平均年龄(63±10)岁.纳入标准:无明显肝肾功能异常、脑血管意外、急性感染、各种凝血功能异常性疾病及接受抗凝治疗者.患者对治疗及试验均知情同意,治疗方案经医院医学伦理委员会批准.②试验方法及评估:建立编码微珠悬浮芯片集成检测方法,同时检测30例患者血清标本中超敏C-反应蛋白、脂蛋白a和脂联素3种冠心病相关蛋白因子的浓度,利用酶联免疫吸附法对相同血清标本的上述3种蛋白因子分别进行检测,并进行相关性分析.结果:纳入患者的血清样本共30例,均进入结果分析.①编码微珠悬浮芯片集成检测结果:超敏C-反应蛋白(2.54±1.97)mg/L、脂蛋白a(102.41±76.74)mg/L和脂联素(15.43±9.87)mg/L.②酶联免疫吸附法检测结果:超敏C-反应蛋白(3.93±2.52)mg/L、脂蛋白a(208.63±81.23)mg/L和脂联素(16.63±8.21)mg/L.③编码微珠悬浮芯片集成检测结果与酶联免疫吸附法分别检测超敏C-反应蛋白、脂蛋白a和脂联素的结果呈显著相关(超敏C-反应蛋白:r=0.972,P<0.001;脂蛋白a:r=0.792,P<0.001;脂联素:r=0.935,P<0.001).结论:编码微珠悬浮芯片集成检测冠心病相关蛋白因子是可行的方法,凭借其高通量、精确、可靠、操作简便等优势,很可能成为冠心病诊断中一项十分重要的分析检测技术.