低温生产高活性右旋糖苷蔗糖酶的明串珠菌的筛选

明串珠菌是异型发酵乳酸菌的一种,主要作用于蔬菜发酵食品的发酵初期,能够代谢生成CO2和多种风味化合物,是占有重要地位的发酵剂菌种之一。明串珠菌在蔗糖诱导下分泌右旋糖酐蔗糖酶,此酶分解蔗糖生成的葡萄糖基,转移到异麦芽糖等受体中生成低聚糖。为了提高蔬菜发酵食品中低聚糖生成量,实验从蔬菜发酵食品中筛选了低温生产高活性右旋糖酐蔗糖酶的明串珠菌,随后对分离菌株进行了鉴定及发酵特性研究。结果所筛选4个菌株均为肠膜明串珠菌,在低温下显示了很高的右旋糖酐蔗糖酶活性。这些明串珠菌菌株应用到发酵食品将会有助于提高发酵食品的感官质量和功能性。     

假肠膜明串珠菌甘露醇脱氢酶基因的克隆及表达

利用聚合酶链式反应从假肠膜明串珠菌中扩增出甘露醇脱氢酶（mannitol dehydrogenase,MDA）基因的结构基因,克隆入表达载体pETDuet-1,构建了甘露醇脱氢酶表达质粒pETDuet-1-mdh,将其转化进入大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达。假肠膜明串珠菌甘露醇脱氢酶结构基因长度为1 017 bp,重组甘露醇脱氢酶基因在大肠杆菌内成功表达,其蛋白质分子质量为36.0 kD;重组甘露醇脱氢酶活力为0.15 U/mg pro,高于假肠膜明串珠菌中甘露醇脱氢酶活力0.03 U/mg pro。     

轨道交通装备接线端子冷压接中要素之间匹配性研究

主要介绍了轨道交通装备用线束接线端子冷压接中的各要素,以及它们之间的匹配关系和匹配性对压接结果造成的影响,并提出解决建议.     

一种新型的自对准源漏接触技术

提出了一种用于亚微米尺寸以下MOSFET器件的自对准源漏接触技术。这种新型的集成方法改变了传统的工艺步骤,即光刻接触孔,然后向里填充导电材料。在形成栅极、绝缘介质侧墙以及自对准金属硅化物以后,通过沉积金属膜层,并各向异性刻蚀以在绝缘介质侧墙两旁形成一对金属的侧墙结构。这个侧墙连接底部的源漏区和上部的互联区,作为底层的金属接触引出。这个方法不仅减小了刻蚀接触孔的难度,且采用自对准的方法形成金属接触也减小了源漏接触的距离,提高了集成度。这项工艺集成技术尝试应用于0.5μm栅长MOSFET器件结构中,并仿真得到了良好的电学性能。     

柠檬明串珠菌KM20中D-乳酸脱氢酶的特性

目的：分析柠檬明串珠菌中D-乳酸脱氢酶（D-LDH）的酶学特性。方法：对柠檬明串珠菌KM20中D-乳酸脱氢酶基因进行克隆表达并构建表达质粒,转化至Escherichia coli BL21（DE3）中实现过表达。结果：经Ni-NTA柱亲和层析纯化后,D-LDH-1与D-LDH-2编码的蛋白分子质量分别为40.0,38.5 kDa;比活力分别为2.18,153.10 U/mg;在丙酮酸还原中两种酶的最适pH值与最适温度均为8.0与40 ℃;而乳酸氧化时D-LDH-2的最适pH值与最适温度分别为12.0与30 ℃。D-LDH-1与D-LDH-2对草酰乙酸、苯丙酮酸和2-酮戊二酸具有较强的催化能力,且Ca²⁺、Cu²⁺和Na⁺对其酶活性均具有促进作用,Zn²⁺与SDS对酶活性有极高的抑制作用。此外,两种酶对丙酮酸的K_m值分别为2.98,6.11 mmol/L,对丙酮酸的K_cat/K_m分别为6.04×10²,2.28×10⁴ L/（mol·s）,LDH-2对D-乳酸的K_cat/K_m为65.0 L/（mol·s）。结论：D-LDH-1与D-LDH-2为柠檬酸明串珠菌中催化D-乳酸合成的关键酶。