活性氧对白腐真菌漆酶合成的影响

分别将不同活性氧在发酵第4天加入发酵产酶培养基中,一定时间后通过测生物量和漆酶酶活研究外界活性氧对白腐真菌漆酶合成的影响,并通过活性电泳进一步验证。结果表明:低浓度的活性氧可以通过信号传导方式调控漆酶合成,超氧阴离子抑制白腐真菌产漆酶,过氧化氢和羟自由基促进白腐真菌产漆酶。实验结果对漆酶合成调控、植物-病原菌相互作用以及生物防护具有重要意义。     

杏鲍菇菌渣产漆酶及其在染料脱色中的应用

以杏鲍菇菌渣为原料,探讨了其固态发酵产漆酶的条件,并对粗酶液在染料脱色中的应用进行了初步探索。结果表明,当添加质量分数4%甘蔗渣、质量分数1.2%硝酸铵、质量分数1.0%碱木素时,杏鲍菇菌渣产酶能力最强,达到386.9 U/gds。相对于杏鲍菇菌渣初始漆酶酶活18.6 U/gds,优化后提高了20倍以上。最适条件下,发酵粗酶液在无介体存在下对甲基红、活性艳蓝K3R、酸性蓝209、活性艳蓝KNR的脱色率分别达到85.8%、85.6%、68.3%、71.2%,在添加介体的条件下活性艳蓝K3R、酸性蓝209、活性艳蓝KNR的脱色率分别达到88.8%、93.4%、89.7%。显示出杏鲍菇菌渣漆酶良好的环保应用前景。     

快速气相色谱法在啤酒分析中的应用

分析化学的主要趋势包括小型化的样品制备和快速的运行时间来提供高通量的筛选、快速的过程监测以及快速的方法已经形成。本文主要研究了窄孔径气相色谱毛细管柱(内径为0.18mm)在啤酒分析中的应用。这类毛细管柱与常规的气相色谱管柱(内径在0.32到0.53mm)相比,分析速度更快。同时其稳定性,高分辨率等性能也已经在对啤酒风味化合物(例如低级或高级醇、酯、其他挥发性化合物如乙醛、二甲基硫化物等)的分析过程中得到肯定。此方法能够减少60%的样品运行时间。     

Pycnoporus sp. SYBC-L3漆酶催化偶氮染料脱色

为考察 Pycnoporus sp. SYBC-L3漆酶Lac-L对偶氮染料的脱色、解毒效果,探究最佳的脱色反应条件,采用单因素分析方法研究了不同的反应条件对Lac-L催化3种偶氮染料（AR1、RB5、RV5R）脱色的影响,得到最佳处理条件,并通过比较被漆酶降解前后的染料对小麦和水稻发芽率及根、芽生长的影响,分析其毒性变化。结果表明：在以HBT为介体、反应温度50 ℃、pH分别为4.0（AR1,RV5R）和5.0（RB5）、漆酶用量1 U/mL、染料初始质量浓度分别为30 mg/L（AR1）和50 mg/L（RB5、RV5R）条件下,漆酶对3种偶氮染料的脱色效率最高,AR1和RV5R几乎完全降解,脱色率达到96.1%和97.8%,而RB5也有83.8%的脱色率。植物毒理实验表明,3种偶氮染料经漆酶降解后对小麦和水稻发芽率没有影响,对胚芽和根生长的抑制作用也有所降低。     

薰衣草产酚酸内生真菌的分离及产物初步鉴定

利用人工种植的薰衣草及无锡本地采集的相同品种薰衣草,对其各组织内生真菌进行分离、纯化。分别分离得到18和23株内生真菌。对所筛选出的菌株进行固态发酵,并对其发酵培养产物进行提取。通过化学反应的方法从野外采集薰衣草内生真菌中筛选出一株产酚酸的菌株,并通过分子生物学方法对其进行初步鉴定,并对其固态发酵提取物进行初步研究。研究结果表明了薰衣草内生真菌的多样性,为通过微生物固态发酵产酚酸类物质提供理论和实验基础。     

血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L10产纤维二糖脱氢酶的发酵优化

研究了血红密孔菌Pycnoporus sanguineus SYBC-L10产纤维二糖脱氢酶的发酵优化。该酶是诱导酶,微晶纤维素是其最好的诱导底物。通过对发酵培养基中培养成分的优化,添加大分子碳源微晶纤维素和小分子碳源葡萄糖作为复合碳源,发酵优化后提高到78±5.94 U/L,是未优化前的2倍(39±4.78 U/L)。通过对氮源的优化,即有机氮源黄豆粉和无机氮源磷酸氢二铵的添加,使酶活达到700±35.78 U/L,比优化前提高了近17倍。而通过四因素四水平的碳氮源正交实验之后酶活达到1245±35.78 U/L,比优化前提高了近32倍。由此,确定了当微晶纤维素为7 g/L,葡萄糖5 g/L,黄豆粉6 g/L,磷酸氢二铵2 g/L时,其他不变,此时的产酶最高,达到1 245±35.78U/L。     

芽胞漆酶的固定化方法对比研究与载体选择

为了找到适合芽胞漆酶固定化的载体和方法,对12种载体共19种芽胞漆酶固定化方案进行了对比研究,并通过参考固定化芽胞漆酶的酶活力回收率、重复利用率、成本等因素,选定以DEAE-纤维素为载体通过离子结合法固定为最佳方案。结果表明,包埋法固定化芽胞漆酶存在严重的扩散限制作用,部分包埋法制备的微球还会伴有溶解、膨胀的现象。而多孔材料常因孔径过小难以固定芽胞。芽胞以碳二亚胺为交联剂与载体进行共价结合,具有良好的固定化性能,可作为备选方案。     

环脂肽的研究进展

脂肽主要通过微生物的非核糖体合成酶途径合成。由于其具有广谱抗菌活性、生物表面活性剂活性、低毒、可生物降解等多种生物学功能而引起人们广泛的关注。环脂肽是由非极性的脂肪酸链结合极性的氨基酸肽链部分构成,其中,氨基酸肽链自身成环或与部分脂肪酸链结合成环。从环脂肽的结构、生物合成机制、合成调控、发酵方式、产量优化策略及利用废弃物生产脂肽等方面综述其研究进展。     

绍兴黄酒麦曲制曲过程的宏蛋白质组学研究

麦曲在制曲的过程中,以小麦为原料,通过自然接种环境中的微生物,发生一系列的生物化学变化,最终生成黄酒酿造所需的各种粗酶制剂以及风味代谢物质的前体。该研究利用宏蛋白质组学的理论和方法,对绍兴黄酒麦曲制曲过程中6个不同时期(起始期、发酵前期、升温期、高温期、降温期、成熟期)的麦曲浸提液宏蛋白质组进行双向电泳实验,研究麦曲制曲过程中浸提液宏蛋白质组的变化情况。使用PDQuest软件对获得的双向电泳图谱进行比较分析,发现共有12个蛋白点在制曲过程中发生了动态变化。利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF/TOF MS)对该12个差异蛋白点进行了质谱分析,其中7个鉴定成功,分别是来自一种稀有细菌的凝结因子5/8型功能蛋白,微单孢菌属的苹果酸脱氢酶,糖红孢红霉菌的葡萄糖-6-磷酸异构酶和羧肽酶前体蛋白,外子藻的功能未知蛋白以及小麦的木聚糖酶抑制剂和几丁质酶。     

琼脂糖酶产生菌的筛选和培养基优化

从太岁中筛选得到一株初始产酶较高的琼脂糖酶产生菌,经形态和分子生物学分析方法鉴定之后,认定其属于类芽孢杆菌属(Paenibacillus),命名为Paenibacillus sp. P1(简称为P1)。P1为革兰氏阴性菌,短杆状细胞,对明胶和纤维素都没有水解活性。研究该菌的生长及产酶过程发现,该菌株最适发酵产酶时长是40 h。利用单因素实验对发酵培养基进行优化,最终确定了最适合菌株P1产琼脂糖酶的发酵培养基配方为:Agar 3 g/L、蛋白胨2 g/L、K_2HPO_4·3H_2O 1.0 g/L、NaCl 0.3 g/L、MgSO_4·7H_2O 0.05 g/L、FeSO_4·3H_2O 0.02 g/L、CaCl20.04g/L。菌株P1在优化后的培养基中发酵40 h,琼脂糖酶产量达到了3.47×10~4U/L,是优化前产酶水平的3.4倍。实验结果为非海洋来源的产琼脂糖酶菌株筛选和琼脂糖酶的放大发酵奠定了基础。