水产品腐败希瓦氏菌外膜脂蛋白受体结构、功能及基因表达分析

外膜脂蛋白受体LolB是革兰氏阴性菌运输脂蛋白的关键因子。采用生物信息学方法和实时荧光定量PCR技术探究水产品腐败希瓦氏菌LolB的理化性质、结构和功能及其在不同环境中的基因表达变化。结果表明:lolB基因具有较高的序列保守性;其蛋白LolB分子质量约为23ku,是稳定的亲水性蛋白,含有信号肽,具有21个磷酸化位点,不具有跨膜结构。LolB的二级结构以无规则卷曲和β-折叠为主,三级结构呈β桶状结构。预测到LolB与脂蛋白转运系统的LolA、LolC和LolE家族跨膜蛋白、ABC转运相关蛋白及增加细胞膜刚性、维持胞壁质稳定性的催化型裂解转糖酶等多种蛋白质存在相互作用。荧光定量PCR结果表明:lolB基因在菌体受到一定程度的饥饿、乙醇、渗透压及高温胁迫时上调表达,而随着胁迫程度增加呈先升后降的表达趋势;4℃条件下,lolB基因表达模式与对照组相似;外源信号分子C₆-HSL诱导lolB高表达,并和LolB蛋白的Leu51残基通过π-烷基存在相互作用。研究结果旨在为解析LolB在腐败希瓦氏菌中的功能和水产品腐败希瓦氏菌的靶向抑制提供新思路。     

HepG2糖脂紊乱模型构建与红曲紫薯提取物体外糖脂代谢干预评价

紫薯和红曲均被认为具有保护肝脏的功能,但紫薯经红曲发酵后护肝作用的变化未见报道。为研究红曲发酵对紫薯干预肝细胞糖脂代谢能力的影响,首先检测紫薯发酵前后成分变化,并采用油酸联合果糖诱导Hep G2细胞建立糖脂代谢紊乱模型,测定了紫薯和红曲紫薯对模型细胞葡萄糖消耗量和糖原、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量的影响,并测定了细胞内活性氧自由基(ROS)的水平。结果表明,经红曲发酵后,紫薯的总酚含量及Fe~(3+)还原能力上升,总黄酮含量下降。紫薯和红曲紫薯均可显著增加模型细胞的葡萄糖消耗量和糖原含量(P0.05),抑制TG和TC的合成,降低ROS水平。发酵后紫薯促进模型细胞糖原合成能力约提升60%,下调TC能力约提升1倍,说明紫薯经过红曲菌发酵后,其干预HepG2糖脂代谢紊乱细胞糖脂代谢能力增强,可能与紫薯发酵后多酚含量提升有关。