环糊精葡萄糖基转移酶合成AA-2G反应条件初探

为了探究重组菌株pET-28a(+)-cgt-T1/BL21(DE3)产生的环糊精葡萄糖基转移酶（Cyclodextrin glucosyltransferase,CGTase）催化合成2-O-α-D-吡喃葡萄糖基-L-抗坏血酸（Ascorbic acid 2-glucoside,AA-2G）的效果，用LB发酵培养基表达重组蛋白CGTase-T1，经亲和纯化柱纯化并浓缩后，测定其β-环化活性和歧化活性。以维生素C(Vitamin C,VC)和β-环糊精为底物，酶法合成AA-2G，并通过单因素优化实验，进一步探究了不同糖基供体、底物浓度、pH、温度、底物比例、蛋白浓度以及反应时间对AA-2G产量的影响，对酶合成AA-2G的动力学进行了分析。结果表明：此酶具有合成AA-2G的能力，未优化前AA-2G的产量为0.67 g/L。优化后，考虑到低成本和经济效益，选择可溶性淀粉和麦芽糊精为糖基供体，当糖基供体为可溶性淀粉时，底物浓度为70 g/L，反应pH4.5，反应温度37℃，底物比例3/3(VC/糖基供体)，蛋白浓度5.0 mg/mL，反应时间为42 h时，该重组CGTase催化合成AA-2G...     

易错PCR技术改造β-环糊精葡萄糖基转移酶的催化特性

β-环糊精是一种环状多糖,可用于改变某些大分子化合物的理化性质,在食品、生物及医药等领域都具有很高的工业应用前景。通过利用β-环糊精葡萄糖基转移酶（β-CGTase）,使其作用于淀粉等含有葡萄糖基的多糖化合物,可转化生成β-环糊精。该研究采用易错PCR技术对来源于Paenibacillus campinasensis的β-CGTase进行定向进化,得到酶活力高的突变体,并对突变体进行镍柱亲和纯化与酶学性质分析。实验最终获得了一株突变体Q280L,其酶活力与原始-CGTase相比提高了42.10%,对β-环糊精的转化率提高了7.60%,最适反应pH值和稳定性均有所变化,底物亲和力提高46.13%。经序列比对及结构分析,发现突变体Q280L与野生β-CGTase相比,第280位氨基酸残基种类以及周围氢键发生变化。该试验结果表明,基于易错PCR技术对β-CGTase基因进行定向进化,可提高酶活力和改善酶学性质,为实现β-环糊精的工业生产提供参考意义。     

柔软粘稠油脂的研究及应用

柔软粘稠油脂是一种新型食用特种油脂。八十年代初,由日本首先开发,产品问世后,在食品工业界得到广泛应用,在国     

沥青路面预防性养护评价决策

预防性养护将成为我国高速公路养护管理一个重要的方向.截至目前,我国在预防性养护研究方面尚未有具体的养护指标及标准.本文针对里面早期破坏现象,在保证路面结构强度的前提下,将路面损坏、平整度、车辙、抗滑性能作为基于预防性养护的路面使用性能评价指标,建立相应的评价体系.     

国土空间规划体系下的化工园区总体规划编制要点分析和探究

化工园区不同于城市和其他园区,具有生产主导性、企业多元性、潜在高危性的明显特性,化工园区的规划设计在满足国土空间规划的规定之外,更要符合化工园区相关规范要求并适宜化工生产的特点。因此,化工园区规划更加关注产业业态的体系、空间供给的弹性、服务设施的独立、安全生产的保障等方面。结合作者近期编制的化工园区规划实践,对国土空间规划体系下的新时期化工园区总体规划编制要点进行探究。     

大健康背景下智能空调设计策略探究

在市场调研基础上探讨智能空调的健康设计研究,对智能空调的定位以及智能空调交互设计系统各要素所涉及的健康理念进行细致深入的讨论,归纳出健康设计原则与策略。