代谢工程优化大肠杆菌高效合成L-苯丙氨酸

为获得1 株稳定高产的L-苯丙氨酸工程菌株,利用规律间隔成簇短回文重复序列/Cas9技术,在大肠杆菌W3110中引入已解除反馈抑制的分支酸变位酶/预苯酸脱水酶PheA,随后利用不同强度的启动子对莽草酸途径中各反应酶进行调控,并通过摇瓶发酵确定了莽草酸途径各步反应酶的最适表达强度,最后通过增加前体物磷酸烯醇式丙酮酸供应,获得了1 株性能最佳的L-苯丙氨酸工程菌株PHE12。利用该菌株进行摇瓶发酵24 h,L-苯丙氨酸产量达20.5 g/L。利用发酵罐分批补料发酵48 h后,L-苯丙氨酸产量达81.8 g/L,与目前文献报道的最高产量相比产量提高了12.2%,生产强度和糖酸转化率（葡萄糖计）分别为1.7 g/（L·h）和0.24 g/g,工业前景良好。     

丛式大斜度井在乐东22-1气田的应用

受海上油气田井位井槽限制,同时为提高采收率,丛式大斜度井在海洋钻井的应用日益广泛,随之开发难度也不断增加。为减小丛式大斜度井实施风险,通过在乐东22-1气田的实际应用,结合有关理论分析与计算,对井身剖面及井身结构设计、井眼轨迹导向控制、井壁稳定与井眼清洁等工艺进行了分析,总结了该气田丛式大斜度井钻井工艺的技术特点和成功经验,同时探索了海上丛式井技术的新方法,效果较好,对同类油田具有较好的借鉴作用。