侵染海南雪茄烟的中国黄花稔曲叶病毒侵染性克隆的构建

  背景和目的   中国黄花稔曲叶病毒（Sida yellow mosaic China virus,SiYMCNV）是侵染海南儋州雪茄烟的重要病原,为了分析该病毒的致病性,以侵染海南雪茄烟的SiYMCNV分离物为材料,构建SiYMCNV的侵染性克隆。  方法   以侵染SiYMCNV的雪茄烟植物总基因组为模板,分别构建含有1.5倍串联重复DNA-A全长侵染性克隆pCAMBIA1300-1.5A和含有2倍串联重复DNA-β全长侵染性克隆pCAMBIA1300-2β。采用液氮冻融法转化农杆菌GV3101,通过农杆菌浸润验证侵染性克隆的致病性。  结果   SiYMCNV DNA-A单独侵染本氏烟和雪茄烟H382不表现症状,DNA-A和DNA-β混合侵染本氏烟和雪茄烟H382表现出典型的曲叶症状,且整株植物表现为矮化、皱缩。  结论   构建的中国黄花稔曲叶病毒侵染性克隆可高效侵染本氏烟和雪茄烟H382,为进一步开展该病毒致病性机制研究和抗病烟草种质资源鉴定奠定了坚实基础。      

大豆资源抗疫霉根腐病基因分析

采取下胚轴创伤接种法鉴定156份大豆资源对13个不同毒力基因型大豆疫霉菌株的抗性。结果表明,125份资源分别抗1～13个菌株,占鉴定资源总数的80.13%。125份抗性大豆资源与13个大豆疫霉菌株共产生90种反应型。通过与13个鉴别寄主的反应型比较发现,有9份大豆资源产生的5种反应型与含有已知抗病基因的大豆资源的反应型相同;12份大豆资源产生的5种反应型与已知2个抗病基因组合的反应型一致,另外,还有至少抗1个菌株的104份大豆资源产生的80种反应型,既不同于已知单个抗病基因的反应型,也不同于2个已知抗病基因组合的反应型,推测可能含有新的抗病基因或基因组合。     

红彩瑞猎蝽与蠋蝽同类相残和集团内捕食作用分析

红彩瑞猎蝽和蠋蝽均为防治斜纹夜蛾的重要捕食性天敌,为明确两种捕食蝽不同虫态间的相互竞争关系,在室内条件下测定了红彩瑞猎蝽和蠋蝽种内同类相残和种间集团内捕食作用。结果显示,两种捕食蝽同类相残效应随着虫龄的增加而增加,红彩瑞猎蝽同类相残效应比蠋蝽更明显。两种捕食蝽在各个若虫和成虫时期均有集团内捕食现象,但卵极少被捕食。红彩瑞猎蝽各发育阶段的存活率均高于同样发育阶段的蠋蝽,尤其红彩瑞猎蝽1龄若虫存活率显著高于蠋蝽1龄若虫。提供猎物斜纹夜蛾时,红彩瑞猎蝽和蠋蝽各虫态的集团内捕食效应均明显降低。表明红彩瑞猎蝽为集团内捕食者,而蠋蝽为集团内猎物;两种捕食蝽组合应用于斜纹夜蛾的防治,捕食效果显著高于单一捕食蝽的效果。     

海南雪茄烟叶霉变微生物鉴定及拮抗菌株筛选

为明确引起海南雪茄烟叶霉变的微生物种类并筛选其拮抗菌株防治烟叶霉变,分别从海南霉变雪茄烟叶表面分离、纯化得到霉变微生物和拮抗微生物,采用形态学和分子生物学相结合的方法鉴定微生物种类。鉴定和筛选结果表明,引起海南雪茄烟叶霉变的微生物主要为篮状菌属、帚霉属和曲霉属,得到3株霉变菌株分别为Talaromyces funiculosus、Scopulariopsis brevicaulis和Aspergillus occultus。筛选到2株拮抗效果良好的拮抗菌株,分别为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和耐盐芽孢杆菌（Bacillus halotolerans）。引起海南雪茄烟叶霉变的微生物主要为篮状菌属、帚霉属和曲霉属菌株,筛选到的2株芽孢杆菌对致霉菌有良好的拮抗作用,为雪茄烟叶霉变的防治提供了参考。      

92份雪茄烟原料种质资源遗传多样性研究

为准确评价雪茄烟种质资源的遗传多样性,利用SSR引物对92份可用作雪茄烟原料的种质进行分析,共检测到234个等位基因,平均为5.441 9,每个位点的多态性信息量变化范围为0.099 5~0.846 9,平均值为0.608 2;Nei’s多样性指数平均为0.654 6,Shannon信息指数平均达1.303 5。UPGMA聚类分析在遗传距离0.35处可将供试种质分为4个类群,PCA主成分分析将供试材料划分为4个类群,Structure群体遗传结构分析将供试材料划分为5个类群;不同分析方法划分的类群虽然有所差异,但分析结果均与地理来源有一定的相关性。从中筛选出15对核心引物构建了供试种质的指纹图谱,为建立雪茄烟种质资源鉴定体系奠定理论基础。本研究可为雪茄烟鉴定评价、遗传背景研究和种质创新应用等提供科学依据。     

高温胁迫对红彩瑞猎蝽存活率及捕食作用的影响

为探明高温条件下红彩瑞猎蝽耐受能力及对斜纹夜蛾幼虫的控害潜能，在室内测定了红彩瑞猎蝽经不同高温胁迫48 h后的卵孵化率，5龄若虫羽化率，3、4、5龄若虫和雌、雄成虫存活率，评估了红彩瑞猎蝽不同虫态在高温条件下24 h内对斜纹夜蛾3龄幼虫的捕食能力。结果表明，高温胁迫对红彩瑞猎蝽各虫态的存活率、卵孵化率和羽化率有显著影响，经42℃处理48 h后红彩瑞猎蝽雌成虫和5龄若虫的存活率最高，达66.67%；红彩瑞猎蝽存活率、卵孵化率和羽化率在27～33℃时随温度升高而增加，在33℃后均随着温度升高而降低，36℃后存活率、卵孵化率和羽化率均下降明显。红彩瑞猎蝽各虫态在30～33℃范围对斜纹夜蛾的捕食量和捕食效能随温度升高而增大，在33～39℃范围，捕食量和捕食效能随温度升高而降低，红彩瑞猎蝽各虫态对斜纹夜蛾的捕食功能反应类型符合HollingⅡ型，随着猎物密度的增加，对猎物的搜寻效应逐渐减弱，个体间存在竞争和相互干扰作用。可见红彩瑞猎蝽对高温逆境有一定的耐受能力，其适宜生存的高温范围为33～36℃。     

不同规格育苗盘对雪茄烟苗生长和膜上移栽烟叶产质量的影响

为了筛选能培育适合膜上移栽方式的高素质雪茄烟苗的湿润育苗盘,试验研究了50孔、54孔、70孔、72孔和100孔5个规格育苗盘对烟苗生长和膜上移栽烟株大田生长及烟叶产量、经济效益的影响。结果表明,50孔和54孔育苗盘所育烟苗农艺性状、根系形态指标、鲜干质量、壮苗指数较高,大田烟叶生长较快,但烟叶产量、茄衣烟叶产量较低,育苗投入成本明显增加,烟叶经济效益降低。72孔育苗盘所育烟苗素质整体较高,烟株大田长势好,烟叶产量、茄衣产量、茄衣产出率均较高,其中茄衣产出率较烟苗素质高的50孔处理提高9.92%,烟叶经济效益较育苗投入最高的50孔处理提高8.28%。70孔育苗盘所育烟苗的根冠比、壮苗指数与72孔处理差异不显著,但其大田烟叶产量、茄衣烟叶产量却显著低于72孔处理。而100孔育苗盘所育烟苗素质尽管低于其他处理,但其大田烟叶产量、茄衣产量最高,分别较最低的54孔处理提高15.42%、28.43%,育苗投入成本最低,烟叶经济效益较50孔处理提高12.06%。因此,72孔和100孔苗盘可用于海南雪茄烟叶秋季湿润育苗,其所育烟苗适合雪茄烟叶膜上移栽使用。     

防治烟蚜的杀虫剂筛选及对红彩瑞猎蝽安全性评价

为筛选出雪茄烟田中对红彩瑞猎蝽（Rhynocoris fuscipes）安全且能高效防治烟蚜（Myzus persicae）的药剂，采用浸叶法和药膜法测定了9种常用杀虫剂对烟蚜和2龄红彩瑞猎蝽的毒性，并对红彩瑞猎蝽的安全性进行评价，同时在雪茄烟田进行了防治效果（防效）验证试验。结果表明：9种药剂对烟蚜的LC50分别为啶虫脒44.311 mg/L、氟啶虫胺腈46.696 mg/L、鱼藤酮71.499 mg/L、桉油精77.538 mg/L、双丙环虫酯139.697 mg/L、吡蚜酮175.142 mg/L、除虫菊素427.589 mg/L、藜芦碱322.856 mg/L、金龟子绿僵菌（CQMa421）205.921 cfu/mL。9种杀虫剂中对2龄红彩瑞猎蝽的LC50最高和最低的药剂分别是鱼藤酮139.596 mg/L和金龟子绿僵菌（CQMa421）1 599.419 cfu/mL。安全系数和益害毒性比分析表明，桉油精、啶虫脒、吡蚜酮和金龟子绿僵菌（CQMa421）对烟蚜具有较好的防效，且对2龄红彩瑞猎蝽的毒性较小。田间试验表明，桉油精、吡蚜酮、金龟子绿僵菌（CQMa421）与红彩瑞猎蝽...